第27卷第3期 王桂芹等:鱼类免疫增强剂的研究现状 性免疫机理在于其为阳性趋化剂,可吸附从血管虹鳟( Oncorhynchus kiss)血清抗体水平、鲇鱼 中游出的单核细胞,聚集在组织中形成巨噬细胞,单核细胞中白介素的水平、斑点叉尾鲴血清的 亦可直接刺激局部组织,促进细胞增生,演变为巨干扰素水平等。可见LPS效果显著,但使用剂 噬细胞并被活化,使其吞噬能力增强,直接杀伤胞量过高会产生免疫抑制 内生物和变异细胞提高其免疫力。 1.2.2肽聚糖( Peptidoglycan,PG肽聚糖存在 甲壳素或壳聚糖通常通过注射或浸泡途径使于革兰氏阴、阳性菌的细胞壁中,尤其是革兰氏阳 用。注射甲壳素能够增强黄条飾( seriolaφur性菌细胞壁中肽聚糖含量占细胞壁干重的40%~ radiata)巨噬细胞的吞噬活力,提高其对Pas90%,是由N乙酰葡萄糖与N乙酰胞壁酸形成的 teurella piscicida的抵抗力。对溪红点鲑( salvelinus二糖通过肽链相互交叉构成的聚合物,其中胞壁 fontinalis)注射或浸浴壳聚糖1~3d,可提髙对肽(MDP)是细菌肽聚糖的保守亚基,能替代佛氏 A. salmonicida的抵抗力,但到14d后,对该病原完全佐剂(FCA)中的具有免疫增强活性的最小单 的抵抗力无明显増强。对鲮鱼( labeo rahita)的硏位。虹鳟口服肽聚糖可増强其抵抗鳗弧菌的能 究表明,腹腔注射壳聚糖7d后,巨噬细胞吞噬活力,腹腔注射能提高对A. salmonicida感染的抵抗 力和抗体的凝集效价显著增强。金头鲷(Spr力"l。ham等研究发现,用含肽聚糖的饲料 rus quran l.)口服甲壳素可以显著提高吞噬活投喂黄尾鲕可提高头肾的吞噬活力和吞噬指数, 性细胞毒活性和血清补体活性等。异育银鲫提高对 Enterococcus senolicida感染的抵抗力。注 饲料中添加壳聚糖可提高血清和脾脏的溶菌酶活射肽聚糖能够提髙鲤鱼干扰素-Ⅰ的水平,増加 性以及血清超氧化物歧化酶活性。免疫增强剂巨噬细胞的超氧阴离子含量"。可见,肽聚糖能 给予方式不同,结果也不一致,。如口服甲壳够提高鱼类的非特异性免疫力和抗病力。 素可显著増强鱼体补体活力、吞噬活力,而呼吸爆1.2.3葡聚糖(β glucan)β葡聚糖通常存在于 发活力却没有受到显著影响腹腔注射甲壳素能特殊种类的细菌、酵母菌、真菌的细胞壁中。β葡 够显著增强其吞噬活力和呼吸爆发活力,对补体聚糖以1,3-键为主体,且含有1,6键的支链β葡 活力并没有显著影响,这可能是作用于细胞的免聚糖因其独特的螺旋形分子结构,易被免疫系统 疫增强剂的有效剂量不同所致。 接受。β葡聚糖对鱼类免疫功能提高的作用主要 1.2微生物多糖 是增强其非特异性免疫功能β1,3和β1,6葡聚 微生物多糖是一类带有多种复杂基因的生物糖能选择性地作用于巨噬细胞、颗粒细胞和自然 聚合物,它能作为免疫增强剂激活鱼类的非特异杀伤细胞的特异性受体并激活这些细胞,通过细 性免疫系统。对鱼类免疫研究较多的有脂多糖胞的吞噬作用,吸收、破坏、清除体内的病原微生 LPS)、肽聚糖(PG、葡聚糖等 物同时还能产生细胞因子,如白细胞介素I 1.2.1脂多糖( Lipopolysaccharide,LpS)脂多(L-I),提高鱼类的免疫功能。研究表明,葡聚 糖存在于所有革兰氏阴性菌外膜中,又称内毒素,糖能增强大西洋鲑的补体活力和巨噬细胞的杀菌 是最具潜力的免疫増强剂。脂多糖可促进T辅助活力,提高大西洋鲑、大菱鲆的溶菌酶活 淋巴细胞抗原特异性分化,是B淋巴细胞有丝分力以及大菱鲆和金头鲷细胞的呼吸爆发活 裂原及巨噬细胞的激活剂。