(3)1986年, T Cech发现在一定条件下,L19RNA可以催化 Poly C的切割与连接 答:(1)绝对专一性;(2)相对专一性(族专一性);(3)相对专一性(键专一性) (4)立体专一性(旋光异构专一性);(5)立体专一性(顺反异构专一性);(6)立体专一性(识别从化 学角度看完全对称的两个基团) 5.答:(1)蛋白浓度=02×6.25mg/2mL=0625mg/mL (2)比活力=(1500/60×1m/0.1mL)÷0.625mg/mL=400U/mg (3)总蛋白=0625mg/mL×1000mL=625mg (4)总活力=625mg×400U/mg=2.5×105U 6.答:(1)V-[S]图是双曲线的一支,可以通过其渐近线求Vmx,V=12Vmx时对应的[S]为Km;优点是 比较直观,缺点是实际上测定时不容易达到Vmax,所以测不准 (2)I/V~1S]图是一条直线,它与纵轴的截距为1/Vmx,与横轴的截距为-1/Km,优点是使用方便 Vm和Kn都较容易求,缺点是实验得到的点一般集中在直线的左端,作图时直线斜率稍有偏差 Km就求不准。 )V-V(S]图也是一条直线,它与纵轴的截距为Vmx,与横轴的截距为Vm/Km,斜率即为Km,优 点是求K比较方便,缺点是作图前计算较繁。 (4)[S]-(S]图也是一条直线,它与纵轴的截距为Km/Vm,与横轴的截距为-Km,优缺点与V-V[S] 图相似。 (5)直接线性作图法是一组交于一点的直线,交点的横坐标为Km,纵坐标为Vmax,是求Vma和Km 的最好的一种方法,不需计算,作图方便,结果准确。 7.答:(1)一些肠道寄生虫如蛔虫等可以产生胃蛋白酶和胰蛋白酶的抑制剂,使它在动物体内不致被消 化 (2)蚕豆等某些植物种子含有胰蛋白酶抑制剂,煮熟后胰蛋白酶抑制剂被破坏,否则食用后抑制胰蛋 白酶活性,影响消化,引起不适。 8.答:作N~1S图,可知是竞争性可逆抑制剂 9.答:(1)酶量(mmol)=1.2×5/150000=4.0×10-5mmol (2)碘乙酰胺量(mmol)=3.0×102/185=1.6×10-mmol,所以酶的催化亚基数为4。 10.答:据V[S]的米氏曲线,当底物浓度大大低于Km值时,酶不能被底物饱和,从酶的利用角度而言 很不经济:当底物浓度大大高于Km值时,酶趋于被饱和,随底物浓度改变,反应速度变化不大,不 利于反应速度的调节:当底物浓度在Km值附近时,反应速度对底物浓度的变化较为敏感,有利于 反应速度的调节。 11.答:底物与别构酶的结合,可以促进随后的底物分子与酶的结合,同样竞争性抑制剂与酶的底物结 合位点结合,也可以促进底物分子与酶的其它亚基的进一步结合,因此低浓度的抑制剂可以激活某 些别构酶 答:(1)当[S]Km时,V=1/2Vm,则Vmx=2×35=70 umol/min; (2)因为V=Vma/(1+Km/s]),所以Km=(VmV1=15×10molL: (3)因为[S>Km,所以V=Vmx=70 umol/min (4)V=Vma/(1+[]Ki)=40umol/min 13.答:酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基pK值为60-7.0.在生理条件下,一半解离,一半不解离,因 此既可以作为质子供体(不解离部分),又可以作为质子受体(解离部分),既是酸,又是碱, 作为广义酸碱共同催化反应,因此常参与构成酶的活性中心 14.答:(A)一(3)-(V); (B)一(4)一(Ⅲ),(Ⅳ) (C)一(7)-(Ⅷ) (D)一(1)一(Ⅸ) (E)一(2)-(I),(Ⅱ); F)一(5)-(Ⅵ),(Ⅶ) (G)-(6)（3）1986 年，T.Cech 发现在一定条件下，L19 RNA 可以催化 Poly C 的切割与连接。 