SBA-70型血糖-乳酸自动分析仪研制 朱思荣周万里冯东毕春元冯德荣 (山东省科学院生物研究所山东省生物传感器重点实验室济南250014) 摘要:采用固定化酶传感器和流动注射研制了全自动血糖-乳酸分析仪。通 过转盘式样品盘和自动取样针实现了样品的自动采样,采用停流技术,增大酶传 感器的响应电流,提高测定精度。实验测试表明:仪器对标准样品的重复测定误 差小于2%,对不同浓度的样品有很好的线性响应,测定周期仅lmin左右。 关键词:生物传感器流动注射血糖乳酸自动分析仪 1.引言 生物传感器自上世纪60年代诞生以来,经过40多年的发展,技术已 日臻成熟,随着加工技术与计算机技术进展,仪器功能日益完善,操作越来越简 便。我们在80年代末生产了国内第一台商品化SBA-30型生物传感分析仪,用于 对运动员血乳酸的检测凹,至今已经多次更新换代,品种越来越多,应用范围越 来越广。基于当前的市场需求和国外同类仪器的研发状况,我们又成功地研 制了SBA-70型全自动血糖-乳酸分析仪,测试表明,仪器在1min内能自动完成 采样、分析、清洗全部操作,分析的重复性很好,误差小于2%,与其它方法对 比,相关性好,结果没有显著差异。 2.测定系统的工作原理 血糖-乳酸分析仪的传感器为酶电极,由基于生化反应的固定化酶膜和基于电化学 反应的过氧化氢电极复合而组成。本仪器的测定对象为葡萄糖和L-乳酸,固定化酶膜采 用美国 Sigma公司的葡萄糖氧化酶( Glucose oxidase)和L乳酸氧化酶(L- Lactate oxidase),经戊二醛固定化制成,测定过程中发生的酶促反应如下 葡萄糖+O2+O_葡萄糖氧化酶 葡萄糖酸+H2O2 L-乳酸+O2+H2O L-乳酸氧化酶 丙酮酸+H2O 酶是一种特殊的具有催化活性的蛋白质,它的催化活性随保存时间的延长或测定样 品次数的增加会逐步降低,但酶经固定化处理后这一过程会显著变慢,固定化酶膜的保 存期达1年,使用寿命乳酸膜为15天以上,葡萄糖膜为30天以上。连续测定20个样 品只需20min左右,在这段时间内可以近似地把酶活性看作不变。 H2O2电极与固定化酶膜紧贴在一起,酶只在局部位置上起作用,在较短时间内,可 以认为缓冲液中测定样品和HO2的浓度不变,酶膜上底物浓度S是缓冲液中的底物向膜 内渗透和酶反应分解的综合结果,根据菲克扩散第一定律和酶反应米氏动力学公式,当
SBA-70 型血糖-乳酸自动分析仪研制 朱思荣 周万里 冯东 毕春元 冯德荣 （山东省科学院生物研究所 山东省生物传感器重点实验室 济南 250014） 摘要: 采用固定化酶传感器和流动注射研制了全自动血糖-乳酸分析仪。通 过转盘式样品盘和自动取样针实现了样品的自动采样，采用停流技术，增大酶传 感器的响应电流，提高测定精度。实验测试表明：仪器对标准样品的重复测定误 差小于 2%，对不同浓度的样品有很好的线性响应，测定周期仅 1min 左右。 关键词：生物传感器 流动注射 血糖 乳酸 自动分析仪 1. 引言 生物传感器自上世纪 60 年代诞生以来[1]，经过 40 多年的发展，技术已 日臻成熟，随着加工技术与计算机技术进展，仪器功能日益完善，操作越来越简 便。我们在 80 年代末生产了国内第一台商品化 SBA-30 型生物传感分析仪，用于 对运动员血乳酸的检测[2]，至今已经多次更新换代，品种越来越多，应用范围越 来越广[3~9]。基于当前的市场需求和国外同类仪器的研发状况，我们又成功地研 制了 SBA-70 型全自动血糖-乳酸分析仪，测试表明，仪器在 1min 内能自动完成 采样、分析、清洗全部操作，分析的重复性很好，误差小于 2%，与其它方法对 比，相关性好，结果没有显著差异。 2. 测定系统的工作原理 血糖-乳酸分析仪的传感器为酶电极，由基于生化反应的固定化酶膜和基于电化学 反应的过氧化氢电极复合而组成。本仪器的测定对象为葡萄糖和 L-乳酸，固定化酶膜采 用美国 Sigma 公司的葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase）和 L-乳酸氧化酶（L-Lactate oxidase），经戊二醛固定化制成[2]，测定过程中发生的酶促反应如下： 酶是一种特殊的具有催化活性的蛋白质，它的催化活性随保存时间的延长或测定样 品次数的增加会逐步降低，但酶经固定化处理后这一过程会显著变慢，固定化酶膜的保 存期达 1 年，使用寿命乳酸膜为 15 天以上，葡萄糖膜为 30 天以上。连续测定 20 个样 品只需 20min 左右，在这段时间内可以近似地把酶活性看作不变。 H2O2 电极与固定化酶膜紧贴在一起，酶只在局部位置上起作用，在较短时间内，可 以认为缓冲液中测定样品和 H2O2的浓度不变，酶膜上底物浓度 Sd是缓冲液中的底物向膜 内渗透和酶反应分解的综合结果，根据菲克扩散第一定律和酶反应米氏动力学公式，当
