取干洁的计数板,平放于实验桌上,将干洁的盖玻片置于计数板正中。将盛有稀释血液的试管 缓慢摇动,使其内的稀释血液充分混匀,用癿小吸管吸取摇匀的稀释血液,滴一小滴于盖玻片边缘 的记数板上,使稀释血液通过毛细管的作用,进入并充满计数室。注意充液不可过多,也不可过 少。计数室内如有气泡时,应洗净计数板和盖玻片,干燥后重新充液。可以先充红细胞稀释液,充 好后进行红细胞计数。再将计数板和盖玻片洗净并干燥后,充白细胞稀释液,进行白细胞计数。也 可将红细胞稀释液和白细胞稀释液分别充入两个计数室,一次在显微镜下分别计数红细胞和白细 胞 计数 计数室充好后,将计数板放于显微镜载物台上,静置2~3min,然后在低倍镜下计数。计数白细 胞时,数四角4个大方格的白细胞总数:计数红细胞时,数中央大方格中四角的4个中方格和中央的 一个中方格(共5个中方格)的红细胞总数。为防止重数和遗漏,计数时应循一定的路径,即“从左 到右,自上而下”,对压在线上的血细胞,依照“数上不数下,数左不数右”的原则进行计数。计 数白细胞时,如发现各大方格的白细胞数相差8个以上:计数红细胞时各中方格的红细胞数相差20个 以上,表示血细胞分布不均匀,须把稀释液摇匀后重新充液和计数 计算 白细胞数:将4个大方格内数得的白细胞总数乘以50,即得每立方毫米血内的白细胞总数。因 为:(1)稀释液0.38m1加入血液20立方毫米(1m1=1立方厘米=1000立方毫米,故20立方毫米 =0.02m1)后,使血液稀释了20倍,换算成未稀释血液时应乘以20。(2)四角上4个大方格内的容积为 1×1×0.1×4=0.4立方毫米换算成每立方毫米时应乘以2.5,所以将4个大方格内数得的白细胞总数 乘以50(20×2.5=50),即为每立方毫米血内的白细胞总数 红细胞数:将5个中方格内数得的红细胞总数乘以10,000,即得每立方毫米血内的红细胞总数。 因为:(1)稀释液3.98ml加入血液20立方毫米(0.02ml)后,使血液稀释200倍,换算成未稀释血液时 应乘以200。(2)在计数室内只计数0.02立方毫米(即1个中方格的容积为0.2×0.2×0.1=0.004立 方毫米,5个中方格的容积为0.004×5=0.02立方毫米)换算成每立方毫米应乘以50。因此,将5个中 方格内数得的红细胞总数乘以10,000(200×50=10,000),即为每立方毫米血内的红细胞总数 6.清洁仪器 作完实验后,应将所用玻璃器皿清洗干净。吸管应先弃去管内的液体,然后用蒸馏水冲洗三 次,再吸入95%酒精冲洗1~2次,最后吸入乙醚冲洗1~2次,这些步骤都不应用口吹吸,而应用吸耳 球或泵抽吸。如吸管内有血凝块,不易洗去时,可将之侵λ1%氨水中,使血凝块溶解脱落后再按上 法洗涤。计数板和盖玻片用清水冲洗,再用绸布拭干收藏。 五、注意事项 1.采血时操作要迅速,避免血液凝固。 2.计数血细胞时,一定要认真、仔细,力求准确,减少误差。 六、要求 1.掌握微量采血和血细胞计数的方法 2.了解血细胞计数的意义取干洁的计数板，平放于实验桌上，将干洁的盖玻片置于计数板正中。将盛有稀释血液的试管 缓慢摇动，使其内的稀释血液充分混匀，用1mL小吸管吸取摇匀的稀释血液，滴一小滴于盖玻片边缘 的记数板上，使稀释血液通过毛细管的作用，进入并充满计数室。注意充液不可过多，也不可过 少。计数室内如有气泡时，应洗净计数板和盖玻片，干燥后重新充液。可以先充红细胞稀释液，充 好后进行红细胞计数。再将计数板和盖玻片洗净并干燥后，充白细胞稀释液，进行白细胞计数。也 可将红细胞稀释液和白细胞稀释液分别充入两个计数室，一次在显微镜下分别计数红细胞和白细 胞。 4．计数 计数室充好后，将计数板放于显微镜载物台上，静置2～3min，然后在低倍镜下计数。计数白细 胞时，数四角4个大方格的白细胞总数；计数红细胞时，数中央大方格中四角的4个中方格和中央的 一个中方格（共5个中方格）的红细胞总数。为防止重数和遗漏，计数时应循一定的路径，即“从左 到右，自上而下”，对压在线上的血细胞，依照“数上不数下，数左不数右”的原则进行计数。计 数白细胞时，如发现各大方格的白细胞数相差8个以上；计数红细胞时各中方格的红细胞数相差20个 以上，表示血细胞分布不均匀，须把稀释液摇匀后重新充液和计数。 5．计算 白细胞数：将4个大方格内数得的白细胞总数乘以50，即得每立方毫米血内的白细胞总数。因 为：(1)稀释液0.38ml加入血液20立方毫米（1ml=1立方厘米=1000立方毫米，故20立方毫米 =0.02ml）后，使血液稀释了20倍，换算成未稀释血液时应乘以20。(2)四角上4个大方格内的容积为 1×1×0.1×4=0.4立方毫米换算成每立方毫米时应乘以2.5，所以将4个大方格内数得的白细胞总数 乘以50（20×2.5=50），即为每立方毫米血内的白细胞总数。 红细胞数：将5个中方格内数得的红细胞总数乘以10,000，即得每立方毫米血内的红细胞总数。 因为：(1)稀释液3.98ml加入血液20立方毫米(0.02ml)后，使血液稀释200倍，换算成未稀释血液时 应乘以200 。(2)在计数室内只计数0.02立方毫米（即1个中方格的容积为0.2×0.2×0.1=0.004立 方毫米，5个中方格的容积为0.004×5=0.02立方毫米）换算成每立方毫米应乘以50。因此，将5个中 方格内数得的红细胞总数乘以10,000（200×50=10,000），即为每立方毫米血内的红细胞总数。 6．清洁仪器 作完实验后，应将所用玻璃器皿清洗干净。吸管应先弃去管内的液体，然后用蒸馏水冲洗三 次，再吸入95%酒精冲洗1～2次，最后吸入乙醚冲洗1～2次，这些步骤都不应用口吹吸，而应用吸耳 球或泵抽吸。如吸管内有血凝块，不易洗去时，可将之侵入1%氨水中，使血凝块溶解脱落后再按上 法洗涤。计数板和盖玻片用清水冲洗，再用绸布拭干收藏。 五、注意事项 1．采血时操作要迅速，避免血液凝固。 2．计数血细胞时，一定要认真、仔细，力求准确，减少误差。 六、要求 1．掌握微量采血和血细胞计数的方法。 2．了解血细胞计数的意义