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第二节:第二代测序原理 000八 乳液PCR(Emulsion PCR) a Emulsion PCR (454(Roche).SOLiD (Thermo Fisher).( GeneReader (Qlagen).lon Torrent (Thermo Fisher)) Emulsion On-bead amplification Final product Micelle droplets are loaded lemplates hybridize to bead-bound primers and are amplifed: 100-200 mitlion beads with with primer.template. after amplifcation,the complement strand disassoclates. thousands of bound template dNTPs and polymerate leaving bead-bound ssDNA templates 。 将单链DNA文库固定在带有引物的磁珠上,用扩增试剂乳化得 到油包水的乳液体系,使得每个液滴仅包含一个带模板的磁珠 (或者不包含) PC反应在每个液滴内独立进行,扩增完成后,磁珠表面可得到 相当数量(多达1,000,000) 的模板拷贝用于后续测序 使用该种扩增方式的有Rhoche454、Thermo Fisher SOLiD Thermo Fisher lon Torrent Qiagen GeneReader 4乳液PCR(Emulsion PCR) 第二节:第二代测序原理 4 • 将单链DNA文库固定在带有引物的磁珠上,用扩增试剂乳化得 到油包水的乳液体系,使得每个液滴仅包含一个带模板的磁珠 (或者不包含) • PCR反应在每个液滴内独立进行,扩增完成后,磁珠表面可得到 相当数量(多达1,000,000)的模板拷贝用于后续测序 • 使用该种扩增方式的有Rhoche 454、Thermo Fisher SOLiD Thermo Fisher Ion Torrent、Qiagen GeneReader
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