(3)操作方法 ①如尿内含有胆红素，应先取尿液和0.5molL氯化钡各1份混匀，2000rmin离心5min,除去胆红 素，取上清液试验： ②直接取尿或除去胆红素上清1.0ml,加Ehrlichi试剂0.lml混匀： ③静置10min,在白色背景下从管口向底观察结果。 (4)结果判 阴性：不显樱红色；弱阳性：呈淡樱红色：阳性：呈樱红色：强阳性：呈深樱红色。 ①尿液必须新鲜 避光保 受 可出现假阳性 中液体高 10n mX 75 mm试管 ②派胆素原定量 原试纸检测，详见有关产品说明书，但敏感性较差。 (1)原理尿液中的尿胆素原与醛试剂作用，生成尿胆素原醛红色化合物。生成的红色与人工标 得出尿胆素原含 ①醛试剂称取对二甲氨基苯甲醛0.7g,溶于浓盐酸(AR)150ml,再加入蒸馏水100ml混匀，贮 ③抗坏血酸粉AR) ④酚磺酞（酚红）标准液准确称取酚磺酞20.0mg,溶于10mmol/LN,OH液中，至100ml,作为贮 存液。临用时，用10 nmol/LNaOH液稀释1O0倍，其红色程度相当于结合尿胆素原5.86μmol/L。 (3)操作方法 ①取尿作胆红素定性试验，如阳性，应以尿液10ml与0.5mol/L氯化钙2.5ml充分混合后过滤，收集 尿液备用。报告结果时应将测定结果乘以1,25，以校正稀释倍数。 ②溶100mg抗坏血酸于尿液10ml内，混匀后取两支试管，分别标明测定管和空白管，每管中各加 入上述尿液1.5ml:向空白管加饱和乙酸钠液3.0ml,混匀再加醛试剂1.5ml:测定管加醛试剂1.5ml, 混匀再加饱和乙酸钠液3.0ml: ③10min内，用562nm波长比色，蒸馏水调零，分别读取空白管、测定管及标准管和吸光度 (562nm波长，光径1cm比色皿，此标准液吸光度为0.384)。 (4)计算 ×23.4:度-空白管吸》 则定管吸光度一空白管吸光度 (5) 标准管吸光度 1.5 标准管吸光度 新鲜 收集后立即测定 避免光的 物质盘能与醛试剂显色，但通常反应时间较长，故在加入醛试剂混匀后，应立即加 ③尿中如有胆红素则呈绿色反应， ④磺胺类、普鲁卡因、5一羟吲哚酸等与醛试剂作用呈假阳性。 (五)尿液萄萄糖的检验 健康动物的尿中可有微量葡萄糖，定性试验为阴性。糖定性试验呈阳性的尿液称为糖尿，表示单 位时间内流经肾小球中葡萄糖过多（高血糖）或肾小管上皮细胞回收葡萄糖能力下降。 1葡萄糖氧化酶试纸定性（半定量）试验 (1)原理葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下，失去两个氢离子后形成葡萄糖内酯，再经水化后， 萄糖氧化过氯化物邻联甲苯胺试剂。 下与桥灰蓝色为强阳性（十十十），紫蓝色为极强阳性生阳性〈十，灰色为阳性（土元（3）操作方法 ①如尿内含有胆红素，应先取尿液和0.5mol/L氯化钡各1份混匀，2000r/min离心5min，除去胆红 素，取上清液试验； ②直接取尿或除去胆红素上清1.0ml，加Ehrlich试剂0.1ml混匀； ③静置10min，在白色背景下从管口向底观察结果。 （4）结果判断 阴性：不显樱红色；弱阳性：呈淡樱红色；阳性：呈樱红色；强阳性：呈深樱红色。 （5）注意事项 ①尿液必须新鲜，避光保存； ②尿中有酮体、磺胺类药等可出现假阳性； ③反应结果受试管中液体高度影响，应统一用10mm×75mm试管。 ④也可用尿胆素原试纸检测，详见有关产品说明书，但敏感性较差。 2.尿胆素原定量法 （1）原理 尿液中的尿胆素原与醛试剂作用，生成尿胆素原醛红色化合物。生成的红色与人工标 准酚磺酞的颜色比较，得出尿胆素原含量。 （2）器材与试剂 ①醛试剂 称取对二甲氨基苯甲醛0.7g，溶于浓盐酸（AR）150ml，再加入蒸馏水100ml混匀，贮 存棕色瓶内，可保存3～6个月。 ②饱和乙酸钠溶液。 ③抗坏血酸粉（AR）。 ④酚磺酞（酚红）标准液 准确称取酚磺酞20.0mg，溶于10mmol/LNaOH液中，至100ml，作为贮 存液。临用时，用10mmol/LNaOH液稀释100倍，其红色程度相当于结合尿胆素原5.86μmol/L。 （3）操作方法 ①取尿作胆红素定性试验，如阳性，应以尿液10ml与0.5mol/L氯化钙2.5ml充分混合后过滤，收集 尿液备用。报告结果时应将测定结果乘以1.25，以校正稀释倍数。 ②溶100mg抗坏血酸于尿液10ml内，混匀后取两支试管，分别标明测定管和空白管，每管中各加 入上述尿液1.5ml；向空白管加饱和乙酸钠液3.0ml，混匀再加醛试剂1.5ml；测定管加醛试剂1.5ml， 混匀再加饱和乙酸钠液3.0ml。 ③10min内，用562nm波长比色，蒸馏水调零，分别读取空白管、测定管及标准管和吸光度 （562nm波长，光径1cm比色皿，此标准液吸光度为0.384）。 （4）计算 ＝ 测定管吸光度－空白管吸光度 6.0 测定管吸光度－空白管吸光度 标准管吸光度 1.5 标准管吸光度 （5）注意事项 ①标本必须新鲜，收集后立即测定，避免光的照射。 ②尿中其他物质也可能与醛试剂显色，但通常反应时间较长，故在加入醛试剂混匀后，应立即加 入饱和乙酸钠终止颜色反应。 ③尿中如有胆红素则呈绿色反应，必须预先除去。 ④磺胺类、普鲁卡因、5－羟吲哚酸等与醛试剂作用呈假阳性。 （五）尿液葡萄糖的检验 健康动物的尿中可有微量葡萄糖，定性试验为阴性。糖定性试验呈阳性的尿液称为糖尿，表示单 位时间内流经肾小球中葡萄糖过多（高血糖）或肾小管上皮细胞回收葡萄糖能力下降。 1.葡萄糖氧化酶试纸定性（半定量）试验 （1）原理 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下，失去两个氢离子后形成葡萄糖内酯，再经水化后， 氢离子与空气中氧结合，分解成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶存在下，还原生成水，使 供氢体色素原（无色邻甲苯胺或甲基联苯胺）氧化而呈色，根据颜色深浅，判断葡萄糖含量。 （2）器材和试剂 ①尿糖试纸 含葡萄糖氧化酶过氧化物酶、邻联甲苯胺试剂。 ②标准色板 为黄色至蓝色不同浓度的色板。 ③操作方法 可按说明书进行，一般是将尿糖试纸浸入尿水中，2～4S后取出，1min整在自然光 下与标准色板比较判断结果。不变色为阴性（－），淡灰色为弱阳性（＋），灰色为阳性（＋ ＋），灰蓝色为强阳性（＋＋＋），紫蓝色为极强阳性（＋＋＋＋）。 ×5.86 23.4×