实验1 植物细胞的质壁分离及死活鉴定 细胞是植物结构与功能的基本单位，原生质是细胞中有生命的部分。死、活细胞原生质的理化 性质有本质的差别。！活细胞的原生质膜系统具有半透性，可与外界溶液构成渗透系统，活细胞可 主动积累某些容质等：而死细胞丧失了这些特性。通过细胞活公染色质壁分离现象的观察，了解原 生质体的某些性质，如粘滞性等，以加深对有关理论的理解。 一、植物细胞的活体染色与死活鉴定 【原理】 活体染色是利用某种对植物无害的染料溶液对活细胞进行染色的技术。中性红是常用的活体染 料之一，它是一种弱碱性p指示剂，变色范围在pH6.4一8.0之间（山红变黄）。在中性或微碱性 环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中分泌，山于液泡在一般情况下呈酸性反应，因 此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下，原生质和细胞壁一般 不者色：死细胞山于原生质变性凝周，细胞液不能维持在液泡内，因此，用中性红染色后，不产生 液泡着色现象。相反，中性红的阳离子，却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质 与细胞核染色 【仪器设备】 1.显微镜： 2.小培养皿 3.载玻片和盖玻片 4.单面刀片： 尖头镊子 6.酒精灯： 7.火柴： 8.擦镜纸： 9.吸水纸适量 【试剂】 1.0.03 %中性红溶液： 2.1mol·L硝酸御溶液 【材料】 洋葱鳞茎（或大葱假茎基部）及小麦叶片。 【方法步遥】 片较幼的洋葱鳞片 用单面刀片在繽片内侧割划成0.5cm左右的小块，用尖头镊 子将内表皮小块轻轻撕下，即可投入中性红溶液染色（注意应将表皮内侧向下）。若用小麦叶片为 材料，可将叶片背面朝上平放在载玻片上，再将此载玻片放入盛有少量清水的培养皿内，用左手将 叶片按平，右手用刀片从一个方向轻轻利去下表皮和叶肉部分，只留下透明的上表皮细胞。当利到 只剩下少量叶肉细胞时要分小心，用力太重容易损伤表皮细胞 甚企只剩了 一层细胞壁 太轻 会留下过多的叶肉细胞，影响观察。除小麦外其他禾本科植物也可用此法制备表皮细胞制片。将利 好的制片切成约0.5cm2小块。 2.将制好的洋葱茎内表皮或小叶片上麦皮小块投入0.03%的中性红溶被中处角5一10 min,取出 2片 在蒸馏水中稍加冲洗，在我玻片上滴1滴蒸馏水，小心地将制片半展到载玻片 上，川盖玻片，在显微镜下观察，可看到细胞壁被染成红色，而原生质和液泡均不染色。 3.将步骤2中的活体染色制片取出几片放入pH略高于7.0的自来水中浸泡10~15mi,再汽 于载玻片上镜检，将发现细胞壁脱色，而液泡却被染成深红色。 为了确证中性红染色部位，可将上述洋葱内表皮染片浸入1m0l·L的硝酸钾溶液中浸泡10m 左右，然后取出观察。山于硝酸钾能使原生质强烈膨胀，发生帽状质壁分离，因而能清楚地区别开 1