实验十实验室尿常规检验 目的和要求 掌握尿液化学检验方法及尿沉渣的检查方法，要求学生按本指导所列方法顺利操作，并能认识某 些沉渣及管型。 内容和方法 然后再用精密试纸条浸湿被检的新鲜尿液，立即与标准色板 比较 断尿液的P叫 作出 PH 电极可精确测出尿液PH值。 1.于化学试纸 ,取有效试纸条，浸入被测尿液中一定时间，取 出后在容器边缘除去多余尿 0S内对照标准 色板比色 根据说明判断结果 .硝酸法取中试管1 滴加35%硝酸1一2 (o 试管壁缓缓滴加尿液 两 重叠 格罗 表示蛋白质含量 3加热醋酸法取约10ml新鲜澄清尿液于 一耐执大式管内，将式管剑置在火格上，者沸上部展 液。 K至100 4 在黑色背景下对光观察结 如 可用1一4 4.磺基水杨酸法取试管1支，加入澄清尿液2~3ml,滴加磺基水杨酸试剂（由磺基水杨酸20g,加 ,立即轻轻混匀，于1min内观察结果，根据浑浊程度判断为1~4 应注意马的尿中含有大量碳酸钙，因此应事先加入适量10%酷酸液使尿成酸性，尿液即透明，便 于观察结果 (三)潜血的检验 健康动物的尿液不含有红细胞或血红蛋白。尿液中不能用肉眼直接观察出来的红细胞或血红蛋白 叫做潜血（或叫隐血），可用化学方法加以检查。 1.原理尿液中的血红蛋白或红细胞被酸破坏所产生的血红蛋白，有过氧化氢酶的作用（但并非为 的因为被煮沸后仍有触媒作用)，它可以分解过氧化氢而产生新生态的氧，使联苯胺氧化呈蓝色一 器材与试剂小试管，滴管，普通滤纸，酒精灯，试管夹等。联苯胶，冰醋酸，过氧化氢溶 95%乙醇. 苯胺法取联苯胶少许（约 刀尖) 溶解在2ml冰醋酸中，加双氧水 且比 混合。混 蓝色 蛋白存在 法 选用卡还改良联 (2)改良联苯胺法取尿液10m置于试管中，加热煮沸以破坏可能存在的过氧化氢酶。待冷却 后，加入冰酷酸10 使尿酸性 再加乙醚约3m 加塞充分振摇。然后静置片刻使醚层 分离（如乙醚层成胶状不易分离时，可加入95%乙醇数滴以促其分离）血红蛋白在酸性环境下， 溶于乙醚内。取滤纸1小片，滴加联苯胺冰醋酸饱和液数滴，再在此处滴加上述乙醚浸出液数滴，待 乙醚蒸发后，再滴加新鲜过氧化氢液1~2滴。如尿内含有血液，滤纸上可显蓝色或绿色，其颜色深 度与含量呈正比 根据颜色的深浅，用1~4个“+”号报告结果（绿色十，蓝绿色十十，蓝色十十十，深蓝色++ +4) (3)注意事项尿液应先加热煮沸，以破坏可能存在的过氧化氢酶，防止产生假阳性。 所用试管、 商管等器材，必须清洁 (四)尿中尿胆素原的检验 1.Ehrlich醛反应定性法 (1)原理尿胆素原在酸性溶液中与对二甲氨基苯甲醛反应，生成红色化合物： (2)器材与试剂先将对二甲氨基苯甲醛2.0g溶于80ml蒸馏水中，再加入浓盐酸20ml,边加边 摇，置棕色瓶保存，此称Ehrlich试剂。 实验十 实验室尿常规检验 目 的 和 要 求 掌握尿液化学检验方法及尿沉渣的检查方法，要求学生按本指导所列方法顺利操作，并能认识某 些沉渣及管型。 内 容 和 方 法 （一）尿液酸碱度的测定 1.PH试纸法 可先用PH广泛试纸条，然后再用精密试纸条浸湿被检的新鲜尿液，立即与标准色板 比较，判断尿液的PH范围，作出半定量。 2.PH计测定法 用PH计电极可精确测出尿液PH值。 （二）尿液蛋白质检验 1.干化学试纸法 按蛋白质试纸产品说明书要求，取有效试纸条，浸入被测尿液中一定时间，取 出后在容器边缘除去多余尿液，30S内对照标准色板比色，根据说明判断结果。 2.硝酸法 取中试管1支，滴加35﹪硝酸1～2ml（20～40滴），在沿试管壁缓缓滴加尿液，使两液 重叠，静置5min，观察结果。两液重叠而产生白色环者为阳性反应。白色环愈宽，表示蛋白质含量 愈高，可用1～3个“＋”号表示之。 3.加热醋酸法 取约10ml新鲜澄清尿液于一耐热大试管内，将试管斜置在火焰上，煮沸上部尿 液。滴加稀醋酸（冰醋酸5ml加水至100ml配制而成）3～4滴，再煮沸后，在黑色背景下对光观察结 果。如有浑浊或沉淀，提示尿内含有蛋白质。浑浊程度越高，表示蛋白质含量越高，可用1～4 个“＋”号表示之。 4.磺基水杨酸法 取试管1支，加入澄清尿液2～3ml，滴加磺基水杨酸试剂（由磺基水杨酸20g，加 入溶解至100ml配制而成），立即轻轻混匀，于1min内观察结果，根据浑浊程度判断为1～4 个“＋”。 应注意马的尿中含有大量碳酸钙，因此应事先加入适量10﹪醋酸液使尿成酸性，尿液即透明，便 于观察结果。 （三）潜血的检验 健康动物的尿液不含有红细胞或血红蛋白。尿液中不能用肉眼直接观察出来的红细胞或血红蛋白 叫做潜血（或叫隐血），可用化学方法加以检查。 1.原理 尿液中的血红蛋白或红细胞被酸破坏所产生的血红蛋白，有过氧化氢酶的作用（但并非为 酶，因为被煮沸后仍有触媒作用），它可以分解过氧化氢而产生新生态的氧，使联苯胺氧化呈蓝色 的联苯胺蓝。 2.器材与试剂 小试管，滴管，普通滤纸，酒精灯，试管夹等。联苯胺，冰醋酸，过氧化氢溶 液，乙醚，95﹪乙醇。 3.操作方法 （1）联苯胺法 取联苯胺少许（约一刀尖），溶解在2ml冰醋酸中，加双氧水2～3ml，混合。混 合后，加入等量被检尿，如液体变绿或蓝色，表示尿中有血红蛋白存在。本法简便且比较灵敏，但 当尿中含有大量磷酸盐时，可发生乳白色沉淀，使反应无法测出。遇此情况，可选用下述“改良联 苯胺法”。 （2）改良联苯胺法 取尿液10ml置于试管中，加热煮沸以破坏可能存在的过氧化氢酶。待冷却 后，加入冰醋酸10～15滴，使尿呈酸性。再加乙醚约3ml，加塞充分振摇。然后静置片刻，使乙醚层 分离（如乙醚层成胶状不易分离时，可加入95﹪乙醇数滴以促其分离）血红蛋白在酸性环境下，可 溶于乙醚内。取滤纸1小片，滴加联苯胺冰醋酸饱和液数滴，再在此处滴加上述乙醚浸出液数滴，待 乙醚蒸发后，再滴加新鲜过氧化氢液 1～2滴。如尿内含有血液，滤纸上可显蓝色或绿色，其颜色深 度与含量呈正比。 根据颜色的深浅，用1～4个“＋”号报告结果（绿色＋，蓝绿色＋＋，蓝色＋＋＋，深蓝色＋＋ ＋＋）。 （3）注意事项 尿液应先加热煮沸，以破坏可能存在的过氧化氢酶，防止产生假阳性。 所用试管、滴管等器材，必须清洁。 （四）尿中尿胆素原的检验 1.Ehrlich醛反应定性法 （1）原理 尿胆素原在酸性溶液中与对二甲氨基苯甲醛反应，生成红色化合物。 （2）器材与试剂 先将对二甲氨基苯甲醛2.0g溶于80ml蒸馏水中，再加入浓盐酸20ml，边加边 摇，置棕色瓶保存，此称Ehrlich试剂