被测物的浓度很低时(S<K)时,有: Sa dt 其中D为底物通过支撑膜向酶膜层的扩散系数,S为缓冲液中的底物浓度,V为最 大反应速度,K。为米氏常数,因开始测定时,S=0计算后得到: S(1-e-t) Da B 另外,电极表面的HO浓度与酶生成HO的速度和HO2向缓冲溶液中的扩散速度有关 电极表面HO2浓度C与酶反应时间t的关系为: dc=- sa dt Dh Cdt 其中D为HO通过支撑膜向缓冲液的扩散系数,把(1)式代入(2)式得到电极表面HO2 浓度C随时间的变化关系为 ac Kmb Dd s(1-e-Bt)dt-DHCdt max 当HO2浓度的变化速率达到最大时,d2/dt2=0,从上式可得出这时HO2浓度变化速 率为 Da v DH K 实验表明,对同一酶膜,不同浓度的样品达到最大反应速度所需时间t是一致的,所以 e为一常数。在电极表面,HO2变化的最大速率与被测底物的浓度S成正比,通过测定 电极表面HO2变化的最大速率,并与标准底物作对比,即可计算出被测样品的浓度 3.测定系统的组成 酶反应自动流动注射系统由样品盘、自动取样针、恒温流动反应池、流动注射泵和 酶电极组成,其结构如图1所示
被测物的浓度很低时（S<<Km）时，有： 其中 Dd 为底物通过支撑膜向酶膜层的扩散系数，S 为缓冲液中的底物浓度，Vmax为最 大反应速度，Km 为米氏常数，因开始测定时，Sd = 0 计算后得到： 另外，电极表面的 H2O2浓度与酶生成 H2O2的速度和 H2O2向缓冲溶液中的扩散速度有关， 电极表面 H2O2浓度 C 与酶反应时间 t 的关系为： 其中 DH为 H2O2通过支撑膜向缓冲液的扩散系数，把（1）式代入（2）式得到电极表面 H2O2 浓度 C 随时间的变化关系为： 当 H2O2浓度的变化速率达到最大时，d2C/dt2 = 0，从上式可得出这时 H2O2浓度变化速 率为： 实验表明，对同一酶膜，不同浓度的样品达到最大反应速度所需时间 t 是一致的，所以 e -Bt为一常数。在电极表面，H2O2变化的最大速率与被测底物的浓度 S 成正比，通过测定 电极表面 H2O2变化的最大速率，并与标准底物作对比，即可计算出被测样品的浓度。 3. 测定系统的组成 酶反应自动流动注射系统由样品盘、自动取样针、恒温流动反应池、流动注射泵和 酶电极组成，其结构如图 1 所示
5 图1:自动流动注射系统示意图 1自动送样试管盘2.緩冲液入口3液流切换阀4.自动取样针5硅橡胶连接管 6流动注射管腔7.电极8流动反应池体9蠕动泵10废液出口 待测样品或标样用缓冲液定量稀释后放入自动取样试管盘,自动取样针固定在能上下移 动的机械轨道上,进样孔开在针的侧面,针尖部分是密封的。取样针下落时先吸入隔离 气泡,然后到达样品试管的底部,吸取待测样品或标样。吸样后,取样针上升再次吸取 隔离气泡,以分开吸取的样品。取样针上升到顶部位置时,从液流切换阀内吸取缓冲液, 驱动样品移动,进入反应池。取样和流动注射由蠕动泵控制,蠕动泵上安装定位传感 每次取样时蠕动泵位置相同,确保取样量一致。在反应池上并排放置二个酶电极,一次 进样可同时测定二个不同的组分。样品到达反应池后,采用停流技术,确保反应过程中 池内待测样品含量不变,使酶电极获得最大的响应信号 流动注射装置设计成合页状(申请专利号为:03139049.8),如图2 所示。放置酶膜的有机玻璃流动反应池与铝合金支撑体系的底部,通过固定销组 合在一起,能够方便地开合。固定化酶膜放在酶膜圈槽内,合上反应池后与过氧 化氢电极紧密接触。铝合金支撑体上装有恒温加热控制器,使系统温度恒定在 30℃左右,过氧化氢电极体大部分埋入恒温支撑体内,固定化酶传感器与过氧化 氢电极紧密贴在一起,使酶反应在恒温的环境下进行
