(4)自来水清洗 10 次，蒸馏水涮洗 3 次。晾干，高压灭菌(见(二)消毒与灭菌)。旧胶塞不必 用酸碱处理可直接用洗涤剂煮沸和清洗数次，过蒸馏水，晾干，包装并高压灭菌后，便可使 用。 （二）消毒 1．物理消毒法 (1)紫外线消毒 用于消毒空气、操作台面和一些不能用干热、湿热灭菌的培养器皿，如塑料 培养皿、培养板等。这是常使用的消毒方法之一。 (2)干热灭菌 主要用于玻璃器皿的灭菌。将用于细胞培养的器皿放人干燥箱内，加热至 160℃，保温 90－120 min。用于 RNA 提取实验的用品则需 180℃，保温 5－8 h。 (3)湿热灭菌 此方法也称为高压蒸汽灭菌，是最有效的一种灭菌方法。主要应用范围是布类、 橡胶制品(如胶塞)、金属器械、玻璃器皿、某些塑料制品以及加热后不发生沉淀的无机溶液 (如 Hanks 液、PBS、20×SSC 等)。手动高压灭菌锅操作如下： ①首先查看高压锅内的水是否充足，放人物品盖好盖。 ②加热高压锅。将放气阀打开，放气 5—10 min，以排除锅内的冷空气。 ③待锅内水沸腾后，落下放气阀继续升温升压，玻璃器皿等用 15 磅(121℃)30 min，胶塞、 塑料制品、溶液等可用 10 磅(115 ℃)20 min。调节火力大小保持该压力。 ④停止加热，待压力自然下降至 0 再打开放气阀排汽，开盖，取出高压灭菌的物品烘干。 电热自动灭菌锅使用说明(型号：SANYO Autoclave MLS-3020)： ①放气筒加水至 LOW 水平线处，将与高压锅相连的导气管插入放气筒里，然后将放气筒归于 原位。 ②打开高压锅盖，加入蒸馏水至高压锅底的水位线，水位线位于 V 型凹槽的 1／3－2／3 处。 ③打开电源。 ④设定高压温度及时间，高压锅的温度范围为 105－121℃，高压灭菌一般采用 121℃20—30 min。 ⑤把待高压的物品置于高压锅内，顺时针方向将 exhaust 钮旋至 close 位置