4.色氨酸操纵子中含有弱化子序列。(√) 答:色氨酸操纵子的转录调控除了阻遏系统外,还有弱化子系统。 5.蛋白质由二十种氨基酸组成,包括胱氨酸。(×) 答:不包括胱氨酸,蛋白质中的胱氨酸是蛋白质合成后通过个半胱氨酸的氧化作用形成的 四、问答题(26′) 1.原核生物与真核生物启动子的主要差别?(6″ 答:原核生物 真核生物 TTGACA—- TATAAT 起始位点 增强子-GC-AAT- TATAA-5mGpp 起始位点 10 2.利用双脱氧末端终止法( Sanger法)测定DNA一级结构的原理与方法。(10′) 答:原理是:采用核苷酸链终止剂-2’,3,-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少 形成35磷酸二脂键所需要的3-OH,一旦参入到DNA链中,此DNA链就不能进一步延长 根据碱基配对原则,每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时,就有两 种可能性,一是参入 ddNTP结果导致脱氧核苷酸链延长的终止;二是参入dNIP使DNA链 仍可继续延长,直至参入下一个 ddNTP。根据这一方法,就可得到一组以 ddNTP结尾的长 短不一的DNA片段 方法是:分成四组分别为 ddAMP、 ddMP、 ddCMP、dIMP反应后,聚丙烯酰胺凝胶 电泳按泳带可读出DNA序列 3.图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分结构(10′) 答:有:DNA解旋酶、DNA旋转酶、DNA单链结合蛋白、RNA引物、DNA连接酶、DNA 聚合酶、其它成分。图略 五、论述题(两题共24′) 1.在转录与翻译过程中,合成多肽链的正确性是如何保证的。(12′) 答案要点:①从转录过程中保证mRNA的正确性因素:如,正确的起始,加上正确的碱基, 正确的终止位点的因子,转录后加工编辑 ②翻译过程中保证加上正确氨基酸的机制,翻译后加工等方面。 2.比较原核生物与真核生物基因组结构的不同,并指出真核生物细胞的RNA内含子剪接的 主要方式(12′)。 答案要点:主要从重复序列情况,有无内含子外显子方面论述,剪接的主要方式指GU-AG 和AUAC类内含子的间接以及I、Ⅱ1类内含子的间接方式 六、实验题(10′)(任选一题,全作该题不得分) 1.CTAB法提取总DNA原理 答案要点:基本原理是先用机械的方法使组织和细胞破碎,然后加入离子型表面活性剂,溶 解细胞膜和核膜蛋白,是细胞膜和核膜破裂,进入细胞核内的表面活性剂解聚核中的核蛋白 并与蛋白质形成混合物,再加入酚和氯仿等表面活性剂使蛋白质变性;经离心除去植物的组4. 色氨酸操纵子中含有弱化子序列。（ √ ） 答：色氨酸操纵子的转录调控除了阻遏系统外，还有弱化子系统。 5. 蛋白质由二十种氨基酸组成，包括胱氨酸。 ( ╳ ) 答：不包括胱氨酸，蛋白质中的胱氨酸是蛋白质合成后通过个半胱氨酸的氧化作用形成的。 四、问答题（26′） 1. 原核生物与真核生物启动子的主要差别？（6′） 答：原核生物 真核生物 TTGACA --- TATAAT------起始位点 增强子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp— 起始位点 35 -10 -110 -70 -25 2. 利用双脱氧末端终止法（Sanger 法）测定 DNA 一级结构的原理与方法。(10′) 答：原理是：采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止 DNA 的延长。由于它缺少 形成 3 /5 /磷酸二脂键所需要的 3-OH，一旦参入到 DNA 链中，此 DNA 链就不能进一步延长。 根据碱基配对原则，每当 DNA 聚合酶需要 dNMP 参入到正常延长的 DNA 链中时，就有两 种可能性，一是参入 ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入 dNTP,使 DNA 链 仍可继续延长，直至参入下一个 ddNTP。根据这一方法，就可得到一组以 ddNTP 结尾的长 短不一的 DNA 片段。 方法是：分成四组分别为 ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP 反应后，聚丙烯酰胺凝胶 电泳按泳带可读出 DNA 序列。 3. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分结构（10′） 答：有：DNA 解旋酶、DNA 旋转酶、DNA 单链结合蛋白、RNA 引物、DNA 连接酶、DNA 聚合酶、其它成分。图略。 五、论述题（两题共 24′） 1. 在转录与翻译过程中，合成多肽链的正确性是如何保证的。（12′） 答案要点：①从转录过程中保证 mRNA 的正确性因素：如，正确的起始，加上正确的碱基， 正确的终止位点的因子，转录后加工编辑； ②翻译过程中保证加上正确氨基酸的机制，翻译后加工等方面。 2. 比较原核生物与真核生物基因组结构的不同，并指出真核生物细胞的 RNA 内含子剪接的 主要方式（12′）。 答案要点：主要从重复序列情况，有无内含子外显子方面论述，剪接的主要方式指 GU-AG 和 AU-AC 类内含子的间接以及 I、II 类内含子的间接方式。 六、实验题（10′）（任选一题，全作该题不得分） 1. CTAB 法提取总 DNA 原理 答案要点：基本原理是先用机械的方法使组织和细胞破碎，然后加入离子型表面活性剂，溶 解细胞膜和核膜蛋白，是细胞膜和核膜破裂，进入细胞核内的表面活性剂解聚核中的核蛋白 并与蛋白质形成混合物，再加入酚和氯仿等表面活性剂使蛋白质变性；经离心除去植物的组