待测样品或标样用缓冲液定量稀释后放入自动取样试管盘，自动取样针固定在能上下移 动的机械轨道上，进样孔开在针的侧面，针尖部分是密封的。取样针下落时先吸入隔离 气泡，然后到达样品试管的底部，吸取待测样品或标样。吸样后，取样针上升再次吸取 隔离气泡，以分开吸取的样品。取样针上升到顶部位置时，从液流切换阀内吸取缓冲液， 驱动样品移动，进入反应池。取样和流动注射由蠕动泵控制，蠕动泵上安装定位传感器， 每次取样时蠕动泵位置相同，确保取样量一致。在反应池上并排放置二个酶电极，一次 进样可同时测定二个不同的组分。样品到达反应池后，采用停流技术，确保反应过程中 池内待测样品含量不变，使酶电极获得最大的响应信号。 流动注射装置设计成合页状（申请专利号为：03139049.8），如图 2 所示。放置酶膜的有机玻璃流动反应池与铝合金支撑体系的底部，通过固定销组 合在一起，能够方便地开合。固定化酶膜放在酶膜圈槽内，合上反应池后与过氧 化氢电极紧密接触。铝合金支撑体上装有恒温加热控制器，使系统温度恒定在 30℃左右，过氧化氢电极体大部分埋入恒温支撑体内，固定化酶传感器与过氧化 氢电极紧密贴在一起，使酶反应在恒温的环境下进行
12 图2:双电极流动注射装置 1、过氧化氢电极2、流动反应池3、铝合金恒温支撑体系4、传感器膜圈槽 5、不锈钢流动池锁定装置、脱扣按钮 6、进液不锈钢管 7、出液不锈钢管 8、微动状态开关杠杆9、流动池锁定弹簧10、流动池固定销11、锁定装置固定销 12、流动池进液接口13、流动池出夜接口14、流动反应池自动锁定结构 仪器的电路由信号放大、AD转换、数据处理、机械系统驱动与控制、打印驱动与控制 等部分组成。用3个单片机实现仪器的自动测定功能。系统的组成如图3所示
仪器的电路由信号放大、AD 转换、数据处理、机械系统驱动与控制、打印驱动与控制 等部分组成。用 3 个单片机实现仪器的自动测定功能。系统的组成如图 3 所示
打印头 键盘浓晶显示器 电极信号1 RS232 接口 前置+AD 打印与信号采 主控制 集AT89S52 P89C58 时钟与数据 储存DS1644 前置+A/D 机械位置 机械动作控 蠕动泵电机 传感器 制AT89S52 电极信号 取样针电机 仪器状态 流动池 电机驱动 传感器 恒温信号 控制 样品盘电机 图3.仪器电路控制系统框图 3个单片机通过并口方式通讯,实现指令的传送与数据的接收与发送。由主控单片机 P89C58实现中文菜单式人机对话界面,测定过程控制和测定数据的处理,并实现与PC 机的数据通讯。仪器的数据保存采用DS1644,它的内置锂电池能保存数据和运行时钟 10年以上。传感器信号的采样、仪器状态的检测和点阵式打印头打印控制共用AT89S52 单片机。机械系统的定位运行,包括进样针的运行、样品盘的转动及样品的自动判断 蠕动泵步进电机的驱动及位置判断等控制,也由独立的单片机完成。采用3个单片机系 统的设计,各单片机功能明确,简化了系统的程序设计
3 个单片机通过并口方式通讯，实现指令的传送与数据的接收与发送。由主控单片机 P89C58 实现中文菜单式人机对话界面，测定过程控制和测定数据的处理，并实现与 PC 机的数据通讯。仪器的数据保存采用 DS1644，它的内置锂电池能保存数据和运行时钟 10 年以上。传感器信号的采样、仪器状态的检测和点阵式打印头打印控制共用 AT89S52 单片机。机械系统的定位运行，包括进样针的运行、样品盘的转动及样品的自动判断， 蠕动泵步进电机的驱动及位置判断等控制，也由独立的单片机完成。采用 3 个单片机系 统的设计，各单片机功能明确，简化了系统的程序设计
示自检信宫+复 且示机→ 允许测定 品位吗入M 品测定充成 定标标志 ←位 校线性柝志}→钟下降,[定位到际位 气泡和样品 进枰针上升.吸气泡,流注送 ◆庠沉,检查电橛信号变化速a 速率下降? 匚开沉注系洗 竽待洗结束 定标否 定标处理 校线性否 校线性处埋 洁校线标志 定数据处理结果保存 图4.测定过程主程序流程图 4.分析过程的程序流程 仪器的分析过程控制由主控单片机P89C58完成,仪器上电复位时对各机械运行部件自动作自检,显示 自检信息,这时不能作任何操作。通过自检后,检测前置信号和恒温加热状态,当信号稳定、恒温加热达到平 衡时,进入等待状态。测定前在样品盘上放入标样和待测样品,按测定键,仪器自动完成定标和对样品的测定。 如在样品盘线性校正位置放入线性校正标样,仪器在完成定标后还可自动根据米氏曲线对酶反应的非线性误差 进行校正。根据本次定标与上次定标之间的误差,判断是否通过定标。如误差在允许范围内,则通过定标,清 除定标标志。主控单片机的测定程序流程如图4如示。 5.测试结果 5.1准确度及稳定性 制备含葡萄糖(Glu)和L-乳酸(Lac)各5.00mol/L和10.00mmol/L二种样品溶液,检验仪器的准确度及稳 定性。测定时在样品盘的标样位置放入1m1缓冲液和40u标准混合液,样品位放入lml缓冲液和40μl样品 混合液,由仪器进行自动测定,实验结果见表1,无论是Glu还是Lac,实验结果都有较髙的准确度和稳定性
