实验原理 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,、是在聚丙烯酰胺凝胶系统中 引进SDS 烷基磺酸钠 SDS能断裂分子内和分 关健,破坏蛋自质的二级和三级结构强还原剂能使 简的二硫键断裂,蛋白质 定浓度的含有强 还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负 电荷的SDS蛋自质复合物,这种 物于结合大量的 SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分 子大小为悸征的负离子团块,从而降低或消除了备种蛋百 质分子之间天然的电荷差异,由于SDS与蛋白质的结合是 按重量成比例的,因此在进行电泳时,蛋自质分子的迁移 蛋自质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式: Og K-bx,式中:MW为分子量,X为迁移率,k、b 均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子 量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋百质在相同条 件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求 得分子量。二. 实验原理 • SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中 引进SDS（十二烷基磺酸钠）， SDS能断裂分子内和分 子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使 半胱氨酸之间的二硫键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强 还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负 电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的 SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分 子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白 质分子之间天然的电荷差异，由于SDS与蛋白质的结合是 按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移 速度取决于分子大小。当分子量在15KD到200KD之间时， 蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式： logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b 均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子 量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条 件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求 得分子量