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a.先将酪素溶液放入(40±0.2)摄氏度恒温水域中,预热5min b.按下列程序操作:取10ml试管,5ml10倍 试管A(空白) 试管B(酶试样,作三个平行样) 加酶液2.00mL 加酶液2.00mL ↓(40±0.2℃),2min ↓(40±0.2℃),2min 加三氯乙酸400mL(摇匀) 加酪素2.00mL(摇匀) ↓(40±0.2℃),10min ↓(400.2℃),10min 加酪素2.00mL(摇匀) 加三氯乙酸4.00mL(摇匀) 取出静止10min,过滤 取出静止10min,过滤 在275nm波长下,用10mm 在275nm波长下,用10mm 比色皿测其吸光度 比色皿测其吸光度 (5)计算 X=AxK×8/2×1/10×n×E=2/5×A×K×n×E 式中X—样品的酶活力(ug) A——试样溶液的平均吸光度 K—吸光常数(K=135) 8反应试剂的总体积(mL) 2—吸取酶液2.00mL,以1mL计 l/10反应时间10min,以1min计 稀释倍数 E——紫外法与福林法的换算系数(取0.50) 22 a. 先将酪素溶液放入(40±0.2)摄氏度恒温水域中,预热 5 min; b. 按下列程序操作:取 10ml 试管,5ml 10 倍 试管 A(空白) 试管 B(酶试样,作三个平行样) ↓ ↓ 加酶液 2.00 mL 加酶液 2.00 mL ↓(40±0.2℃),2 min ↓(40±0.2℃),2 min 加三氯乙酸 4.00 mL(摇匀) 加酪素 2.00 mL(摇匀) ↓(40±0.2℃),10 min ↓(40±0.2℃),10 min 加酪素 2.00 mL(摇匀) 加三氯乙酸 4.00 mL(摇匀) ↓ ↓ 取出静止 10 min,过滤 取出静止 10 min,过滤 ↓ ↓ 在 275 nm 波长下,用 10 mm 在 275 nm 波长下,用 10 mm 比色皿测其吸光度 比色皿测其吸光度 (5)计算 X=A×K×8/2×1/10×n×E=2/5×A×K×n×E 式中 X——样品的酶活力(u/g) A——试样溶液的平均吸光度 K——吸光常数(K=135) 8——反应试剂的总体积(mL) 2——吸取酶液 2.00 mL,以 1 mL 计 1/10——反应时间 10 min,以 1 min 计 n——稀释倍数 E——紫外法与福林法的换算系数(取 0.50)
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