4)亘补共合成法:应用两株生物合成阻断变株,当 它们单独培养时均不能产生目的代谢产物,而将它们 进行混合培养时获得目的产物或者以后某一步中间体。 通过分别提取、分离和鉴别阻断变株积累的中间体和 共合成的产物,了解它们的阻断部位和顺序以及反应 过程,推断目的产物的生物合成途径 :将具有放射性同位素3H或者14C标 记的可疑前体物质加人到次级代谢产物产生菌的培养 基中,培养结束后,提取分离目的代谢产物,测定结 合到次级代谢产物的同位素含量和分布情况,可以判 断试验化合物是否参与代谢产物的生物合成 :用适当的方法从细胞中分离纯化 制得纯酶。将制得的纯酶和有关物质加人到反应体系, 进行酶促反应。检测反应体系中的底物和产物浓度, 判断该酶是否催化目的产物的生物合成• （4）互补共合成法：应用两株生物合成阻断变株，当 它们单独培养时均不能产生目的代谢产物，而将它们 进行混合培养时获得目的产物或者以后某一步中间体。 通过分别提取、分离和鉴别阻断变株积累的中间体和 共合成的产物，了解它们的阻断部位和顺序以及反应 过程，推断目的产物的生物合成途径。 • （5）同位素标记：将具有放射性同位素3H或者14C标 记的可疑前体物质加人到次级代谢产物产生菌的培养 基中，培养结束后，提取分离目的代谢产物，测定结 合到次级代谢产物的同位素含量和分布情况，可以判 断试验化合物是否参与代谢产物的生物合成。 • （6）无细胞抽提液：用适当的方法从细胞中分离纯化 制得纯酶。将制得的纯酶和有关物质加人到反应体系， 进行酶促反应。检测反应体系中的底物和产物浓度， 判断该酶是否催化目的产物的生物合成