华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程学 文本教案(第九 主讲教师:柳俊博士、教授 玻璃化冻存的材料在保存终止后,要求快速化冻,以防止由于次生结冰对组织细胞造成 的伤害。 五、再培养 经冻存的材料会不可避免地受到不同程度的伤害。为了减少再培养中的光抑制,利于离 体材料恢复生长,冻存的材料一般在黑暗或弱光下培养1~2周,再转入正常光下培养。再 培养所用的培养基一般是与保存前的相同,但有时需将大量元素或琼脂含量减半,有时则在 培养基中附加一定量的PⅤP、水解酪蛋白等成分以利于生长的恢复 第五节超低温保存过程中的遗传变异及其检测技术 无论哪种种质资源的保存方法都是以保持物种原有的遗传特性为出发点。在超低温保存 过程中,植物材料是否发生变异是育种工作者十分关心的问题。在超低温保存之前,外植体 材料、培养继代时间、培养基成分以及自然突变等因素都可能影响到保存材料的遗传稳定 为了掌握超低温保存材料的遗传变异情况,有必要在保存材料的恢复和再生阶段建立有 效的检测体系。目前,形态学观察、细胞学方法、同功酶、分子标记如RFLP和RAPD等检 测方法常常单独或结合起来用于遗传变异分析 思考题 1.植物离体超低温保存的概念及常用的超低温方法 2.植物材料超低温保存的细胞学基础 3.超低温保存的方法及其技术要点。 4.影响超低温保存效果的主要因素及调控措施,华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程学 文本教案(第九章) 主讲教师：柳俊博士、教授 玻璃化冻存的材料在保存终止后，要求快速化冻，以防止由于次生结冰对组织细胞造成 的伤害。 五、再培养 经冻存的材料会不可避免地受到不同程度的伤害。为了减少再培养中的光抑制，利于离 体材料恢复生长，冻存的材料一般在黑暗或弱光下培养 1～2 周，再转入正常光下培养。再 培养所用的培养基一般是与保存前的相同，但有时需将大量元素或琼脂含量减半，有时则在 培养基中附加一定量的 PVP、水解酪蛋白等成分以利于生长的恢复。 第五节 超低温保存过程中的遗传变异及其检测技术 无论哪种种质资源的保存方法都是以保持物种原有的遗传特性为出发点。在超低温保存 过程中，植物材料是否发生变异是育种工作者十分关心的问题。在超低温保存之前，外植体 材料、培养继代时间、培养基成分以及自然突变等因素都可能影响到保存材料的遗传稳定 性。 为了掌握超低温保存材料的遗传变异情况，有必要在保存材料的恢复和再生阶段建立有 效的检测体系。目前，形态学观察、细胞学方法、同功酶、分子标记如 RFLP 和 RAPD 等检 测方法常常单独或结合起来用于遗传变异分析。 思考题 1．植物离体超低温保存的概念及常用的超低温方法。 2．植物材料超低温保存的细胞学基础。 3．超低温保存的方法及其技术要点。 4．影响超低温保存效果的主要因素及调控措施