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实验名称:番茄青枯病抗性鉴定方法 一、前言 培育抗青枯病品种是南方番茄育种的目标之一,由于抗病性受植株基因型、菌系及环 境条件影响较大,有时从外地引进的抗病品种在本地并不表现抗病性,抗病育种必须立足 于本地进行。学会识别病害的症状,了解发病规律,掌握抗性鉴定的方法是进行番茄抗青 枯病育种的基础。抗病性鉴定多用根接法,由于病害症状表现受环境影响较大,接种时气 低是 长键因素,因而接种应尽量在高温季节进行, 般要求夜间气温不低于20℃,白 天气温在28℃以上。 二、实验目的 本实验通过对不同抗性的番茄材料接种鉴定,掌握抗病性鉴定的实验设计方法,熟悉 接种及记录技术要点,了解不同育种材料的抗性差异,使学生对抗病鉴定的技能得到训练。 三、材料与方法 (一)实验材料 1、番茄材料 抗性不同的番茄材料或品种(高抗材料:湘引791、亚鲜,中抗材料:GA,感病 材料 红玫瑰、Foa-Dade)。上述各材料用营养杯培育成4一5片真叶的壮苗。 2、仪 杯,吸管,载玻片,剪刀,刀片,量简,恒温箱,三角瓶,试管,移液管,培养皿, 玻璃漏斗,玻璃棒等常规仪器和用品。 3、特殊用品 牛肉浸膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂、蒸馏水、70%酒精等。 (二)实验方法 1、观察病者症状 番茄苗期至结果期都可表现症状,初期时顶部叶片菱垂,然后是下部叶片枯萎,中 部叶片反应最迟,病株开始仅在中午萎垂,傍晚恢复,经2~3天即全部死亡,但茎叶仍 呈绿色,故名青枯病 病株根部常变褐腐烂,茎部表皮粗糙并可 生很多 不等的不 定根:切开地面茎可见维管束变成褐色,用手挤压或放于清水中可见浊白色的菌液流出。 2、接种体制备 将纯菌种用划线法在不含氯化三苯四氮唑的TZC培养基上扩大培养,36~48小时后 在培养皿中倒入少量蒸馏水,用无菌毛笔将平板表面菌落洗下用蒸馏 水调配 成108CUmL(预先调配对照液,OD60omm0.3)的细菌悬浮液,并于接种前将其稀释为 1×10?、1×10 CFU/mL,三种浓度都用于接种。 3、田间试验设计 人一组,每组选取均匀一致5种材料的幼苗30株,每10株为一重复,全班混合, 随机区组排列。 4、接种1 实验名称:番茄青枯病抗性鉴定方法 一、前言 培育抗青枯病品种是南方番茄育种的目标之一,由于抗病性受植株基因型、菌系及环 境条件影响较大,有时从外地引进的抗病品种在本地并不表现抗病性,抗病育种必须立足 于本地进行。学会识别病害的症状,了解发病规律,掌握抗性鉴定的方法是进行番茄抗青 枯病育种的基础。抗病性鉴定多用根接法,由于病害症状表现受环境影响较大,接种时气 温高低是关键因素,因而接种应尽量在高温季节进行,一般要求夜间气温不低于 20℃,白 天气温在 28℃以上。 二、实验目的 本实验通过对不同抗性的番茄材料接种鉴定,掌握抗病性鉴定的实验设计方法,熟悉 接种及记录技术要点,了解不同育种材料的抗性差异,使学生对抗病鉴定的技能得到训练。 三、材料与方法 (一)实验材料 1、番茄材料 抗性不同的番茄材料或品种(高抗材料:湘引 79-1、亚鲜,中抗材料:GA26,感病 材料:红玫瑰、Flora-Dade)。上述各材料用营养杯培育成 4—5 片真叶的壮苗。 2、仪器 烧杯,吸管,载玻片,剪刀,刀片,量筒,恒温箱,三角瓶,试管,移液管,培养皿, 玻璃漏斗,玻璃棒等常规仪器和用品。 3、特殊用品 牛肉浸膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂、蒸馏水、70%酒精等。 (二)实验方法 1、观察病害症状 番茄苗期至结果期都可表现症状,初期时顶部叶片萎垂,然后是下部叶片枯萎,中 部叶片反应最迟,病株开始仅在中午萎垂,傍晚恢复,经 2~3 天即全部死亡,但茎叶仍 呈绿色,故名青枯病。病株根部常变褐腐烂,茎部表皮粗糙并可产生很多长短不等的不 定根;切开地面茎可见维管束变成褐色,用手挤压或放于清水中可见浊白色的菌液流出。 2、接种体制备 将纯菌种用划线法在不含氯化三苯四氮唑的 TZC 培养基上扩大培养,36~48 小时后 在培养皿中倒入少量蒸馏水,用无菌毛笔将平板表面菌落洗下;用蒸馏水或自来水调配 成 108CFU/mL(预先调配对照液,OD600nm=0.3)的细菌悬浮液,并于接种前将其稀释为 1×107、1×106CFU/mL,三种浓度都用于接种。 3、田间试验设计 6 人一组,每组选取均匀一致 5 种材料的幼苗 30 株,每 10 株为一重复,全班混合, 随机区组排列。 4、接种
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