(1)重点：核糖体中tRNA的结合位点，核糖体的活性中心，蛋白质的生物学合成机制：遗传 密码的性质，起始密码子和终止密码子，tRNA组成和结构上的特点，tRNA的功能和类型，氨酰 -tNA合成酶的作用，核糖体的结构和功能：蛋白质的生物学合成机制（过程、起始因子、延伸因 子、释放因子)，蛋白质前体的加工修饰。 (2)难点：真核生物与原核生物翻译起始氨基酸、形成翻译起始复合物的区别：肽链的延伸 过程，肽链的终止：蛋白质转运机制的分类。 第五章分子生物学的研究方法(2学时) 1.教学内容 (1)重组DNA技术的发展史，重组DNM技术的基本工具，凝胶电泳的类型及制备，基因组DNA 文库的构建，mRNA的分离过程，cDNA文库的构建，基因文库的筛选方法，SNP的检测技术，cDNA 差示分析法、Gateway大规模克隆技术和基因图位克隆技术的原理，蛋白质质谱分析技术： (2)限制性核酸内切酶、载体、电泳迁移率、细菌转化、基因组DNA文库、SNP、DNA遗传标 记、等位位点、基因型和基因分型、haplotype、基因克隆、蛋白质组学： (3)核酸凝胶电泳技术的原理，PCR技术原理，实时荧光定量PCR分类，TaqMan探针具有的 三要素，基因组DNA大片段文库YAC、BAC文库的组成及优缺点，提高基因组DNA文库代表性和随 机性的策略： (4)总RNA的提取及注意事项，cDNA的合成，cDNA文库的特点，SNP的分类及应用： (5)基因克隆技术类型及其适用范围一重点掌握RACE技术的原理，双向电泳技术的原理， western blotting的技术原理、实验步骤及影响因素： (6)研究基因功能的常用分子生物学技术，基因表达系列分析技术、酵母单杂交系统、酵母 双杂交系统、细胞内蛋白质互作技术、噬菌体展示技术、蛋白质磷酸化分析技术的原理及应用， 原位杂交技术（自学），体外蛋白质互作技术（自学），利用酵母鉴定靶基因功能（自学）。 2.重、难点提示 (I)重点：核酸凝胶电泳技术的原理：PCR技术原理，RACE技术的原理；western blotting 的技术原理及实验步骤：基因芯片技术的原理：基因定点突变技术的原理、基因敲除技术的原 理：RNAi技术的原理。 (2)难点：CDNA文库的构建：基因文库的筛选方法：新方法如基因表达系列分析技术、RNA 选择性剪接、原位杂交技术、基因定点突变技术、基因芯片、基因敲除技术、RNAi技术等各项技 术原理的理解。 第六章基因的表达与调控（上）原核基因表达调控模式(3学时) 1.教学内容 (1)基因表达调控、操作子、弱化子、葡萄糖效应（降解物抑制作用）： (2)lac操纵子中的其它问题，trp操纵子弱化机制的实验依据，trp操纵子的其它调控机制， 双启动子的生理功能： (3)依据表达模式蛋白质的分类，原核生物基因表达的特点，原核生物基因表达调控的表 现，原核生物基因表达调控的类型与特点，乳糖操纵子、色氨酸操纵子组成及基因调控的机制；（1）重点：核糖体中 tRNA 的结合位点，核糖体的活性中心，蛋白质的生物学合成机制；遗传 密码的性质，起始密码子和终止密码子，tRNA 组成和结构上的特点，tRNA 的功能和类型，氨酰 -tRNA 合成酶的作用，核糖体的结构和功能；蛋白质的生物学合成机制（过程、起始因子、延伸因 子、释放因子），蛋白质前体的加工修饰。 （2）难点：真核生物与原核生物翻译起始氨基酸、形成翻译起始复合物的区别；肽链的延伸 过程，肽链的终止；蛋白质转运机制的分类。 第五章 分子生物学的研究方法（2 学时） 1．教学内容 （1）重组 DNA 技术的发展史，重组 DNA 技术的基本工具，凝胶电泳的类型及制备，基因组 DNA 文库的构建，mRNA 的分离过程，cDNA 文库的构建，基因文库的筛选方法，SNP 的检测技术，cDNA 差示分析法、Gateway 大规模克隆技术和基因图位克隆技术的原理，蛋白质质谱分析技术； （2）限制性核酸内切酶、载体、电泳迁移率、细菌转化、基因组 DNA 文库、SNP、DNA 遗传标 记、等位位点、基因型和基因分型、haplotype、基因克隆、蛋白质组学； （3）核酸凝胶电泳技术的原理，PCR 技术原理，实时荧光定量 PCR 分类，TaqMan 探针具有的 三要素，基因组 DNA 大片段文库 YAC、BAC 文库的组成及优缺点，提高基因组 DNA 文库代表性和随 机性的策略； （4）总 RNA 的提取及注意事项，cDNA 的合成，cDNA 文库的特点，SNP 的分类及应用； （5）基因克隆技术类型及其适用范围－重点掌握 RACE 技术的原理，双向电泳技术的原理， western blotting 的技术原理、实验步骤及影响因素； （6）研究基因功能的常用分子生物学技术, 基因表达系列分析技术、酵母单杂交系统、酵母 双杂交系统、细胞内蛋白质互作技术、噬菌体展示技术、蛋白质磷酸化分析技术的原理及应用， 原位杂交技术（自学），体外蛋白质互作技术（自学），利用酵母鉴定靶基因功能（自学）。 2．重、难点提示 （1）重点：核酸凝胶电泳技术的原理；PCR 技术原理，RACE 技术的原理；western blotting 的技术原理及实验步骤；基因芯片技术的原理；基因定点突变技术的原理、基因敲除技术的原 理；RNAi 技术的原理。 （2）难点：cDNA 文库的构建；基因文库的筛选方法；新方法如基因表达系列分析技术、RNA 选择性剪接、原位杂交技术、基因定点突变技术、基因芯片、基因敲除技术、RNAi 技术等各项技 术原理的理解。 第六章 基因的表达与调控（上）原核基因表达调控模式（3 学时） 1．教学内容 （1）基因表达调控、操作子、弱化子、葡萄糖效应（降解物抑制作用）； （2）lac操纵子中的其它问题，trp操纵子弱化机制的实验依据，trp操纵子的其它调控机制， 双启动子的生理功能； （3）依据表达模式蛋白质的分类，原核生物基因表达的特点，原核生物基因表达调控的表 现，原核生物基因表达调控的类型与特点，乳糖操纵子、色氨酸操纵子组成及基因调控的机制；