巨噬细胞受脂多糖刺力2。给虹鳟饲料中添加酵母P葡聚糖和维生 激后释放出淋巴细胞活化因子,增强其免疫力。素C,可显著提高补体活力和吞噬细胞的吞噬能 研究表明,口服或注射脂多糖能够提高斑点叉尾力,并促进特异抗体的产生。通过口服或注射 鲴( Ictalurus punctatus)的白细胞的吞噬活力,增葡聚糖也能增强斑点叉尾鲴和鲤鱼对爱德华氏 强鲽鱼( Pleuronectes platessa L.)巨噬细胞移动能菌-3、南亚野鲮鱼对A. hydrophila-、大西洋鲑 力,促进大西洋鲑( salmo salar l.)单核细胞中对 Aeromonas salmonicida、V. anguillarum、. saInt 白细胞介素I的产生,提高鲤鱼对 aeromonas onicida和.mken感染的抵抗力。可见,酵 bestiary的抵抗力。体外实验也表明适量的脂母葡聚糖具有很强的免疫原性,能够诱导鱼类的 多糖也可提高鱼类的免疫力。如提高大西洋鮭免疫系统发挥免疫力和抗病力。但也有葡聚糖对 ( Samo salaar l.)和真鲷巨噬细胞吞噬活力、大菱鲆的免疫力和抗病力没有影响的报道 201994-2007chinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net性免疫机理在于其为阳性趋化剂 ,可吸附从血管 中游出的单核细胞 ,聚集在组织中形成巨噬细胞 , 亦可直接刺激局部组织 ,促进细胞增生 ,演变为巨 噬细胞并被活化 ,使其吞噬能力增强 ,直接杀伤胞 内生物和变异细胞 ,提高其免疫力[2 ] 。 甲壳素或壳聚糖通常通过注射或浸泡途径使 用。注射甲壳素能够增强黄条鱼师 ( Seriola quin2 queradiata) [3 ]巨噬细胞的吞噬活力 ,提高其对 Pas2 teurella piscicida 的抵抗力。对溪红点鲑( Salvelinus fontinalis) [2 ] 注射或浸浴壳聚糖 1～3 d ,可提高对 A1salmonicida 的抵抗力 ,但到 14 d 后 ,对该病原 的抵抗力无明显增强。对鲮鱼( Labeo rahita) 的研 究表明 ,腹腔注射壳聚糖 7 d 后 ,巨噬细胞吞噬活 力和抗体的凝集效价显著增强[4 ] 。金头鲷 ( Spa2 rus auratu L1) 口服甲壳素可以显著提高吞噬活 性、细胞毒活性和血清补体活性等[5 ] 。异育银鲫 饲料中添加壳聚糖可提高血清和脾脏的溶菌酶活 性以及血清超氧化物歧化酶活性[6 ] 。免疫增强剂 给予方式不同 ,结果也不一致[5 ,728 ] 。如口服甲壳 素可显著增强鱼体补体活力、吞噬活力 ,而呼吸爆 发活力却没有受到显著影响 ,腹腔注射甲壳素能 够显著增强其吞噬活力和呼吸爆发活力 ,对补体 活力并没有显著影响 ,这可能是作用于细胞的免 疫增强剂的有效剂量不同所致。 1. 2 微生物多糖 微生物多糖是一类带有多种复杂基因的生物 聚合物 ,它能作为免疫增强剂激活鱼类的非特异 性免疫系统。对鱼类免疫研究较多的有脂多糖 (LPS) 、肽聚糖(PG) 、葡聚糖等。 11211 脂多糖 (Lipopolysaccharide ,LPS) 脂多 糖存在于所有革兰氏阴性菌外膜中 ,又称内毒素 , 是最具潜力的免疫增强剂。脂多糖可促进 T辅助 淋巴细胞抗原特异性分化 ,是 B 淋巴细胞有丝分 裂原及巨噬细胞的激活剂。巨噬细胞受脂多糖刺 激后释放出淋巴细胞活化因子 ,增强其免疫力。 