自然科学进展——国家重点实验室通讯 第5卷 现矮化,未表现不亲和现象.本项目已进行的大多数融合组合都是针对砧木方向选配的 412体配融合一步获得三倍体无核柑桔类型 早在本研究开始,就注意到了这一方面.邓秀新等1990年已从柑桔的四分体小孢子中 分离出单倍体原生质体.将柚子的四分体单倍体原生质体与甜橙二倍体原生质体融合, 已再生出三倍体胚状体.并在这种体配融合后的原生质体培养过程中,首次观察到花粉管生 长和分裂现象;这说明控制花粉管生长的基因在四分体时期已转录或者表达.目前,已开展 多个组合的体配融合研究,其中甜橙与枳的体配融合已再生出植株,待进一步作遗传鉴定.获 得三倍体柑桔类型.三倍体柑桔大、无籽,是过去几十年柑桔育种者一直追求的目标之一 41.3不对称融合转移部分基因 vardi等采用了不对称融合体系,即将一方的原生质体用射线处理使其核失活;另一方, 采用代谢抑制剂碘乙酸处理,使胞质失活,再融合,获得了一批胞质杂种,染色体倍性不增 加而又达到了转移一些基因的目的3.本研究正在建立使双方原生质体失活的技术体系 4.1.4体细胞杂种作为一种桥粱,可使野生种的一些有利基因向裁培品种转移 目前已建立起的融合技术类似一座“桥梁”,它使一些不亲和,有性杂交有疃碍的两种 (属)间实现基因重组成为可能,花粉育性测定结果显示,榭枯体细胞杂种逯可育的,可作 为杂交亲本利用.实际上 Gmitter等(1993,私人逅信)已体细胞杂种的花粉与单胚性柑桔 品种杂交,得到了三倍体后代,植滦表现出野生种亲亦的菜些特征 4.2展望 植物原生质体融合技术首先在烟草上获得成功.经过20年的发展,正如许多人预料的 那样,首先应用的将是在无性繁殖的木本植物中,果树大多属于这一类植物.细胞融合获得 的优良个体,可通过无性方法繁殖成为无性系品种,获得“一劳永逸”的作用,而一些大田作 物往往因不育而不能保存,应用生产则更困难 参考文 I Soost R K, Cameron J w. Citrus, In: Janick J and Moore I N, eds. Advance in Fruit Breeding, Purdue Uni Press, West Lafayette, Indiana. 1975, 507-540 2 Mendel K. Bud mutation in citrus and their potential commercial value. Proc Int Soc Citriculture Tokyo), 1981 86~89 3邓秀新,章文才,柑桔原生质体融合及遗传转化的研究进展.果树科学,1991,8(1):51~58 J w, Gmitter Jr F G. Protoplast fusion and citrus improvement. Plant Breed Rev, 1990, 8: 339-374 A, Spiegel-Roy P, Galun E. Plant regeneration from citrus protoplasts: variability in methodological requirements among cultivars and species. Theor Appl Genet, 1982, 62: 171-176 6吴金虎,陈吉笙,章文才等,柑桔胚珠培养及胚状体发生的研究.果树科学,199,71):19~24 7 Murashige T, Tuoker D P H. Growth factor requirements of citrus tissue culture. Proc lst Int. Citrus Congress 8 Gmitter F G Jr. Moore G A. Plant regeneration from undeveloped ovules and embryogenic calli of citrus. Plant Cell Tiss Org Cult, 1990, 6: 139-147 9甘幂,章文才,邓秀新.