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基本参数 1.保留值 进样 to (1)保留时间“tR”:进样至出峰的时间。 (2)死时间“to”:不被柱子吸附的惰性物质的出峰时间。死时间“to”的测定通常是使用 不被柱子保留而又有紫外吸收的惰性物质,例如:正相色谱常用四氯化碳,反相色谱 常用甲醇、尿嘧啶、NaNO2、NaNO3等 (3)容量因子“k” k=-0 或:k=溶质在固定相中的量 溶质在流动相中的量 “k”是比“tR”还常用的保留值,它与柱子的大小及流速无关,只与溶质在固定 相和流动相的分配性质、柱温以及相空间比(即固定相和流动相之体企积比)有关。“k” 又定义为在分配平衡时某溶质在两相中绝对量之比,消除了保留值的波动因素,而平衡 常数“K”是平衡时物质在两相中的浓度比。 k值的范围:04<k<20~30k’=2~5为佳,过大则耗时太长 (4)保留体积:VR=t·Fc(Fc--流动相的流速mL/min) VR是在t时间内流动相流过柱子的体积。 调整保留时间:tR'=tk-to 调整保留体积:VR'=VR-VR°=tg·Fc (5)选择性指标“α””和相对保留值“a” a可以更直观和方便地反映色谱峰分离的好坏: 进样 R(1) 相对保留值(分离因子):143 7.2 基本参数 1. 保留值 进样 t0 tR ⑴保留时间“tR”:进样至出峰的时间。 ⑵死时间“t0”:不被柱子吸附的惰性物质的出峰时间。死时间“t0”的测定通常是使用 不被柱子保留而又有紫外吸收的惰性物质,例如:正相色谱常用四氯化碳,反相色谱 常用甲醇、尿嘧啶、NaNO2、NaNO3 等。 ⑶容量因子“k’”: 0 0 ' t t t k R- = 或: 溶质在流动相中的量 溶质在固定相中的量 k'= “k’”是比“tR”还常用的保留值,它与柱子的大小及流速无关,只与溶质在固定 相和流动相的分配性质、柱温以及相空间比(即固定相和流动相之体企积比)有关。“k’” 又定义为在分配平衡时某溶质在两相中绝对量之比,消除了保留值的波动因素,而平衡 常数“K”是平衡时物质在两相中的浓度比。 k’值的范围: 0.4<k’<20~30 k’=2~5 为佳,过大则耗时太长。 ⑷保留体积:VR=tR• FC ( FC --- 流动相的流速 mL/min ) VR是在 tR时间内流动相流过柱子的体积。 调整保留时间:tR’= tR-t0 调整保留体积:VR’= VR-VR 0=tR’ • FC ⑸选择性指标“α’”和相对保留值“α” α’可以更直观和方便地反映色谱峰分离的好坏: (1) (2) ' R R t t α= 进样 tR(1) tR(2) 相对保留值(分离因子):
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