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豆饼水解液和硫酸铵对发酵影响,选用L4正交表,结果如表4-2-4 表4-2-4正交实验结果 实验号豆饼水解液玉米浆NHSO:|产酸g 1(2.5% (3%) 21.0 2(1.0%) 2(3.0%)2(4%) 42.0 3 3(1.5%) 3(3.5%)3(5%) 4 38.0 3 22.0 6 3 24.0 8 1 36.0 9 30.0 28.0 33.0 37.0 31.0 26.0 35.0 极差 5.0 11.0 l10 表42-5方差分析表 方差来源偏差平方和自由度均方F值显著性 豆饼水解液5.51 2.76 23.0 玉米浆 20.47 硫酸铵 2143 2 10.7289.3 0.12 总和 47.73 F0(2,2)=990F0(2,2)=190 从正交实验结果可以看出,豆饼水解液、玉米浆、硫酸铵浓度的变化对发酵都有显著的 影响。豆饼水解液和玉米浆用以提供有机氮和FB31生长所必需的氨基酸,因此添加量过少 对发酵不利,但过高的添加量也会使产酸下降,这可能是因为在过多的添加量下发酵液中其 它氨基酸浓度的增大对FB3Ⅰ菌株合成赖氨酸有抑制作用。此外,从实验结果来看,玉米浆 浓度过高对发酵尤为不利,这可能是因为玉米浆除用以提供有机氮外,还含有大量菌体生长 所必需的因子,在过高的玉米浆浓度下,菌体生长过旺不利产酸。对黄色短杆菌的赖氨酸发 酵,硫酸铵是最好的无机氮源,有结果表明提高硫酸铵的浓度有刺激产酸的作用。本实验结 果表明对于FB31的赖氨酸发酵,硫酸铵浓度有一最佳值为4%,当硫酸铵进一步提高对发 酵影响不大。 实验得出FB31菌株发酵培养基的最适组成为(gL):葡萄糖130、玉米浆30、豆饼水解 液10、硫酸铵40、磷酸氢二钾1、七水合硫酸镁0.5、碳酸钙45。用该培养基发酵7h, 酸为42gL,和菌株FB21相比其产酸性能下降很多 保持高产菌株遗传性能的稳定,防止回复突变,是发酵工业生产中一个非常重要的问题 目前通常采用的一些方法有 (1)选育遗传性能稳定的菌株:经诱变处理后,在易出现回复突变株的培养基中反复传 代,选出不发生回复突变的菌株 (2)定向赋加生产菌的遗传标记:如选育双缺菌株,增加抗回复突变性能:对于抗性株, 尽量选育多重抗性突变株7 豆饼水解液和硫酸铵对发酵影响,选用 L3 4 正交表,结果如表 4-2-4。 表 4-2-4 正交实验结果 实验号 豆饼水解液 玉米浆 (NH4)2SO4 产酸(g/L) 1 1(0.5%) 1(2.5%) 1(3%) 21.0 2 2(1.0%) 2(3.0%) 2(4%) 42.0 3 3(1.5%) 3(3.5%) 3(5%) 31.0 4 1 2 2 38.0 5 2 3 1 22.0 6 3 2 1 33.0 7 1 3 2 24.0 8 2 1 3 36.0 9 3 2 1 30.0 K1 28.0 30.0 24.0 K2 33.0 37.0 33.0 K3 31.0 26.0 35.0 极差 5.0 11.0 11.0 表 4-2-5 方差分析表 方差来源 偏差平方和 自由度 均方 F 值 显著性 豆饼水解液 5.51 2 2.76 23.0  玉米浆 20.47 2 10.24 85.3  硫酸铵 21.43 2 10.72 89.3  误差 0.32 2 0.12 总和 47.73 8 F0.01(2,2)=99.0 F0.05(2,2)=19.0 从正交实验结果可以看出,豆饼水解液、玉米浆、硫酸铵浓度的变化对发酵都有显著的 影响。豆饼水解液和玉米浆用以提供有机氮和 FB31 生长所必需的氨基酸,因此添加量过少 对发酵不利,但过高的添加量也会使产酸下降,这可能是因为在过多的添加量下发酵液中其 它氨基酸浓度的增大对 FB31 菌株合成赖氨酸有抑制作用。此外,从实验结果来看,玉米浆 浓度过高对发酵尤为不利,这可能是因为玉米浆除用以提供有机氮外,还含有大量菌体生长 所必需的因子,在过高的玉米浆浓度下,菌体生长过旺不利产酸。对黄色短杆菌的赖氨酸发 酵,硫酸铵是最好的无机氮源,有结果表明提高硫酸铵的浓度有刺激产酸的作用。本实验结 果表明对于 FB31 的赖氨酸发酵,硫酸铵浓度有一最佳值为 4%,当硫酸铵进一步提高对发 酵影响不大。 实验得出 FB31 菌株发酵培养基的最适组成为(g/L ):葡萄糖 130、玉米浆 30、豆饼水解 液 10、硫酸铵 40、磷酸氢二钾 1、七水合硫酸镁 0.5、碳酸钙 45。用该培养基发酵 72 h,产 酸为 42 g/L,和菌株 FB 21 相比其产酸性能下降很多。 保持高产菌株遗传性能的稳定,防止回复突变,是发酵工业生产中一个非常重要的问题, 目前通常采用的一些方法有: (1)选育遗传性能稳定的菌株:经诱变处理后,在易出现回复突变株的培养基中反复传 代,选出不发生回复突变的菌株。 (2)定向赋加生产菌的遗传标记:如选育双缺菌株,增加抗回复突变性能;对于抗性株, 尽量选育多重抗性突变株
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