等电点时:[Gy-Gly+ IGly[H] IGly I K1·K2=2Gb [G] 等电点时氢离子浓度用I表示 I=KIK2 PF=/2(pKI+pK2) 中性ay=pn- COOH pK-M1 酸性asK- COOH PAR 碱性aapl pKa -Nh, pKg 氨基酸在等电点状态下,溶解度最小 pH>pI时,氨基酸带负电荷,OOOH解离成COO,向正极移动。 Ⅰ=pI时,氨基酸净电荷为零 pH<pI时,氨基酸带正电荷,NH2解离成NH3,向负极移动。 以Gy为例 pH>2.34 正 +1.0—+0.5 pH=234 正 0.5 H-597正 597~pH<960负 0--0.5 H>9 负 0.5--1.0 问题: (1)pH=pK/时,缓冲能力最大,等电点时缓冲能力最小。为什么? (2)p的计算(氨基酸,寡肽),等电点时各组分的比例分析 (3)不同pH下的组成分析和电泳行为 pH>pI时,氨基酸带负电荷,COOH解离成COO,向正极移动 pH=pl时,氨基酸净电荷为零,溶解度最 pH<pI时,氨基酸带正电荷,NH2解离成NH3,向负极移动。 (4)利用p和p确定各种氨基酸适合的酸碱缓冲范围 (5)计算不同氨基酸水溶液的pH值 (6)绘制滴定曲线(GLu) 根据P2页表3-7中Gu的数据( pKI aCOOH219,pK2aNH967, pKRR-COOH425,p322) ①绘出滴定曲线 ②指出Gu和Gu各一半时的pH值 ③指出Gu总是带正电荷的pH范围 ④指出Gu*和G能作为缓冲液使用的p范围１０ 等电点时：[Gly-]=[Gly+] 等电点时氢离子浓度用 I 表示 I 2=K1·K2 PI=1/2(pK1+pK2) 氨基酸在等电点状态下，溶解度最小 pH > pI 时，氨基酸带负电荷，-COOH 解离成-COO-，向正极移动。 pH = pI 时，氨基酸净电荷为零 pH < pI 时，氨基酸带正电荷，-NH2解离成-N+H3，向负极移动。 以 Gly 为例 pH>2.34 正 +1.0 — +0.5 pH=2.34 正 +0.5 2.34<pH<5.97 正 0.5 — 0 5.97<pH<9.60 负 0 — -0.5 pH>9.60 负 -0.5 — -1.0 问题： （1）pH = pKa / 时，缓冲能力最大，等电点时缓冲能力最小。为什么？ （2）pI 的计算（氨基酸，寡肽），等电点时各组分的比例分析 （3）不同pH 下的组成分析和电泳行为 pH > pI 时，氨基酸带负电荷，-COOH 解离成-COO-，向正极移动。 pH = pI 时，氨基酸净电荷为零，溶解度最小 pH < pI 时，氨基酸带正电荷，-NH2解离成-N+H3，向负极移动。 （4）利用pI 和 pKa /确定各种氨基酸适合的酸碱缓冲范围 （5）计算不同氨基酸水溶液的pH 值 （6）绘制滴定曲线（Glu） 根据 P92 页表 3-7 中 Glu 的数据（pK1α-COOH 2.19， pK2α-N+H39.67，pKR R-COOH 4.25，pI 3.22） ①绘出滴定曲线 ②指出 Glu-和 Glu=各一半时的pH 值 ③指出 Glu 总是带正电荷的pH 范围 ④指出 Glu±和 Glu-能作为缓冲液使用的pH 范围 [ ] [ ] [ ] [ ] [ ][ ] 2 1 2 2 + − +  − + • = • = Gly Gly K K H Gly Gly H K 2 . 2 . 2 . 3 3 R R pK NH pK a apI pK COOH pK a apI pK COOH pK NH a apI + + + − = − = − − =     碱性 酸性 中性