织和变性蛋白,上清中加入无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,即得植物总 DNA溶液。 2.设计一个实验证明DNA的复制是半保留复制 答案要点:先将大肠杆菌放在5NH4Cl培养基中生长多代,使几乎所有的DNA都被1N标 记后,再将细菌移到只含有14NH4C1的培养基中培养。随后,在不同的时间取出样品,用 十二烷硫酸钠SDS)裂解细胞后,将裂解液放在CsCⅠ溶液中进行密度梯度离心(14000g 20小时)。离心结束后,从管底到管口,溶液密度分布从高到低形成密度梯度。DNA分子就 停留在与其相当的CSCl密度处,在紫外光下可以看到形成的区带。N·DNA分子密度较 轻(1.7g/cm3),停留在离管口这较近的位置;N-DNA密度较大停留在较低的位置上。当含 有15N-DNA的细胞在HNHC1培养液中培养一代后,只有一条区带介于14N-DNA与15N DNA之间,这时在15N-DNA区已没有吸收带,说明这时的DNA一条链来自1N-DNA,另 条链为新合成的含有1N的新链。培养两代后则在14N-DNA区又出现一条带。在14NH4Cl 中培养的时间愈久,1N-DNA区带愈强,而HN-NDNA区带逐渐减弱,但始终未出现其 他新的区带。按照半保留复制方式培养两代,只能出现NJ5NDNA两种分子,而且随着 代数的增加14N-DNA逐渐增加。织和变性蛋白，上清中加入无水乙醇使 DNA 沉淀，沉淀 DNA 溶于 TE 溶液中，即得植物总 DNA 溶液。 2. 设计一个实验证明 DNA 的复制是半保留复制。 答案要点：先将大肠杆菌放在 15NH4C1 培养基中生长多代，使几乎所有的 DNA 都被 15N 标 记后，再将细菌移到只含有 14NH4C1 的培养基中培养。随后，在不同的时间取出样品，用 十二烷硫酸钠(SDS)裂解细胞后，将裂解液放在 CsC1 溶液中进行密度梯度离心(140000g， 20 小时)。离心结束后，从管底到管口，溶液密度分布从高到低形成密度梯度。DNA 分子就 停留在与其相当的 CsC1 密度处，在紫外光下可以看到形成的区带。14N - DNA 分子密度较 轻(1.7g / cm3 )，停留在离管口这较近的位置; 15N - DNA 密度较大停留在较低的位置上。当含 有 15N-DNA 的细胞在 14NH4C1 培养液中培养一代后，只有一条区带介于 14N - DNA 与 15N - DNA 之间，这时在 15N-DNA 区已没有吸收带，说明这时的 DNA 一条链来自 15N - DNA，另 一条链为新合成的含有 14N 的新链。培养两代后则在 14N - DNA 区又出现一条带。在 14NH4C1 中培养的时间愈久，14N -DNA 区带愈强，而 14N - 15N DNA 区带逐渐减弱，但始终未出现其 他新的区带。按照半保留复制方式培养两代，只能出现 14N - 15N DNA 两种分子，而且随着 代数的增加 14N -DNA 逐渐增加