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2.抗体的纯化 制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低将 直接影响试验的成败。通过不同方法制备的抗体往往与多种杂蛋白混杂在 一起,为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用途,就需要进行 抗体纯化 从成分的角度分析,抗体分子是一类蛋白质分子,与其他蛋白质一样,它有 定的等电点、溶解度、荷电性及疏水性,可以用电泳、盐析沉淀或其他 层析技术进行分离、纯化 二抗体技术的应用 免疫血清的制备 免疫血清的制备是一项常用的免疫学实 验技术。 高效价、高特异性的免疫血清可作为免 疫学诊断的试剂(如用于制备兔疫标记抗体等 也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高 低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原 刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗 原免疫时,则需同时加用佐剂以增强抗原的免疫原性。 医学检测 单克隆抗体作为医学检验试剂,更能充分发挥其优势。单克隆抗体的特异 性强,大大提高了抗原一抗体反应的特异性,减少了和其它物质发生交叉 反应的可能性,使试验结果可信度更大 (1)诊断各类病原体这是单抗应用最多的领域,已有大量诊断试剂商品 供选择。如用于诊断乙肝病毒、丙肝病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、B病毒 和各种微生物、寄生虫感染的试剂等。单抗所具有的灵敏度高、特异性好的 特点,使其在鉴别菌种的型及亚型、病毒变异株,以及寄生虫不同生活周期 的抗原性等方面更具独特优势。 (2)肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原的检测 用于肿瘤的诊断、分型及定位。尽管目前尚未制备出肿瘤特异性抗原的单 抗,但对肿瘤相关抗原(如甲胎蛋白、肿瘤碱性蛋白和癌胚抗原)的单抗早就 用于临床检验。2. 抗体的纯化 制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低将 直接影响试验的成败。 通过不同方法制备的抗体往往与多种杂蛋白混杂在 一起,为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用途,就需要进行 抗体纯化。 从成分的角度分析, 抗体分子是一类蛋白质分子,与其他蛋白质一样,它有 一定的等电点、溶解度、荷电性及疏水性,可以用电泳、 盐析沉淀或其他 层析技术进行分离、 纯化。 二 抗体技术的应用 ⚫ 免疫血清的制备 免疫血清的制备是一项常用的免疫学实 验技术。 高效价、高特异性的免疫血清可作为免 疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等), 也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高 低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原 刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗 原免疫时,则需同时加用佐剂以增强抗原的免疫原性。 ⚫ 医学检测 单克隆抗体作为医学检验试剂,更能充分发挥其优势。单克隆抗体的特异 性强,大大提高了 抗原—抗体反应的特异性,减少了和其它物质发生交叉 反应的可能性,使试验结果可信度更大。 (1)诊断各类病原体 这是单抗应用最多的领域,已有大量诊断试剂商品 供选择。如用于诊断乙肝病毒、丙肝病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、EB 病毒 和各种微生物、寄生虫感染的试剂等。单抗所具有的灵敏度高、特异性好的 特点,使其在鉴别菌种的型及亚型、病毒变异株,以及寄生虫不同生活周期 的抗原性等方面更具独特优势。 (2)肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原的检测 用于肿瘤的诊断、分型及定位。尽管目前尚未制备出肿瘤特异性抗原的单 抗,但对肿瘤相关抗原(如甲胎蛋白、肿瘤碱性蛋白和癌胚抗原)的单抗早就 用于临床检验
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