5 浙江大学 遗传学第九章 25 h –和h+均能感染B株 Î 可用T2 两个亲本h –r+和h+r –同时感染B株。 h –r+(透明,小)×h+r – (半透明,大) ↓同时感染 B菌株 获得噬菌体子代 亲本型:h –r+, h+r – 重组型:h –r –, h+r+ E.coli B株 ③.双重感染: 将亲本型和重组型混合子代 ↓感染 混合有B和B/2菌株的培养基 ↓ h –r+(亲):噬菌斑透明、小,边缘模糊 h+r – (亲):噬菌斑半透明、大,边缘清楚 h –r – (重组):噬菌斑透明、小,边缘清楚 h+r+(重组):噬菌斑半透明、小,边缘模糊 ④.重组值计算: 重组值 = 重组噬菌斑数/总噬菌斑数×100% = [(h+r+ + h –r –)/(h+r –+ h –r+ + h+r+ + h –r –)]×100% 去掉%即可作为图距。 h+r - 浙江大学 遗传学第九章 27 ⑤.不同速溶菌的突变型在表现型上不同,可分别写成ra、rb、 rc等,用rx –h+×rx +h –获得试验结果列于下表: 杂交组合 各基因型(%) 重组值 r-h+ r+h- r+h+ r-h- rah+×ra +h- 34.0 42.0 12.0 12.0 24.0/100=24% rbh+×rb +h- 32.0 56.0 5.9 6.4 12.3/100.3=12.3% rch+×rc +h- 39.0 59.0 0.7 0.9 1.6/99.6=1.6% 分别作出ra、rb、rc与h的三个连锁图: 浙江大学 遗传学第九章 28 再做杂交:rcrb + × rc +rb ↓ 结果表明: rc– rb的重组值 > rb– h ∴ h 位于rb及rc之间,排列顺序 Î rc– h– rb。 由于T2 噬菌体的连锁图是环状的,所以2、3排列都对。 四种可能的基因排列连锁图: 1 2 3 4 9 9 V h rc ra rb 浙江大学 遗传学第九章 29 三、λ噬菌体的基因重组与作图: 凯泽(Kaiser A. D., 1955)最先进行λ噬菌体的重组 作图试验。紫外线照射处理 ¨ 获5个λ噬菌体突变系,产生 不同噬菌斑: s系:小噬菌斑; mi系:微小噬菌斑; c系:完全清亮的噬菌斑; co1系:中央环之外部分表现清亮的噬菌斑; co2系:更浓密的中央环噬菌斑。 浙江大学 遗传学第九章 30 凯泽利用λ噬菌体sco1mi与噬菌体+++进行杂交作图: 遗 传 图 谱5 浙江大学 遗传学第九章 25 h –和h+均能感染B株 Î 可用T2 两个亲本h –r+和h+r –同时感染B株。 h –r+(透明,小)×h+r – (半透明,大) ↓同时感染 B菌株 获得噬菌体子代 亲本型:h –r+, h+r – 重组型:h –r –, h+r+ E.coli B株 ③.双重感染: 将亲本型和重组型混合子代 ↓感染 混合有B和B/2菌株的培养基 ↓ h –r+(亲):噬菌斑透明、小,边缘模糊 h+r – (亲):噬菌斑半透明、大,边缘清楚 h –r – (重组):噬菌斑透明、小,边缘清楚 h+r+(重组):噬菌斑半透明、小,边缘模糊 ④.重组值计算: 重组值 = 重组噬菌斑数/总噬菌斑数×100% = [(h+r+ + h –r –)/(h+r –+ h –r+ + h+r+ + h –r –)]×100% 去掉%即可作为图距。 h+r - 浙江大学 遗传学第九章 27 ⑤.不同速溶菌的突变型在表现型上不同,可分别写成ra、rb、 rc等,用rx –h+×rx +h –获得试验结果列于下表: 杂交组合 各基因型(%) 重组值 r-h+ r+h- r+h+ r-h- rah+×ra +h- 34.0 42.0 12.0 12.0 24.0/100=24% rbh+×rb +h- 32.0 56.0 5.9 6.4 12.3/100.3=12.3% rch+×rc +h- 39.0 59.0 0.7 0.9 1.6/99.6=1.6% 分别作出ra、rb、rc与h的三个连锁图: 浙江大学 遗传学第九章 28 再做杂交:rcrb + × rc +rb ↓ 结果表明: rc– rb的重组值 > rb– h ∴ h 位于rb及rc之间,排列顺序 Î rc– h– rb。 由于T2 噬菌体的连锁图是环状的,所以2、3排列都对。 四种可能的基因排列连锁图: 1 2 3 4 9 9 V h rc ra rb 浙江大学 遗传学第九章 29 三、λ噬菌体的基因重组与作图: 凯泽(Kaiser A. D., 1955)最先进行λ噬菌体的重组 作图试验。紫外线照射处理 ¨ 获5个λ噬菌体突变系,产生 不同噬菌斑: s系:小噬菌斑; mi系:微小噬菌斑; c系:完全清亮的噬菌斑; co1系:中央环之外部分表现清亮的噬菌斑; co2系:更浓密的中央环噬菌斑。 浙江大学 遗传学第九章 30 凯泽利用λ噬菌体sco1mi与噬菌体+++进行杂交作图: 遗 传 图 谱