碱变性法提取质粒的基本原理 碱性环境中，线性的大分子量细菌染色体DNA变性，而 共价闭环质粒DNA变性后因拓扑结构纠缠在一起。 ·将PH调至中性并有高盐浓度存在的条件下，染色体 DNA之间交联形成不溶性网状结构，大部分DNA和蛋白 质在去污剂SDS的作用下形成沉淀，而质粒DNA复性， 恢复为可溶状态，通过离心可除去大部分细胞碎片、染 色体DNA、RNA及蛋白质，质粒DNA尚在上清中，再 冠 用酚氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。 5/855/85 碱变性法提取质粒的基本原理 ▪ 碱性环境中，线性的大分子量细菌染色体DNA变性，而 共价闭环质粒DNA变性后因拓扑结构纠缠在一起。 ▪ 将PH调至中性并有高盐浓度存在的条件下，染色体 DNA之间交联形成不溶性网状结构，大部分DNA和蛋白 质在去污剂SDS的作用下形成沉淀，而质粒DNA复性， 恢复为可溶状态，通过离心可除去大部分细胞碎片、染 色体DNA、RNA及蛋白质，质粒DNA尚在上清中，再 用酚氯仿抽提进一步纯化质粒DNA