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一、实验室种子的制备 实验室种子的制备一般采用两种方式: 对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁殖快的菌种可以采用固体培养基培养 孢子,孢子可直接作为种子罐的种子,这样操作简便,不易污染杂菌。对于产孢子 能力不强或孢子发芽慢的菌种,可以用液体培养法。 (一)孢子的制备 1,细菌孢子的制备 细菌的斜面培养基多采用碳源限量而氮源丰富的配方。培养温度一般为 37℃。 细菌菌体培养时间一般为 1~2 天,产芽孢的细菌培养则需要 5~10 天。 2,霉菌孢子的制备 霉菌孢子的培养一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。 培养的温度一般为 25~28℃。培养时间一般为 4~14 天。 3,放线菌孢子的制备 放线菌的孢子培养一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的 营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。培养温度一般为 28℃。培 养时间为 5~14 天。 (二)液体种子制备 1,好氧培养 对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种,如产链霉素的灰色链霉菌(S. griseus)、产卡那霉素的卡那链霉菌(S. Kanamuceticus)可以用摇瓶液体培养法。 将孢子接入含液体培养基的摇瓶中,于摇瓶机上恒温振荡培养,获得菌丝体,作为 种子。其过程如下: 试管→三角瓶→摇床→种子罐 2,厌氧培养 对于酵母菌(啤酒,葡萄酒,清酒等),其种子的制备过程如下: 试管→三角瓶→卡式罐→种子罐 例如生产啤酒的酵母菌一般保存在麦芽汁琼脂或 MYPG 培养基(培养基配制: 3 克麦芽浸出物,3 克酵母浸出物,5 克蛋白胨,10 克葡萄糖和 20 克琼脂与升水中) 的斜面上,于 4℃冰箱内保藏。每年移种 3-4 次。将保存的酵母菌种接入含 10ml 麦 芽汁的 500-1000ml 三角瓶中,再于 25℃培养 2-3 天后,再扩大至含有 250-500ml 麦芽汁的 500-1000ml 三角瓶中,再于 25℃培养 2 天后,移种至含有 5-10L 麦芽汁 的卡氏培养罐中,于 15-20℃培养 3-5 天即可作 100L 麦芽汁的发酵罐种子。从三角
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