图 4. 测定过程主程序流程图 4. 分析过程的程序流程 仪器的分析过程控制由主控单片机 P89C58 完成，仪器上电复位时对各机械运行部件自动作自检，显示 自检信息，这时不能作任何操作。通过自检后，检测前置信号和恒温加热状态，当信号稳定、恒温加热达到平 衡时，进入等待状态。测定前在样品盘上放入标样和待测样品，按测定键，仪器自动完成定标和对样品的测定。 如在样品盘线性校正位置放入线性校正标样，仪器在完成定标后还可自动根据米氏曲线对酶反应的非线性误差 进行校正。根据本次定标与上次定标之间的误差，判断是否通过定标。如误差在允许范围内，则通过定标，清 除定标标志。主控单片机的测定程序流程如图 4 如示。 5. 测试结果 5.1 准确度及稳定性 制备含葡萄糖(Glu)和 L-乳酸(Lac)各 5.00mmol/L 和 10.00mmol/L 二种样品溶液，检验仪器的准确度及稳 定性。测定时在样品盘的标样位置放入 1 ml 缓冲液和 40l 标准混合液，样品位放入 1ml 缓冲液和 40l 样品 混合液，由仪器进行自动测定，实验结果见表 1，无论是 Glu 还是 Lac，实验结果都有较高的准确度和稳定性
CV均小于2%。 表1准确度及稳定性检验 浓度样品数 Glu 155.054.855.035.035.055.004.984.984.984.98 4965.074.985.06499.954984.984984.93 5.085.035.055.035.084.984.954.954.935.00 X=5.02 X=4.97 S=0.0593 S=0.0223 CV=1.18% CV=0.45% 10.0 1510.1510.1010.1210.0210.0010.0310.0010.03 10.07 10.03 9.9610.0610.029.929.9710.039.979.859.97 10.12 9.979.9710.009.889.97 10.0810.0610.199.90 10.11 X=9.98 X=10.06 S=0.0525 S=0.0824 CV=0.53% 52线性 在不作线性校正的情况下,配制Glu和Lac含量分别为0.00,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00, 7.00,8.00,9.00,10.00mmol/L的标准样品,检验仪器的线性,测定方法同上,实验结果见表2 Glu和Lac酶传感器在上述浓度范围内具有良好的线性响应。 表2线性检验结果 标准(mMo)0.001.002.003.004.0015.006.007.008.009.0010.00 Glu实测值000992033.094105.106.017127.999.0510.00 Lac实测值|0.001.28|2.16|3.15416|5.105.966.97[7.988.8910.02 注:实测值为三次实验结果平均值
CV 均小于 2%。 表 1 准确度及稳定性检验 浓度 样品数 Glu Lac 5.00 15 5.05 4.85 5.03 5.03 5.05 4.96 5.07 4.98 5.06 4.99 5.08 5.03 5.05 5.03 5.08 X=5.02 S=0.0593 CV=1.18% 5.00 4.98 4.98 4.98 4.98 4.95 4.98 4.98 4.98 4.93 4.98 4.95 4.95 4.93 5.00 X=4.97 S=0.0223 CV=0.45% 10.0 15 10.15 10.10 10.12 10.02 10.07 9.96 10.06 10.02 9.92 10.12 10.08 10.06 10.19 9.90 10.11 X=10.06 S=0.0824 CV=0.82% 10.00 10.03 10.00 10.03 10.03 9.97 10.03 9.97 9.85 9.97 9.97 9.97 10.00 9.88 9.97 X=9.98 S=0.0525 CV=0.53% 5.2 线 性 在不作线性校正的情况下，配制 Glu 和 Lac 含量分别为 0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00， 7.00，8.00，9.00，10.00mmol/L 的标准样品，检验仪器的线性，测定方法同上，实验结果见表 2。 