研究表明 ,口服或注射脂多糖能够提高斑点叉尾 鱼回 ( Ictalurus punctatus) 的白细胞的吞噬活力[9 ] , 增 强鲽鱼 ( Pleuronectes platessa L. ) 巨噬细胞移动能 力 [10 ] ,促进大西洋鲑 ( Salmo salar L1) 单核细胞中 白细胞介素 Ⅰ的产生[11 ] ,提高鲤鱼对 Aeromoinas bestiarum 的抵抗力[12 ] 。体外实验也表明适量的脂 多糖也可提高鱼类的免疫力。如提高大西洋鲑 ( Samo salaar L. ) 和真鲷巨噬细胞吞噬活力[13214 ] 、 虹鳟( Oncorhynchus mykiss) 血清抗体水平[15 ] 、鲇鱼 单核细胞中白介素的水平[9 ] 、斑点叉尾鱼回血清的 干扰素水平等[9 ] 。可见 ,LPS 效果显著 ,但使用剂 量过高会产生免疫抑制。 11212 肽聚糖 (Peptidoglucan ,PG) 肽聚糖存在 于革兰氏阴、阳性菌的细胞壁中 ,尤其是革兰氏阳 性菌细胞壁中肽聚糖含量占细胞壁干重的40 %～ 90 % ,是由 N2乙酰葡萄糖与 N2乙酰胞壁酸形成的 二糖通过肽链相互交叉构成的聚合物 ,其中胞壁 肽(MDP) 是细菌肽聚糖的保守亚基 ,能替代佛氏 完全佐剂(FCA) 中的具有免疫增强活性的最小单 位。虹鳟口服肽聚糖可增强其抵抗鳗弧菌的能 力 ,腹腔注射能提高对 A1salmonicida 感染的抵抗 力 [16 ] 。Itami 等 [17 ] 研究发现 ,用含肽聚糖的饲料 投喂黄尾鱼师可提高头肾的吞噬活力和吞噬指数 , 提高对 Enterococcus seriolicida 感染的抵抗力。注 射肽聚糖能够提高鲤鱼干扰素 - Ⅰ的水平 ,增加 巨噬细胞的超氧阴离子含量[18 ] 。可见 ,肽聚糖能 够提高鱼类的非特异性免疫力和抗病力。 11213 葡聚糖 (β2glucan) β2葡聚糖通常存在于 特殊种类的细菌、酵母菌、真菌的细胞壁中。β2葡 聚糖以 1 ,32键为主体 ,且含有 1 ,62键的支链 β, 2葡 聚糖因其独特的螺旋形分子结构 ,易被免疫系统 接受。β2葡聚糖对鱼类免疫功能提高的作用主要 是增强其非特异性免疫功能 β, 21 ,3 和β21 ,62葡聚 糖能选择性地作用于巨噬细胞、颗粒细胞和自然 杀伤细胞的特异性受体并激活这些细胞 ,通过细 胞的吞噬作用 ,吸收、破坏、清除体内的病原微生 物 ,同时还能产生细胞因子 ,如白细胞介素 Ⅰ (IL - Ⅰ) ,提高鱼类的免疫功能。研究表明 ,葡聚 糖能增强大西洋鲑的补体活力和巨噬细胞的杀菌 活力[19 ] , 提 高 大 西 洋 鲑、大 菱 鲆 的 溶 菌 酶 活 力 [19220 ]以及大菱鲆和金头鲷细胞的呼吸爆发活 力 [21222 ] 。给虹鳟饲料中添加酵母β2葡聚糖和维生 素 C ,可显著提高补体活力和吞噬细胞的吞噬能 力 ,并促进特异抗体的产生[23 ] 。通过口服或注射 葡聚糖也能增强斑点叉尾鱼回和鲤鱼对爱德华氏 菌 [24225 ] 、南亚野鲮鱼对 A1 hydrophila[26 ] 、大西洋鲑 对 Aeromonas salmonicida、V1 anguillarum 、V1salm2 onicida 和 Y1 ruckeri 感染的抵抗力[27228 ] 。可见 ,酵 母葡聚糖具有很强的免疫原性 ,能够诱导鱼类的 免疫系统发挥免疫力和抗病力。但也有葡聚糖对 大菱鲆的免疫力和抗病力没有影响的报道[29 ] 。 第 27 卷 第 3 期 王桂芹等 :鱼类免疫增强剂的研究现状 543