适宜的种龄应是菌体处于对数生长的中后期。这是因为处于对数生长期的菌体接种进行 发酵是能迅速生长,有利于缩短发酵周期。而且对数生长期末菌体浓度相对较高,更有利于 保持高的接种量。图4-2-2为FB31种子培养的生长曲线,从图中可以看出培养进行到17~19 h时,FB31菌株处于对数生长期末,所以选择种龄为17~19h。 图4-2-2FB31菌株在种子培养基中的生长曲线 (二)接种量对发酵的影响 培养17~19h的新鲜种子按不同的接种量接入发酵培养基中,实验结果如表4-2-1所示, 表明接种量以5%为好 表42-1不同接种量对发酵的影响 接种量/1 产酸/gL134.538841.836.0344 进一步研究发现最适的接种量很大程度上与种子的生长情况有关,实验结果如表4-2-2 所示。当种子OD值为018-~020时接种量以5%为好;当种子OD值较低,如OD值为0.085 时,接种量则以8%为宜。 表4-2-2种子OD值不同时接种量对发酵的影响 17~19h种子OD值 0.085 0.1 0.20 接种量/% 产量/gL 34.6 41.1 3 35.0 42.0 事实上由于温差、斜面接种量波动或其它因素的影响,种子培养17~19h后OD值的发 生改变是很难免的,而且有时会相差很大,这时可以通过改变接种量,或延长种子培养时间 来调整,以获得最佳的接种效果,保证发酵的稳产高产。 (三)初糖浓度对发酵的影响 如表42-3所示。当初糖浓度为13%时发酵的转化率最高,初糖浓度进一步提高时对发 酵不利,特别当初糖浓度为18%时FB3Ⅰ几乎不产酸,可见菌株不具备耐高糖的特性。 表42-3初糖浓度对发酵的影响 初糖浓度/gLl 105.0128.0148.0178.0 32.641.642.0 17.2 转化率/% 31.032.528.3 (四)发酵培养基的优化 FB31的发酵培养基成分包括碳源、氮源、无机盐等。碳源主要由葡萄糖提供:玉米 浆、豆饼水解液、(、NH)3SO4用以提供氮源;无机盐有磷酸氢二钾、七水合硫酸镁和碳酸钙 其中碳酸钙除用作钙盐外主要是起pH缓冲作用,使得发酵过程pH不致过低。固定培养基 组成为葡萄糖13%、磷酸氢二钾0.1%、七水合硫酸镁005%、碳酸钙4.5%,考察了玉米浆、6 适宜的种龄应是菌体处于对数生长的中后期。这是因为处于对数生长期的菌体接种进行 发酵是能迅速生长，有利于缩短发酵周期。而且对数生长期末菌体浓度相对较高，更有利于 保持高的接种量。图 4-2-2 为 FB31 种子培养的生长曲线，从图中可以看出培养进行到 17~19 h 时，FB31 菌株处于对数生长期末，所以选择种龄为 17~19 h。 图 4-2-2 FB31 菌株在种子培养基中的生长曲线 (二)接种量对发酵的影响 培养 17~19 h 的新鲜种子按不同的接种量接入发酵培养基中，实验结果如表 4-2-1 所示， 表明接种量以 5%为好。 表 4-2-1 不同接种量对发酵的影响 接种量/% 1 3 5 8 10 产酸/gL -1 34.5 38.8 41.8 36.0 34.4 进一步研究发现最适的接种量很大程度上与种子的生长情况有关，实验结果如表 4-2-2 所示。当种子 OD 值为 0.18~0.20 时接种量以 5%为好；当种子 OD 值较低，如 OD 值为 0.085 时，接种量则以 8%为宜。 表 4-2-2 种子 OD 值不同时接种量对发酵的影响 17~19 h 种子 OD 值 0.085 0.185 0.20 接种量/% 5 8 5 8 5 8 产量/ gL -1 34.6 41.1 41.3 35.0 42.0 35.1 事实上由于温差、斜面接种量波动或其它因素的影响，种子培养 17~19 h 后 OD 值的发 生改变是很难免的，而且有时会相差很大，这时可以通过改变接种量，或延长种子培养时间 来调整，以获得最佳的接种效果，保证发酵的稳产高产。 (三)初糖浓度对发酵的影响 如表 4-2-3 所示。当初糖浓度为 13%时发酵的转化率最高，初糖浓度进一步提高时对发 酵不利，特别当初糖浓度为 18%时 FB31 几乎不产酸，可见菌株不具备耐高糖的特性。 表 4-2-3 初糖浓度对发酵的影响 初糖浓度/ gL -1 105.0 128.0 148.0 178.0 产酸/ gL -1 32.6 41.6 42.0 17.2 转化率/% 31.0 32.5 28.3 9.6 (四)发酵培养基的优化 FB 31 的发酵培养基成分包括碳源、氮源、无机盐等。碳源主要由葡萄糖提供；玉米 浆、豆饼水解液、(NH4)2SO4 用以提供氮源；无机盐有磷酸氢二钾、七水合硫酸镁和碳酸钙， 其中碳酸钙除用作钙盐外主要是起 pH 缓冲作用，使得发酵过程 pH 不致过低。固定培养基 组成为葡萄糖 13%、磷酸氢二钾 0.1%、七水合硫酸镁 0.05%、碳酸钙 4.5%，考察了玉米浆