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一、基本原理 一个末端标记的DNA片段在4组互相独立的化学反应中分 别得到部分降解,其中每一组反应特异的针对某一种或 某一类碱基。因此生成4组放射性标记的分子,从共同起 点(放射性标记末端)延续到发生化学降解的位点。 ■由于每个化学反应体系中,化学试剂对DNA分子上某一 类碱基的降解是随机的,因此,每组混合物中均含有长 短不一的DNA分子,其长度取决于该组反应所针对的碱 基在原DNA全片段上位置。 此后,各组均通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,再通 过放射自显影来检测末端标记的分子。 3/92 3/92 一、基本原理 ▪ 一个末端标记的DNA片段在4组互相独立的化学反应中分 别得到部分降解,其中每一组反应特异的针对某一种或 某一类碱基。因此生成4组放射性标记的分子,从共同起 点(放射性标记末端)延续到发生化学降解的位点。 ▪ 由于每个化学反应体系中,化学试剂对DNA分子上某一 类碱基的降解是随机的,因此,每组混合物中均含有长 短不一的DNA分子,其长度取决于该组反应所针对的碱 基在原DNA全片段上位置。 ▪ 此后,各组均通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,再通 过放射自显影来检测末端标记的分子
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