(用Km的倍数表示) (5)Km可用来确定酶活性测定时所需的底物浓度：当[SF10Km时， v=91%Vmax,为最合适的测定酶活性所需的底物浓度 (6)催化可逆反应的酶，对正逆两向底物的Km往往是不同的。根据Km可判定 反应方向。 (7)判定代谢反应的限速步骤。 (8)判定反应速度是否受底物浓度的调节。 (9)确定抑制剂对酶是竞争性还是非竞争性抑制作用。 4、米氏常数的求法 一双倒数作图法： 测定Km和V的方法很多，最常用的是Lineweaver--Burk的作图法一双倒数作图 法。 取米氏方程式的倒数形式： 1 1 1/w 1 +Ym (y=ax+b) 斜率=km/Wma 1/Vma 1/[S 二、pH对酶反应速度的影响 1、最适PH值：表现出酶最大活力的pH值 (1)过酸过碱导致酶蛋白变性 (2)影响底物分子解离状态 (3)影响酶分子解离状态 (4)影响酶的活性中心构象 三、温度对酶作用的影响 1、两种不同影响： (1)温度升高，反应速度加快： (2)温度升高，热变性速度加快。 2、最适温度(optimum temperature):（用 Km 的倍数表示） （5）Km 可用来确定酶活性测定时所需的底物浓度：当 [S]= 10Km 时， ν=91%Vmax ，为最合适的测定酶活性所需的底物浓度 （6）催化可逆反应的酶，对正逆两向底物的 Km 往往是不同的。根据 Km 可判定 反应方向。 （7）判定代谢反应的限速步骤。 （8）判定反应速度是否受底物浓度的调节。 （9）确定抑制剂对酶是竞争性还是非竞争性抑制作用。 4、米氏常数的求法 ——双倒数作图法： 测定 Km 和 V 的方法很多，最常用的是 Lineweaver–Burk 的作图法 — 双倒数作图 法。 取米氏方程式的倒数形式： 二、pH 对酶反应速度的影响 1、最适 PH 值：表现出酶最大活力的 pH 值 (1) 过酸过碱导致酶蛋白变性 (2) 影响底物分子解离状态 (3) 影响酶分子解离状态 (4) 影响酶的活性中心构象 三、温度对酶作用的影响 1、两种不同影响： (1) 温度升高，反应速度加快； (2) 温度升高，热变性速度加快。 2、最适温度 (optimum temperature)： ——1 v = —— km V · ——[S] 1 + ——Vm ax 1 （y = ax + b） 斜率= km/Vmax 1/ [S] 1/v 1/Vmax -1/km