第一节植物育种的细胞和组织培养技术 一、细胞和组织培养与作物育种 1、#体细胞克隆变异及其有种利用：(1)体细胞克隆变异的遗传基础：(2)突变体的筛选：(3) 在作物改良上的应用： 2、◆单倍体细胞培养及有种利用：(1)单倍体细胞培养在遗传和有种中的应用价值：(2)离体 培养条件下的小孢子发育：(3)影响花药培养的因素：(4)花粉（小孢子）培养：(5)单倍体诱导 中存在的问题：(6)单倍体细胞培养与植物育种。 3、幼胚培养与远缘杂交育种： 4、种质的长期保存： 5、脱毒及繁殖重要品种或材料： 6、人工种子的生产。 二、植物原生质体培养和体细胞杂交 1、原生质体的分离：分离方法、影响原生质体分离的因素、原生质体的收集、纯化和活力测定： 2、原生质体培养： 3、细胞融合（体细胞杂交）：(1)融合方法：(2)融合方式：(3)杂种细胞的筛选：(4)杂种 的鉴定：(5)细胞融合与作物育种。 第二节 作物育种的转基因技术 一、转基因技术的发展现状 国际转基因植物研究与现状：我国转基因作物研究与利用概况。 二、转基因育种的程序 1、目的基因的获得：(1).根据基因表达的产物一蛋白进行基因克隆：(2).从基因组DNA或 mNA序列克隆基因：同源序列法、表达序列标签法、根据连锁图谱克隆目的基因、转座子标签法、 差异显示法： 2、目的基因重组质粒的构建： 3、受体材料的选择：良好的植物基因转化受体系统应满足的条件，常用的受体材料的类型： 4、转基因方法的确定和外源基因的转化：(1)载体介导转移系统：(2)外源基因直接导入法： 5、转化体的筛选和鉴定： 6、转化体的安全性评价和育种利用。 三、转基因作物品种的选育 1、转基因作物育种目标的制定： 2、转基因方法的确定及转基因植株的获得： 3、转基因作物品种的选有：(1)、纯系有种：(2)回交有种：(3)杂交有种通过转基因品种或 品系之间的相互杂交或与常规品种杂交、选择，选有出转基因新品种的方法：(4)杂种品种。 四、转基因作物的生物安全性 第三节分子标记辅助选择育种 一、◆分子标记的类型和特点 2、以分子杂交为基础的DNA标记技术： 2、以聚合酶链式反应为基础的各种DNA指纹技术：①单引物PCR标记：②双引物选择性扩 增的PCR标记：③需要通过克隆、测序来构建特殊双引物的PCR标记： 3、新型的分子标记，如单核苷酸多态性(SNP),表达序列标签(ST)。 二、常用分子标记的原理和遗传特性 1、RFLP:(1)RFLP标记的原理：(2)RFLP标记的特点： 2、AFLP:(1)AFLP标记的原理(2)AFLP分析的基本步骤(3)AFLP标记的特点： 3、SSR:(1)SSR标记的原理：(2)SSR标记程序：(3)SSR标记的特点： 三、重要农艺性状基因连锁标记的筛选技术 第一节 植物育种的细胞和组织培养技术 一、细胞和组织培养与作物育种 1、#体细胞克隆变异及其育种利用：（1）体细胞克隆变异的遗传基础；（2）突变体的筛选；（3） 在作物改良上的应用； 2、*单倍体细胞培养及育种利用：（1）单倍体细胞培养在遗传和育种中的应用价值；（2）离体 培养条件下的小孢子发育；（3）影响花药培养的因素；（4）花粉（小孢子）培养；（5）单倍体诱导 中存在的问题；（6）单倍体细胞培养与植物育种。 3、幼胚培养与远缘杂交育种； 4、种质的长期保存； 5、脱毒及繁殖重要品种或材料； 6、人工种子的生产。 二、植物原生质体培养和体细胞杂交 1、原生质体的分离：分离方法、影响原生质体分离的因素、原生质体的收集、纯化和活力测定； 2、原生质体培养； 3、细胞融合（体细胞杂交）：（1）融合方法；（2）融合方式；（3）杂种细胞的筛选；（4）杂种 的鉴定；（5）细胞融合与作物育种。 第二节 作物育种的转基因技术 一、转基因技术的发展现状 国际转基因植物研究与现状；我国转基因作物研究与利用概况。 二、*转基因育种的程序 1、目的基因的获得：（1）.根据基因表达的产物—蛋白进行基因克隆；（2）.从基因组 DNA 或 mRNA 序列克隆基因：同源序列法、表达序列标签法、根据连锁图谱克隆目的基因、转座子标签法、 差异显示法； 2、目的基因重组质粒的构建； 3、受体材料的选择：良好的植物基因转化受体系统应满足的条件，常用的受体材料的类型； 4、转基因方法的确定和外源基因的转化：（1）载体介导转移系统；（⒉）外源基因直接导入法； 5、转化体的筛选和鉴定； 6、转化体的安全性评价和育种利用。 三、转基因作物品种的选育 1、转基因作物育种目标的制定； 2、转基因方法的确定及转基因植株的获得； 3、转基因作物品种的选育：（1）、纯系育种；（2）回交育种；（3）杂交育种通过转基因品种或 品系之间的相互杂交或与常规品种杂交、选择，选育出转基因新品种的方法；（4）杂种品种。 四、转基因作物的生物安全性 第三节 分子标记辅助选择育种 一、*分子标记的类型和特点 2、 以分子杂交为基础的 DNA 标记技术； 2、以聚合酶链式反应为基础的各种 DNA 指纹技术：①单引物 PCR 标记；②双引物选择性扩 增的 PCR 标记；③需要通过克隆、测序来构建特殊双引物的 PCR 标记； 3、新型的分子标记，如单核苷酸多态性（SNP），表达序列标签（EST）。 二、常用分子标记的原理和遗传特性 1、RFLP：（1）RFLP 标记的原理；（2）RFLP 标记的特点； 2、AFLP：（1）AFLP 标记的原理（2）AFLP 分析的基本步骤（3）AFLP 标记的特点； 3、SSR：（1）SSR 标记的原理；（2）SSR 标记程序；（3）SSR 标记的特点； 三、重要农艺性状基因连锁标记的筛选技术