4．答：（1）绝对专一性；（2）相对专一性（族专一性）；（3）相对专一性（键专一性）； （4）立体专一性（旋光异构专一性）；（5）立体专一性（顺反异构专一性）；（6）立体专一性（识别从化 学角度看完全对称的两个基团）。 5．答：（1）蛋白浓度=0.2×6.25mg/2mL=0.625mg/mL； （2）比活力=（1500/60×1ml/0.1mL）÷0.625mg/mL=400U/mg； （3）总蛋白=0.625mg/mL×1000mL=625mg； （4）总活力=625mg×400U/mg=2.5×105U。 6．答：（1）V~[S]图是双曲线的一支，可以通过其渐近线求 Vmax，V=1/2Vmax 时对应的[S]为 Km；优点是 比较直观，缺点是实际上测定时不容易达到 Vmax，所以测不准。 （2）1/V~1/[S]图是一条直线，它与纵轴的截距为 1/Vmax，与横轴的截距为-1/Km，优点是使用方便， Vmax 和 Km 都较容易求，缺点是实验得到的点一般集中在直线的左端，作图时直线斜率稍有偏差， Km就求不准。 （3）V~V/[S]图也是一条直线，它与纵轴的截距为 Vmax，与横轴的截距为 Vmax/Km，斜率即为-Km，优 点是求 Km比较方便，缺点是作图前计算较繁。 （4）[S]/V~[S]图也是一条直线，它与纵轴的截距为 Km/Vmax，与横轴的截距为-Km，优缺点与 V~V/[S] 图相似。 （5）直接线性作图法是一组交于一点的直线，交点的横坐标为 Km，纵坐标为 Vmax，是求 Vmax 和 Km 的最好的一种方法，不需计算，作图方便，结果准确。 7．答：（1）一些肠道寄生虫如蛔虫等可以产生胃蛋白酶和胰蛋白酶的抑制剂，使它在动物体内不致被消 化。 （2）蚕豆等某些植物种子含有胰蛋白酶抑制剂，煮熟后胰蛋白酶抑制剂被破坏，否则食用后抑制胰蛋 白酶活性，影响消化，引起不适。 8．答：作 1/V~1/[S]图，可知是竞争性可逆抑制剂。 9．答：（1）酶量（mmol）=1.2×5/150 000=4.0×10-5mmol； （2）碘乙酰胺量（mmol）=3.0×10-2 /185=1.6×10-4mmol，所以酶的催化亚基数为 4。 10．答：据 V~[S]的米氏曲线，当底物浓度大大低于 Km值时，酶不能被底物饱和，从酶的利用角度而言， 很不经济；当底物浓度大大高于 Km值时，酶趋于被饱和，随底物浓度改变，反应速度变化不大，不 利于反应速度的调节；当底物浓度在 Km 值附近时，反应速度对底物浓度的变化较为敏感，有利于 反应速度的调节。 11．答：底物与别构酶的结合，可以促进随后的底物分子与酶的结合，同样竞争性抑制剂与酶的底物结 合位点结合，也可以促进底物分子与酶的其它亚基的进一步结合，因此低浓度的抑制剂可以激活某 些别构酶。 12．答：（1）当[S]=Km时，V=1/2Vmax，则 Vmax=2×35=70μmol/min； （2）因为 V=Vmax/(1+Km/[s]),所以 Km=(Vmax/V-1)[s]=1.5×10 -5mol/L； （3）因为[S]>>Km,[I],所以 V=Vmax=70μmol/min； （4）V=Vmax/(1+[I]/Ki)=40μmol/min。 13．答：酶蛋白分子中组氨酸的侧链咪唑基 pK 值为 6.0~7.0,在生理条件下，一半解离，一半不解离，因 此既可以作为质子供体（不解离部分），又可以作为质子受体（解离部分），既是酸，又是碱，可以 作为广义酸碱共同催化反应，因此常参与构成酶的活性中心。 14．答：（A）―（3）―（Ⅴ）； （B）―（4）―（Ⅲ），（Ⅳ）； （C）―（7）―（Ⅷ）； （D）―（1）―（Ⅸ）； （E）―（2）―（Ⅰ），（Ⅱ）； （F）―（5）―（Ⅵ），（Ⅶ）； （G）―（6）