被测物的浓度很低时(S<K)时,有: Sa dt 其中D为底物通过支撑膜向酶膜层的扩散系数,S为缓冲液中的底物浓度,V为最 大反应速度,K。为米氏常数,因开始测定时,S=0计算后得到: S(1-e-t) Da B 另外,电极表面的HO浓度与酶生成HO的速度和HO2向缓冲溶液中的扩散速度有关 电极表面HO2浓度C与酶反应时间t的关系为: dc=- sa dt Dh Cdt 其中D为HO通过支撑膜向缓冲液的扩散系数,把(1)式代入(2)式得到电极表面HO2 浓度C随时间的变化关系为 ac Kmb Dd s(1-e-Bt)dt-DHCdt max 当HO2浓度的变化速率达到最大时,d2/dt2=0,从上式可得出这时HO2浓度变化速 率为 Da v DH K 实验表明,对同一酶膜,不同浓度的样品达到最大反应速度所需时间t是一致的,所以 e为一常数。在电极表面,HO2变化的最大速率与被测底物的浓度S成正比,通过测定 电极表面HO2变化的最大速率,并与标准底物作对比,即可计算出被测样品的浓度 3.测定系统的组成 酶反应自动流动注射系统由样品盘、自动取样针、恒温流动反应池、流动注射泵和 酶电极组成,其结构如图1所示被测物的浓度很低时（S<<Km）时，有： 其中 Dd 为底物通过支撑膜向酶膜层的扩散系数，S 为缓冲液中的底物浓度，Vmax为最 大反应速度，Km 为米氏常数，因开始测定时，Sd = 0 计算后得到： 另外，电极表面的 H2O2浓度与酶生成 H2O2的速度和 H2O2向缓冲溶液中的扩散速度有关， 电极表面 H2O2浓度 C 与酶反应时间 t 的关系为： 其中 DH为 H2O2通过支撑膜向缓冲液的扩散系数，把（1）式代入（2）式得到电极表面 H2O2 浓度 C 随时间的变化关系为： 当 H2O2浓度的变化速率达到最大时，d2C/dt2 = 0，从上式可得出这时 H2O2浓度变化速 率为： 实验表明，对同一酶膜，不同浓度的样品达到最大反应速度所需时间 t 是一致的，所以 e -Bt为一常数。在电极表面，H2O2变化的最大速率与被测底物的浓度 S 成正比，通过测定 电极表面 H2O2变化的最大速率，并与标准底物作对比，即可计算出被测样品的浓度。 3. 测定系统的组成 酶反应自动流动注射系统由样品盘、自动取样针、恒温流动反应池、流动注射泵和 酶电极组成，其结构如图 1 所示