修饰,分别生成异氰酸酯和异硫氰酸酯,然后再与酶分子上的氨基反应形成酰胺键或硫代酰胺键。 若载体上带有酰基叠氮基团,可在酸性条件下转变成异氰酸酯,再与酶反应。 HiNgE NH一 十NH-c-N(式中x为或s) HC⊥ Co-N3 ε.酰氯衍生物:将含有羧基的载体如 Amberite irc-50在亚硫酰氯溶液中回流,生成酰氯,可 在低温下与酶反应生成稳定的固定化酶 H2N- CooH一 Co-Cl co-田的 f.环碳酸衍生物:含有羟基的载体如多糖和聚烯丙基醇,在pH7~8含有二氯六环和三乙醇胺 的无水二甲亚砜溶液中,与氯甲酸乙酯反应生成环碳酸衍生物。它以环亚氨碳酸同样的方式与酶 的伯氨基反应。和环亚氨碳酸法相比,这种方法费用低,操作简单,也不用有毒化学试剂。 王zCH 十H2N-每 C=N一( g碳二亚胺法:用碳二亚胺(RN=C=N-R)活化载体或酶分子上的羧基,然后与酶分子或载 体上的氨基缩合生成酰胺键 ③烷基化和芳基化: a.活性卤素:用甲基丙烯酸和甲基丙烯酸-5-氟-2,4-二-硝基酰替苯胺聚合成的载体上含有活性 氟,可与酶分子上的氨基反应。或给含羟基的载体结合上一含卤素的基团,然后与酶分子的氨基 反应。后一种方法的主要缺点是酶和载体之间的酯键有时不够稳定 CHa-C-COOH H2N-() CH2-X o-Co-CH2-HN- (x=I Et Br) b.环氧氯丙烷:有羟基的载体在三氟化硼乙醚存在下与环氧氯丙烷反应,然后活性氯与酶分 子的氨基反应 4m④ CH2-CI +B0-m-1-H-m c.三氯均嗪法:先将三氯均嗪与载体上的羟基结合,再与酶分子的氨基结合 d.Ugi反应:四种功能团(羧基、氨基、醛基、异氰基)同时反应生成N-取代酰胺 R:,算ga R:2算 R-NH2 →2是g5 修饰，分别生成异氰酸酯和异硫氰酸酯，然后再与酶分子上的氨基反应形成酰胺键或硫代酰胺键。 若载体上带有酰基叠氮基团，可在酸性条件下转变成异氰酸酯，再与酶反应。 e. 酰氯衍生物：将含有羧基的载体如 Amberite IRC-50 在亚硫酰氯溶液中回流，生成酰氯，可 在低温下与酶反应生成稳定的固定化酶。 f. 环碳酸衍生物：含有羟基的载体如多糖和聚烯丙基醇，在 pH7～8 含有二氯六环和三乙醇胺 的无水二甲亚砜溶液中，与氯甲酸乙酯反应生成环碳酸衍生物。它以环亚氨碳酸同样的方式与酶 的伯氨基反应。和环亚氨碳酸法相比，这种方法费用低，操作简单，也不用有毒化学试剂。 g. 碳二亚胺法：用碳二亚胺（R-N=C=N-R'）活化载体或酶分子上的羧基，然后与酶分子或载 体上的氨基缩合生成酰胺键。 ③ 烷基化和芳基化： a. 活性卤素：用甲基丙烯酸和甲基丙烯酸-5-氟-2,4-二硝基酰替苯胺聚合成的载体上含有活性 氟，可与酶分子上的氨基反应。或给含羟基的载体结合上一含卤素的基团，然后与酶分子的氨基 反应。后一种方法的主要缺点是酶和载体之间的酯键有时不够稳定。 b. 环氧氯丙烷：有羟基的载体在三氟化硼乙醚存在下与环氧氯丙烷反应，然后活性氯与酶分 子的氨基反应。 c. 三氯均嗪法：先将三氯均嗪与载体上的羟基结合，再与酶分子的氨基结合。 d. Ugi 反应：四种功能团（羧基、氨基、醛基、异氰基）同时反应生成 N-取代酰胺