实验五 食物中核黄素含量测定 （荧光法） （－）目的意义 核黄素是机体的物质代谢和能量代谢中不可缺少的物质。通过测定食物中核 黄素含量，可了解人体核黄素摄入情况。 （二）原理 核黄素受到波长为 440～500nm 的光照射后能产生光黄素（luniflavin），此 物质能产生较强的荧光。在稀溶液中其荧光强度与核黄素浓度成正比。 试液中再加人低亚硫酸钠（Na2S2O4），将荧光素还原为无荧光物质。然后再 测定试液中残余荧光物质的荧光强度，两者之差即为食品中核黄素所产生的荧光 强度。 （三）仪器与试剂 1．荧光光度计 2．高压消毒锅 3．锥形烧瓶，核黄素吸附柱（如图 6－1） 4. 1.0mol／L 盐酸溶液 吸取分析纯浓盐酸 83.3ml 于 1L 容量瓶中，加蒸馏 水稀释至刻度。 5. 0.lmol／L 盐酸溶液 将上液按 1：10 稀释。 6．4％氢氧化钠溶液，0.4％氢氧化钠溶液。 7．3％高锰酸钾溶液。 8．3％过氧化氢溶液。 9．核黄素储备液（23ug／ml） 精确称取已干燥过的核黄素（在干燥器中放 置 24h）25mg，加少量蒸馏水溶解后倒入 1L 容量瓶，加蒸馏水 500ml，加入 2.4ml 冰醋酸，将其放在温水中摇动使颗粒完全溶解，冷却后稀释至刻度，加入少量甲 苯，避光冷藏备用。 10. 核黄素工作液（0.lug／ml） 吸取上液 1.0ml，加水稀释至 250ml。避光， 贮于 4℃冰箱中可保存 1 周。 11．20％低亚硫酸钠溶液 用时现配，保存在冰水浴中，4h 内有效。 12. 0.04％溴甲酚绿指示剂 称取 0.1g 溴甲酚绿于小研钵中，加 1.4m1 0.4％实验五 食物中核黄素含量测定 （荧光法） （－）目的意义 核黄素是机体的物质代谢和能量代谢中不可缺少的物质。通过测定食物中核 黄素含量，可了解人体核黄素摄入情况。 （二）原理 核黄素受到波长为 440～500nm 的光照射后能产生光黄素（luniflavin），此 物质能产生较强的荧光。在稀溶液中其荧光强度与核黄素浓度成正比。 试液中再加人低亚硫酸钠（Na2S2O4），将荧光素还原为无荧光物质。然后再 测定试液中残余荧光物质的荧光强度，两者之差即为食品中核黄素所产生的荧光 强度。 （三）仪器与试剂 1．荧光光度计 2．高压消毒锅 3．锥形烧瓶，核黄素吸附柱（如图 6－1） 4. 1.0mol／L 盐酸溶液 吸取分析纯浓盐酸 83.3ml 于 1L 容量瓶中，加蒸馏 水稀释至刻度。 5. 0.lmol／L 盐酸溶液 将上液按 1：10 稀释。 6．4％氢氧化钠溶液，0.4％氢氧化钠溶液。 7．3％高锰酸钾溶液。 8．3％过氧化氢溶液。 9．核黄素储备液（23ug／ml） 精确称取已干燥过的核黄素（在干燥器中放 置 24h）25mg，加少量蒸馏水溶解后倒入 1L 容量瓶，加蒸馏水 500ml，加入 2.4ml 冰醋酸，将其放在温水中摇动使颗粒完全溶解，冷却后稀释至刻度，加入少量甲 苯，避光冷藏备用。 10. 核黄素工作液（0.lug／ml） 吸取上液 1.0ml，加水稀释至 250ml。避光， 贮于 4℃冰箱中可保存 1 周。 11．20％低亚硫酸钠溶液 用时现配，保存在冰水浴中，4h 内有效。 12. 0.04％溴甲酚绿指示剂 称取 0.1g 溴甲酚绿于小研钵中，加 1.4m1 0.4％