Glu 和 Lac 酶传感器在上述浓度范围内具有良好的线性响应。 表 2 线性检验结果 标准(mMol) 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 Glu 实测值 0.00 0.99 2.03 3.09 4.10 5.10 6.01 7.12 7.99 9.05 10.00 Lac 实测值 0.00 1.28 2.16 3.15 4.16 5.10 5.96 6.97 7.98 8.89 10.02 注：实测值为三次实验结果平均值
6.应用 2002年11月在北京市体育运动科学研究所,测定了30例运动员血样的血乳酸浓度,并与美国YSI-2300 分析仪的测定数据作比较,结果如表3所示。测定数据与对照数据的相关系数为0.990,二组数据的t检验结 果为t=0.858,小于tas=2.060,二组数据无显著差 表3运动员血样乳酸测定比较 单位:mMol 910 测定结果|2.374233.96294|3.332.911891.443.275.46 对比结果|2.544.56.14|3.18|3.66|3.21181155|3.28|5.76 编号11121314151617181920 测定结果|3.094711.741.6812.313.96414|2.16|3.21[1.95 对比结果|3.244.531.731.32|2.344.023.842.402.962.04 编号2122232425「2627282930 测定结果1.352.165.162.104.054.028.042.162.702.19 对比结果[1.492.44|5.192.34|414|3.84|8.042.442.392 2002年12月测定了山东省千佛山医院连续二天的病人化验血样,并与医院使用的 Beckman CX9生化 分析仪的测试结果作对比。26例血样的测试数据如表4所示。统计分析两组数据的相关系数,r=0.9982,t 检验结果为t=0.7404,小于toas=2.060,二组数据无显著差异。 表4病人血样血糖测试结果对比 单位:mMol 样品编405406407408409410411412413414415416417 测定结6.7911.3612.5211.937.1614.5413.4610.969.7118.6518.9315.416.06 果 Beckman7.311174|12.6412.647.8214.4513.541.4299018.2518.0015.256.68 样品编418419301302303304305306307308309310311 测定结12.939.715.529.9210.916.934445.2419.31103910.675.287.08 果 BRem28m.a16的910.6411.87795.156:6119.1210651,1515951791 7.结论 用固定化酶生物传感技术制作的自动化分析仪具有测定速度快,测定精度高,每次测定的成本低,操 作简单的特点。酶对底物识别机制保证了测定对象的专一性,不需要对测定样品作特别的前处理,在临床急症 和床边监护场合有广阔的应用前景。固定化酶分析仪已广泛应用于医疗、体育、轻工、科研等领域∽,随着酶 固定技术的发展,新的固定化酶传感器会不断开发,应用领域将进一步扩展。 参考文献
6． 应 用 2002 年 11 月在北京市体育运动科学研究所，测定了 30 例运动员血样的血乳酸浓度，并与美国 YSI-2300 分析仪的测定数据作比较，结果如表 3 所示。测定数据与对照数据的相关系数为 0.990，二组数据的 t 检验结 果为 t =0.858，小于 t0.05= 2.060，二组数据无显著差。 