盐水瓶中的普通琼脂已手掌感触，若将瓶紧握手中觉得烫手，但仍能握持者，此即为倾倒 平皿的合适温度(50~60℃)，每只灭菌培养皿倒入约15~20ml,将皿盖盖上，并将 培养皿于桌面上轻轻回转，使培养基平铺于皿底，即成普通琼脂平板。 培养基中的某种成分，如血清、糖类、尿素、氨基酸等在高温下易于分解、变性，故应过 滤除菌，再按规定的量加入培养基中。 (3)鲜血琼脂培养基 将灭菌的普通琼脂培养基冷却至50℃左右，加入无菌的绵羊或家兔脱纤鲜血达5%（即 每100ml普通琼脂加入鲜血5~6ml),混合后，分装灭菌试管立即摆成斜面或倾注于平 皿内（如果琼脂温度过高，鲜血加入后则成紫褐色，温度过低，则鲜血加入琼脂易凝不易 混合。注意，混合时切勿产生气泡)待凝固后，置37℃培养24h,无菌检验合格方可应 用。 无菌血液是用无菌操作方法采自健康动物，通常是绵羊或家兔的血液，加到盛有5%灭菌 枸橼酸钠或3%灭菌肝素的100ml三角瓶内，或加到盛有玻璃小珠的灭菌三角瓶内摇动 纤后置冰箱中待用。 【细菌培养】 取实验斜面或平板上的单胞菌株，于普通平板或鲜血平板上分区划线，以得单菌落，观察 普通平板和鲜血平板上细菌的生长表现，观察的主要内容有 (1)大小：其大小以mm表示，微小菌落：针尖大，直径小于0.5mm,如支原体菌 落、猪丹毒杆菌菌落；小菌落：直径在0.5~1mm之间，如嗜血杆菌、布氏杆菌菌落 中等大小的菌落：直径在1~3m之间，如巴氏杆菌、沙门氏杆菌菌落；大的菌落：直 径大于3mm,如炭疽芽孢杆菌菌落等。 (2)形态：园形，不规则形（根状、树叶状） (3)边缘：整齐，不整齐（锯齿状、虫蚀状、卷发状） (4)表面：光滑、粘液状、粗糙、荷包蛋状、漩涡状、颗粒状 (5)隆起度：隆起，轻度隆起，中央隆起，平升状、扁平状，脐状（凹陷状） (6)颜色：无色、灰白色、白色、金黄色、红色、粉红色 (7)透明度：透明、半透明、不透明 (8)溶血性：B-溶血（完全溶血），α-溶血（不完全溶血），不溶血 挑单菌落接种于普通琼脂平板28℃，24h培养或接种于盛肉汤的三角烧瓶中，150 rpm,28℃，18-24h振荡培养。注意观察培养物的浑浊度（轻度浑浊、中度浑浊、浑 浊)、沉淀物的性状（颗粒状、絮状、粘稠状）、培养基表面是否形成菌膜、菌环以及培养 物的颜色等。盐水瓶中的普通琼脂已手掌感触，若将瓶紧握手中觉得烫手，但仍能握持者，此即为倾倒 平皿的合适温度（50 ～60 ℃ ），每只灭菌培养皿倒入约15 ～20ml ，将皿盖盖上，并将 培养皿于桌面上轻轻回转，使培养基平铺于皿底，即成普通琼脂平板。 培养基中的某种成分，如血清、糖类、尿素、氨基酸等在高温下易于分解、变性，故应过 滤除菌，再按规定的量加入培养基中。 （ 3 ）鲜血琼脂培养基 将灭菌的普通琼脂培养基冷却至50 ℃左右，加入无菌的绵羊或家兔脱纤鲜血达5 ％（即 每 100 ml 普通琼脂加入鲜血5 ～6 ml ），混合后，分装灭菌试管立即摆成斜面或倾注于平 皿内（如果琼脂温度过高，鲜血加入后则成紫褐色，温度过低，则鲜血加入琼脂易凝不易 混合。注意，混合时切勿产生气泡）待凝固后，置37℃培养24h ，无菌检验合格方可应 用。 无菌血液是用无菌操作方法采自健康动物，通常是绵羊或家兔的血液，加到盛有5 ％灭菌 枸橼酸钠或3 ％灭菌肝素的100 ml 三角瓶内，或加到盛有玻璃小珠的灭菌三角瓶内摇动脱 纤后置冰箱中待用。 [ 细菌培养] 取实验斜面或平板上的单胞菌株，于普通平板或鲜血平板上分区划线，以得单菌落，观察 普通平板和鲜血平板上细菌的生长表现，观察的主要内容有： （ 1 ）大小：其大小以mm 表示，微小菌落：针尖大，直径小于0 . 5mm ，如支原体菌 落、猪丹毒杆菌菌落；小菌落：直径在0 . 5 ～ 1 mm 之间，如嗜血杆菌、布氏杆菌菌落； 中等大小的菌落：直径在1 ～3 mm 之间，如巴氏杆菌、沙门氏杆菌菌落；大的菌落：直 径大于3mm ，如炭疽芽孢杆菌菌落等。 （ 2 ）形态：圆形，不规则形（根状、树叶状） （ 3 ）边缘：整齐，不整齐（锯齿状、虫蚀状、卷发状） （ 4 ）表面：光滑、粘液状、粗糙、荷包蛋状、漩涡状、颗粒状 （ 5 ）隆起度：隆起，轻度隆起，中央隆起，平升状、扁平状，脐状（凹陷状） （ 6 ）颜色：无色、灰白色、白色、金黄色、红色、粉红色 （ 7 ）透明度：透明、半透明、不透明 （ 8 ）溶血性：β －溶血（完全溶血），α －溶血（不完全溶血），不溶血 挑单菌落接种于普通琼脂平板28 ℃，24 h 培养或接种于盛肉汤的三角烧瓶中，150 rpm ， 28℃， 18 － 24 h 振荡培养。注意观察培养物的浑浊度（轻度浑浊、中度浑浊、浑 浊）、沉淀物的性状（颗粒状、絮状、粘稠状）、培养基表面是否形成菌膜、菌环以及培养 物的颜色等