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正常人外周血或细胞 1) RPMI1640培养基+15%小牛血清=5ml 37C,培养68hr 胞培养 ■加秋水仙素,培养2~4hr(抑制细胞分裂) 收集细胞 离心,去上清液(1000rpm/10min) ■低渗处理, 0.075MKcI,37℃,25min 染色体制 预固定,甲醇:冰醋酸=3:1 离心,去上清液(1000rpm/10min) 重复固定三次 备 制片,染色,观察,染色体分析 7 1) 细 胞 培 养 与 染 色 体 制 备 ◼ 正常人外周血或细胞 ◼ RPMI1640培养基+15%小牛血清=5ml 370C,培养68 hr ◼加秋水仙素,培养2~4 hr(抑制细胞分裂) 收集细胞 ◼ 离心,去上清液(1000rpm/10 min) ◼ 低渗处理,0.075 M KCI,370C,25min ◼ 预固定,甲醇:冰醋酸=3:1 离心,去上清液(1000rpm/10 min) 重复固定三次 ◼ 制片,染色,观察,染色体分析
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