表 3 运动员血样乳酸测定比较 单位：mMol 编 号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 测定结果 2.37 4.23 3.96 2.94 3.33 2.91 1.89 1.44 3.27 5.46 对比结果 2.54 4.56 4.14 3.18 3.66 3.21 1.81 1.55 3.28 5.76 编 号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 测定结果 3.09 4.71 1.74 1.68 2.31 3.96 4.14 2.16 3.21 1.95 对比结果 3.24 4.53 1.73 1.32 2.34 4.02 3.84 2.40 2.96 2.04 编 号 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 测定结果 1.35 2.16 5.16 2.10 4.05 4.02 8.04 2.16 2.70 2.19 对比结果 1.49 2.44 5.19 2.34 4.14 3.84 8.04 2.44 2.39 2.27 2002 年 12 月测定了山东省千佛山医院连续二天的病人化验血样，并与医院使用的 Beckman CX9 生化 分析仪的测试结果作对比。26 例血样的测试数据如表 4 所示。统计分析两组数据的相关系数，r = 0.9982，t 检验结果为 t = 0.7404，小于 t0.05 = 2.060，二组数据无显著差异。 表 4 病人血样血糖测试结果对比 单位:mMol 样品编 号 405 406 407 408 409 410 411 412 413 414 415 416 417 测定结 果 6.79 11.36 12.52 11.93 7.16 14.54 13.46 10.96 9.71 18.65 18.93 15.41 6.06 Beckman 7.31 11.74 12.64 12.64 7.82 14.45 13.54 11.42 9.90 18.25 18.00 15.25 6.68 样品编 号 418 419 301 302 303 304 305 306 307 308 309 310 311 测定结 果 12.93 9.71 5.52 9.92 10.91 6.93 4.44 5.24 19.31 10.39 10.67 5.28 7.08 Beckman 12.83 10.31 6.59 10.64 11.33 7.79 5.15 6.36 19.12 10.65 11.15 5.95 7.91 7．结 论 用固定化酶生物传感技术制作的自动化分析仪具有测定速度快，测定精度高，每次测定的成本低，操 作简单的特点。酶对底物识别机制保证了测定对象的专一性，不需要对测定样品作特别的前处理，在临床急症 和床边监护场合有广阔的应用前景。固定化酶分析仪已广泛应用于医疗、体育、轻工、科研等领域[10]，随着酶 固定技术的发展，新的固定化酶传感器会不断开发，应用领域将进一步扩展。 参考文献：
1孙康,葛元新.电流型生物传感器的研制进展.四川教育学院学报2002,18(9):6972 2冯德荣,冯云水,周万里等.固定化乳酸酶膜圈的研制.山东科学1990,3(3):16 3冯德荣,尚雪芹等·适用于发酵生产过程的SBA-40L-谷氨酸-葡萄糖双功能分析仪的硏制.食品与发酵工 业 1993(4):3337 4冯德荣,李智红等.尿素氮葡萄糖双功能分析伩的研究.生物工程学报196,12(2):189~193 5冯德荣,朱思荣等.SBA-60型四电极生物传感分析系统的研制.山东科学1998,11(2):3236 6冯德荣,孙士青等,SBA系列生物传感器的应用.发酵科技通信1995,24(1):24~26 7冯德荣,孙士青等.测定转氨酶生物传感器的研究山东科学1995,8(1):45~49 8史建国,周凤臻等,用葡萄糖酶电极法测定葡萄糖淀粉酶活性的硏究.生物工程学报,1997,12(增刊) 226231 9国家标准GB/T16285-1966·食品中葡萄糖的测定方法一酶电极法发酵工业),1993(4):3337 10冯德荣.生物传感器的研究现状和发展方向.山东科学199,12(4):1-6 Development of a blood glucose-lactate auto-analyzetr. Zhu Sirong, Zhou wanli, Feng Dong, Bi hunyuan, Feng Derong (Biology Research Institute of Shandong Academy of Science Biosensor Key Laboratory of ShanDong Province Jinan 250014) a blood glucose-lactate auto-analyzer was developed using techniques of immobilized enzyme biosensor and flow