透析袋 40cm TE buffer 20ml 酚:氯仿 24:1 40ml 乙醇 100% 100ml 乙醇 70% 20ml 正丁醇 40ml NaAc 3M 20ml Loading buffer 20ul Marker 20ul Eppendorf 管 #5ml 100 个 5 个/组 加样枪 #100ul 20 把 1 把/组 加样枪 #20ul 20 把 1 把/组 Tip 头 #100ul 200 个 10 个/组 Tip 头 #20ul 400 个 20 个/组 PE 手套 20 个 擦镜纸 若干 记号笔 兰色或黑色 10 支 1 支/2 组 实验 14 DNA 的连接与转化 (60 人 30 组) 纯化后的酶切质粒载 体和目的基因 质粒DNA(含 Amp 抗生基因) 0.1 u g 质粒载体/组 用实验五的质粒载体 目的基因 10×T4DNA连 接酶 buffer 200mMTris-HCl(pH7.6) 50mM MgCl2 50mM 二硫苄糖醇 500μl/ml BSA T4DNA连接酶 5mM ATP 无菌水 每组一管 5ml 管 每组 2 只 5ml 空管 LB培养基 每组一管 1.5ml 管 1000 ml 20 ml/组 受体菌 CaCl2 0.1M 每组一管 5ml 管 Amp 仪器及易耗品 规格 数量 备注: 加样枪 #20ul 20 把 1 把/组 Tip 头 #20ul 400 个 20 个/组 Eppendorf 管 #5ml 60 个 3 个/组 封口膜 40 个 TBE 电泳液 1000ml 供 20 个样品跑 琼脂糖 10g 可制大胶 4 块 EB 1mg/ml 20ml 足量 Loading buffer 20ul透析袋 40cm TE buffer 20ml 酚:氯仿 24:1 40ml 乙醇 100% 100ml 乙醇 70% 20ml 正丁醇 40ml NaAc 3M 20ml Loading buffer 20ul Marker 20ul Eppendorf 管 #5ml 100 个 5 个/组 加样枪 #100ul 20 把 1 把/组 加样枪 #20ul 20 把 1 把/组 Tip 头 #100ul 200 个 10 个/组 Tip 头 #20ul 400 个 20 个/组 PE 手套 20 个 擦镜纸 若干 记号笔 兰色或黑色 10 支 1 支/2 组 实验 14 DNA 的连接与转化 (60 人 30 组) 纯化后的酶切质粒载 体和目的基因 质粒DNA(含 Amp 抗生基因) 0.1 u g 质粒载体/组 用实验五的质粒载体 目的基因 10×T4DNA连 接酶 buffer 200mMTris-HCl(pH7.6) 50mM MgCl2 50mM 二硫苄糖醇 500μl/ml BSA T4DNA连接酶 5mM ATP 无菌水 每组一管 5ml 管 每组 2 只 5ml 空管 LB培养基 每组一管 1.5ml 管 1000 ml 20 ml/组 受体菌 CaCl2 0.1M 每组一管 5ml 管 Amp 仪器及易耗品 规格 数量 备注: 加样枪 #20ul 20 把 1 把/组 Tip 头 #20ul 400 个 20 个/组 Eppendorf 管 #5ml 60 个 3 个/组 封口膜 40 个 TBE 电泳液 1000ml 供 20 个样品跑 琼脂糖 10g 可制大胶 4 块 EB 1mg/ml 20ml 足量 Loading buffer 20ul