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指加入某种物质使酶的合成中止或减缓进行的过程。这些物质分别称为诱导物及阻遏物。 3、酶回收率与酶纯化比(纯度提高比) 酶的回收率是指某纯化步骤后酶的总活力与该步骤前的总活力之比。酶的纯化比是之某纯化 步骤后的酶的比活力与该步骤前的比活力之比。 4、酶的变性与酶的失活 酶的变性是指酶分子结构中的氢键、二硫键及范德华力被破坏,酶的空间结构也受到破坏, 原来有序、完整的结构变成了无序,松散的结构,失去了原有的生理功能。酶的失活则是指 酶的自身活性受损(包括辅酶、金属离子受损),失去了与底物结合的能力。 5、α一淀粉酶与β一淀粉酶 二者的区别在于α一淀粉酶是一种内酶,可以跨越淀粉分子的a-1,6键到分子内部进行 随机切割,所得的产物为α型的麦芽糖和环糊精,它使碘色消失的速度较快,但还原糖较 慢;β一淀粉酶则是一种外酶,不能跨越α-1,6键,只能从淀粉的非还原末端2个2个 地进行切割,所得的产物为β型的麦芽糖和界限糊精,它使碘色消失较慢,但还原糖较快, 二者的共同点在于都能水解α-1,4键和都不能水解a-1,6键。 四、问答题 1、举出四例,说明酶在医学上有广阔的用途。 (1)医药用酶:a消化用酶:α、β一淀粉酶、胰酶、胰蛋白酶 b.消炎用酶:木瓜蛋白酶、菠萝酶 C.溶纤维酶:尿酸酶、链激酶、溶栓酶 肿瘤用酶:L一天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶 (2)诊断用酶:a.尿酸酶:用于检测血液和尿液中的尿酸含量 b.甘油激酶:由于检测血液中甘油三酯的含量 (3)检测用酶:a.脱羧酶:由于检测L一赖氨酸和L一谷氨酸 b.虫荧光素酶:用于检测ATP 2、试述采用双酶法生产固体麦芽糊精的工艺过程及主要工艺条件。 应用双酶法生产固体麦芽糊精的工艺流程及主要工艺条件如下: 淀粉调浆(淀粉与水) 配料罐 除渣剂 喷射液化器 90C液化维持罐30-40min 气液混合灭酶(加入蒸汽) 灭酶维持罐 气液分离罐 板式冷却器—糖化罐 气液混合灭酶器 中和脱色罐—板框过滤机—滤清糖液贮罐—·采用凝胶层析除杂 进一步精制,干燥的固体麦芽糊精 3、如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂?试用所学过的知识加以论述。 要检测酶的制剂是否达到纯的制剂(即不含杂质及杂质酶),可以有以下几种方法: (1)层析法:包括纸层析、凝胶层析、柱层析及亲和层析 (2)电泳法:包括SDS凝胶电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (3)超离心法:不同的酶分子大小不同,在重力场中具有不同的沉降系数,从而可以通 过超离心方法分离目的酶与杂质酶 (4)免疫反应法:由于酶分子可作为一种抗原物质,而抗原与抗体之间具有专一的亲和 力,故可选用目的酶的抗体与酶制剂进行免疫扩散或免疫电泳,从而判断酶的制剂 是否纯净。 (5)氨基酸序列分析法:采用特定的化学物质从酶的N末端将氨基酸残基逐个水解下来 最终可获知该酶的氨基酸序列,从而也可以判断出酶制剂是否纯净。 4、今欲生产糖化酶结晶产品,试拟出合理的工艺步骤,并说明下游工程的主要工艺条件。指加入某种物质使酶的合成中止或减缓进行的过程。这些物质分别称为诱导物及阻遏物。 3、 酶回收率与酶纯化比(纯度提高比) 酶的回收率是指某纯化步骤后酶的总活力与该步骤前的总活力之比。酶的纯化比是之某纯化 步骤后的酶的比活力与该步骤前的比活力之比。 4、 酶的变性与酶的失活 酶的变性是指酶分子结构中的氢键、二硫键及范德华力被破坏,酶的空间结构也受到破坏, 原来有序、完整的结构变成了无序,松散的结构,失去了原有的生理功能。酶的失活则是指 酶的自身活性受损(包括辅酶、金属离子受损),失去了与底物结合的能力。 5、 α-淀粉酶与 β-淀粉酶 二者的区别在于 α-淀粉酶是一种内酶,可以跨越淀粉分子的 α-1,6 键到分子内部进行 随机切割,所得的产物为 α 型的麦芽糖和环糊精,它使碘色消失的速度较快,但还原糖较 慢;β-淀粉酶则是一种外酶,不能跨越 α-1,6 键,只能从淀粉的非还原末端 2 个 2 个 地进行切割,所得的产物为 β 型的麦芽糖和界限糊精,它使碘色消失较慢,但还原糖较快, 二者的共同点在于都能水解 α-1,4 键和都不能水解 α-1,6 键。 四、问答题 1、 举出四例,说明酶在医学上有广阔的用途。 (1) 医药用酶:a.消化用酶:α、β-淀粉酶、胰酶、胰蛋白酶 b.消炎用酶:木瓜蛋白酶、菠萝酶 c.溶纤维酶:尿酸酶、链激酶、溶栓酶 d.肿瘤用酶:L-天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶 (2) 诊断用酶:a.尿酸酶:用于检测血液和尿液中的尿酸含量 b.甘油激酶:由于检测血液中甘油三酯的含量 (3) 检测用酶:a.脱羧酶:由于检测 L-赖氨酸和 L-谷氨酸 b.虫荧光素酶:用于检测 ATP 2、 试述采用双酶法生产固体麦芽糊精的工艺过程及主要工艺条件。 应用双酶法生产固体麦芽糊精的工艺流程及主要工艺条件如下: 淀粉调浆(淀粉与水) 配料罐 除渣剂 喷射液化器 90oC 液化维持罐 30-40min 气液混合灭酶(加入蒸汽) 灭酶维持罐 气液分离罐 板式冷却器 糖化罐 气液混合灭酶器 中和脱色罐 板框过滤机 滤清糖液贮罐 采用凝胶层析除杂 进一步精制,干燥的固体麦芽糊精 3、 如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂?试用所学过的知识加以论述。 要检测酶的制剂是否达到纯的制剂(即不含杂质及杂质酶),可以有以下几种方法: (1) 层析法:包括纸层析、凝胶层析、柱层析及亲和层析 (2) 电泳法:包括 SDS 凝胶电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (3) 超离心法:不同的酶分子大小不同,在重力场中具有不同的沉降系数,从而可以通 过超离心方法分离目的酶与杂质酶。 (4) 免疫反应法:由于酶分子可作为一种抗原物质,而抗原与抗体之间具有专一的亲和 力,故可选用目的酶的抗体与酶制剂进行免疫扩散或免疫电泳,从而判断酶的制剂 是否纯净。 (5) 氨基酸序列分析法:采用特定的化学物质从酶的 N 末端将氨基酸残基逐个水解下来, 最终可获知该酶的氨基酸序列,从而也可以判断出酶制剂是否纯净。 4、 今欲生产糖化酶结晶产品,试拟出合理的工艺步骤,并说明下游工程的主要工艺条件
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