提取技术:活性碳柱层析法、离子交换树脂——活性碳柱层析法、苦味酸盐精制法。 1、活性碳柱层析法 卵巢切碎,在 80——90℃热水中如热 30——40min,冷却后滤除凝固蛋白,滤液在 50℃ 条件下减压浓缩,除去分离的油层,在水层中加甲醇,除去产生的沉淀,滤液进一步浓缩后 甲活性碳柱层析,用水洗脱杂质后,再以稀醋酸—甲醇—水混合液洗脱收集主要成分。在药 性条件下将溶剂蒸发出后用氨水将浓缩液调节到微碱性,河豚毒素即可析出。 80—90℃ 过滤 卵巢切碎————— 凝固蛋白———滤液在 50℃下减压浓缩 30—40min 除去分离油层 甲醇 活性碳柱层析 ——————下层液——————滤液浓缩——————用水洗脱质 除产生的沉淀 洗脱液 ——————用稀醋酸一甲醇一水法混合液洗脱———TTX 主要成分 酸性条件加热 氨水 醋酸、甲醇、 ——————将溶剂(稀酸 甲醇)蒸出————TTX 析出————— 调节 PH 微碱性 乙醚再结晶 ———河豚毒素(10—13ug/gk 最小致死剂量)。 得率:1000kg 卵巢——10g 河豚毒素。 2、离子交换树脂—活性碳柱吸附层析出法。 水 加热 冷却 Amberlite IRC- 卵巢碎———提取液———冷却———黄色透明液————柱层析分 浸泡 4 次 煮沸 除 pr 50 树脂(NH4+) 用水洗 10% 离———— ————醋酸洗脱液 脱去杂质 醋酸洗脱 第二节 贝类毒素 麻痹性贝毒 腹泻性贝毒 雪茄毒素 神经性贝毒 记忆缺失性贝毒 习题提取技术:活性碳柱层析法、离子交换树脂——活性碳柱层析法、苦味酸盐精制法。 1、活性碳柱层析法 卵巢切碎,在 80——90℃热水中如热 30——40min,冷却后滤除凝固蛋白,滤液在 50℃ 条件下减压浓缩,除去分离的油层,在水层中加甲醇,除去产生的沉淀,滤液进一步浓缩后 甲活性碳柱层析,用水洗脱杂质后,再以稀醋酸—甲醇—水混合液洗脱收集主要成分。在药 性条件下将溶剂蒸发出后用氨水将浓缩液调节到微碱性,河豚毒素即可析出。 80—90℃ 过滤 卵巢切碎————— 凝固蛋白———滤液在 50℃下减压浓缩 30—40min 除去分离油层 甲醇 活性碳柱层析 ——————下层液——————滤液浓缩——————用水洗脱质 除产生的沉淀 洗脱液 ——————用稀醋酸一甲醇一水法混合液洗脱———TTX 主要成分 酸性条件加热 氨水 醋酸、甲醇、 ——————将溶剂(稀酸 甲醇)蒸出————TTX 析出————— 调节 PH 微碱性 乙醚再结晶 ———河豚毒素(10—13ug/gk 最小致死剂量)。 得率:1000kg 卵巢——10g 河豚毒素。 2、离子交换树脂—活性碳柱吸附层析出法。 水 加热 冷却 Amberlite IRC- 卵巢碎———提取液———冷却———黄色透明液————柱层析分 浸泡 4 次 煮沸 除 pr 50 树脂(NH4+) 用水洗 10% 离———— ————醋酸洗脱液 脱去杂质 醋酸洗脱 第二节 贝类毒素 麻痹性贝毒 腹泻性贝毒 雪茄毒素 神经性贝毒 记忆缺失性贝毒 习题