从败育种子诱导柑桔的胚性愈伤组织,华中农业大学学报,1993,125490~42 10邓秀新,章文才,从山金柑试管实生苗直接诱导胚性愈伤组织的研究.中国柑桔,198,174):7~9 l1叶新荣,邓秀新,肖顺元等,柑桔种间原生质体融合植株再生及染色体数目变异的研究.实验生物学报,1993,26(1) 201994-2008ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.aLlrightsreservedhttp://www.cnkinet自然科学 进展 — 国家重 点 实验室通 讯 第 卷 现矮 化 , 未表现不 亲和 现象 本项 目已进行 的 大 多 数 融 合 组 合 都 是 针 对砧 木 方 向选配 的 体配融合一步获得三倍体无 核柑桔类型 早在本研究 开始 , 就注意到 了这一方 面 邓 秀新 等 年 已 从柑 桔 的 四 分 体小 抱 子 中 分 离出单倍体原生质体 】 将袖子 的 四分体单倍 体原 生质 体 与 甜 橙二 倍体原 生 质体融 合 , 已 再生 出三倍体胚状体 并在这种体配融合后 的原生质体培养过程 中 , 首次观察到 花粉管生 长和分裂现象 这说明控制花粉管生长的基 因在 四 分体时期 已转录或者表达 目前 , 已 开展 多个组合 的体配融合研究 , 其 中甜橙 与积的体配融合已再生出植株 , 待进一步作遗传鉴定 获 得 三 倍 体柑 桔 类 型 三倍体柑桔大 、 无籽 , 是过去几十年柑桔育种者一直追 求的 目标之一【 不对称融合转移部分基因 等采用 了不 对称融合体系 , 即将一方的原生质体用射线处理使其核失活 另一方 , 采用代谢抑制剂碘 乙 酸处理 , 使胞质失活 , 再融合 , 获得 了一批胞质杂种 , 染 色体倍性不增 加而又达到 了转移 一些基 因 的 目的 本研究 正 在 建 立 使 双 方 原 生质 体失 活 的技 术体系 体细胞杂种作为一种桥梁 , 可使野生 种的一些有利基因向栽培品种转移 目前 已 建 立起 的融合技 术类似 一 座 “ 桥 梁 ” , 它 使 一 些 不 亲 和 , 有性 杂 交 有 障碍 的 两 种 属 间实现基 因重 组成 为可能 花粉育性测 定 结 果 显示 , 柑桔体 细 胞杂 种 是 可 育 的 , 可 作 为杂交亲本利用 实 际上 而 等 , 私人通信 已 用 体细胞杂种 的花粉 与单胚性 柑 桔 品种 杂交 , 得到 了三倍体后 代 , 植株表现 出野生种亲本 的某些 特征 展望 植物原生质体融合技术首先在烟 草上获得成功 经过 年 的发 展 , 正 如 许多 人 预料 的 那样 , 首先应用 的将是在无性 繁殖 的木本植物 中 果树大 多属于这一类 植物 细胞融合获得 的优 良个体 , 可通过 无性方法繁殖成为无性 系 品种 , 获得 “ 一 劳永逸 ” 的作用 而 一些大 田作 物往往 因不育而 不 能保存 , 应用生产则更 困难 , 参 考 文 献 , 叭 阴 , 」自司 , 七 玫 界 , 川 , 印 一 喇 胡 , , 喝 坦 比 邝 理 汀 扣 , , 邓 秀新 , 章文才 柑枯原生质体融合及遗传转化的研究进展 果树科学 , 叨 , 厌 一 , 仙 仍 , 少〕 , 一 , 罗 · , 习 罗拙 阴 过 们。 明 此 七 胎 , , 吴 金虎 , 陈吉笙 , 章文才等 柑枯胚珠培养及胚状体发生 的研究 果树科学 , 蜘 , 一 比 ‘ 罗 , 因 哩 阴 钊 , , 一 打 , 罗 助 巴 卯罗 刀 谓 , 哭刃 , 一 甘霖 , 章文才 , 邓秀 新 从败 育种子 诱导柑桔 的胚性 愈伤组织 华 中农业大学学报 , 卯 , 双牙月如 一 心 邓 秀新 , 章文 才 从 山 金柑 试管 实生 苗直接诱导胚性 愈伤组 织的研究 中 国柑桔 , , 一 叶新荣 , 邓秀 新 , 肖顺元等 柑桔 种 间原生质体融 合植株再生 及 染色体数 目变 异 的研 究 实验生物学报 , 卯 , 斌