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生物大分子波谐学原理 吴季辉 同核核磁谱 在记录二维谱或三维谱等之前均需要记录一维氢谱,通常蛋 白质溶于水或适当的缓冲液,加5-10%的D,O作为锁场介质。 维氢谱可用于检查样品是否有足够浓度,通常16一32次采样要 能得到足够信噪比的谱图,甲基由于快速旋转呈现窄峰,而酰 胺质子由于化学交换及14N的标量弛豫呈现宽峰; 维氢谱还可用于检查样品的共振峰宽是否合理,蛋白质在 高浓度下容易聚集从而增宽谱线,严重时甚至H谱上看不到明 显的峰,样品在这种条件下显然无法进行核磁研究;一维氢谱 还可用于判别样品的化学位移分布情况,可判别样品是否变性, 同时也对研究工作的难度提供一些预测。 蛋白质的一维氢谱一般不应该有非常尖的峰,若出现这种峰 往往是残留的小分子杂质,当然蛋白质的末端及1oop区由于分子 运动较快也会出现一些较尖的峰。同核核磁谱 在记录二维谱或三维谱等之前均需要记录一维氢谱,通常蛋 白质溶于水或适当的缓冲液,加5-10%的D2O作为锁场介质。一 维氢谱可用于检查样品是否有足够浓度,通常16-32次采样要 能得到足够信噪比的谱图,甲基由于快速旋转呈现窄峰,而酰 胺质子由于化学交换及14N的标量弛豫呈现宽峰; 一维氢谱还可用于检查样品的共振峰宽是否合理,蛋白质在 高浓度下容易聚集从而增宽谱线,严重时甚至1H谱上看不到明 显的峰,样品在这种条件下显然无法进行核磁研究;一维氢谱 还可用于判别样品的化学位移分布情况,可判别样品是否变性, 同时也对研究工作的难度提供一些预测。 蛋白质的一维氢谱一般不应该有非常尖的峰,若出现这种峰, 往往是残留的小分子杂质,当然蛋白质的末端及loop区由于分子 运动较快也会出现一些较尖的峰。 生物大分子波谱学原理 吴季辉
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