1. 将5μg含有oligo dT(引物)的磁珠与 RNA混合。 2. 合成双链cDNA。 3. 用NlaⅢ酶消化形成一条链末端有标签 的产物。 4. 将样品分成两份,连接成含有识别序 列的产物,以备用BsmF1消化。 5. 用Mme I切割每一个样品形成约60bp 的标签。 SAGE 步骤1. 将5μg含有oligo dT(引物)的磁珠与 RNA混合。 2. 合成双链cDNA。 3. 用NlaⅢ酶消化形成一条链末端有标签 的产物。 4. 将样品分成两份,连接成含有识别序 列的产物,以备用BsmF1消化。 5. 用Mme I切割每一个样品形成约60bp 的标签。 SAGE 步骤