injection analysis. Automatic sampling is realized by using rotary sample tray and auto sample needle. The flow stop technique is used to increase response current of enzy me biosensor and improve measurement precision. The results showed that the deviations of replicate measurements were less than 2% for standard samples and the linearity of response for samples with different concentrations was good. One measurement cycle is about I min. 作者简介:朱思荣,男,浙江宁波人,1986年毕业于山东大学生物系,获硕士学位,现从事生物传感器的研究与产品开 发工作
1 孙康，葛元新 . 电流型生物传感器的研制进展. 四川教育学院学报 2002，18（9）：69~72 2 冯德荣，冯云水，周万里等 . 固定化乳酸酶膜圈的研制 . 山东科学 1990，3（3）：1~6 3 冯德荣，尚雪芹等 . 适用于发酵生产过程的 SBA-40 L-谷氨酸-葡萄糖双功能分析仪的研制. 食品与发酵工 业， 1993（4）：33~37 4 冯德荣，李智红等 . 尿素氮葡萄糖双功能分析仪的研究. 生物工程学报 1996，12（2）：189~193 5 冯德荣，朱思荣等 . SBA-60 型四电极生物传感分析系统的研制. 山东科学 1998， 11（2）：32~36 6 冯德荣，孙士青等 . SBA 系列生物传感器的应用. 发酵科技通信 1995，24（1）：24~26 7 冯德荣，孙士青等 . 测定转氨酶生物传感器的研究 山东科学 1995，8（1）：45~49 8 史建国，周凤臻等 . 用葡萄糖酶电极法测定葡萄糖淀粉酶活性的研究. 生物工程学报，1997，12（增刊） ：226~231 9 国家标准 GB/T 16285—1966 . 食品中葡萄糖的测定方法－酶电极法发酵工业）， 1993（4）：33~37 10 冯德荣. 生物传感器的研究现状和发展方向. 山东科学 1999，12(4)：1-6 Development of a blood glucose-lactate auto-analyzetr. Zhu Sirong,Zhou Wanli, Feng Dong, Bi Chunyuan, Feng Derong (Biology Research Institute of Shandong Academy of Science Biosensor Key Laboratory of ShanDong Province Jinan 250014) A blood glucose-lactate auto-analyzer was developed using techniques of immobilized enzyme biosensor and flow injection analysis. Automatic sampling is realized by using rotary sample tray and auto sample needle. The flow stop technique is used to increase response current of enzyme biosensor and improve measurement precision. The results showed that the deviations of replicate measurements were less than 2% for standard samples and the linearity of response for samples with different concentrations was good. One measurement cycle is about 1 min. 作者简介：朱思荣，男，浙江宁波人，1986 年毕业于山东大学生物系，获硕士学位，现从事生物传感器的研究与产品开 发工作