42卷5期 曹胜男等：α-环糊精戊酸包合物的制备及释放动力学研究 701 成分的应用提供参考。 器有限公司)，400MHz布鲁赫核磁共振波普仪（德 1材料与方法 国布鲁仪器有限公司)。 1.2方法 1.1材料 1.2.1戊酸包合物的制备包合物制备采用经过预 试剂：α-环糊精（含量99%，成都格雷西亚化 实验后改进的共沉淀法56。称取α-环糊精0.5g于 学技术有限公司)：戊酸（含量99%，西格玛奥德 磨口具塞试管中，加入5mL蒸馏水，配成10%的 里奇公司)：正己烷(AR,国药集团化学试剂有限 环糊精溶液，于100℃中沸水浴40min使其完全溶 公司)：无水乙醇(AR,国药集团化学试剂有限公 解。α-环糊精溶液冷却至40℃后，将戊酸的乙醇溶 司)。 液(1：1，VV)缓慢逐滴加入α-环糊精溶液中，加 仪器：BSA224S型电子天平（北京赛多利斯科 塞密封后充分震荡混匀，50~70℃温度下超声反应 学仪器有限公司)：QL-901 Vortex漩涡混合器（海 30~60min。反应结束后将试管置于4℃条件下过夜， 门市其林贝尔仪器制造有限公司)：KQ-250DE型数 冷冻干燥后即得到α-环糊精戊酸包合物的白色粉 控超声波清洗机（昆山市超声仪器有限公司）： 末，于4℃环境密封保存。 JW-3021HR高速冷冻离心机（安徽嘉文仪器装备有 1.2.2戊酸包合物制备正交试验根据预实验结果 限公司)：DK-S26型电热恒温水浴锅（上海精宏实 选取主客比(1：2、1：1、21、3：1和4：1)，包合时间 验设备有限公司)：安徽嘉文仪器装备有限公司： (15、30、45、60和75min),包合温度(40、50 FD-1A-50型冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限 60、70及80℃)为因素进行单因素实验，结果显示 公司)：7890B气相色谱仪（美国安捷伦科技有限公 随着主客比(A),时间(B),温度(C)的增大环糊 司)：S-4800扫描电镜（日本日立公司）：i50傅立 精包合率均出现先增加后平稳或下降的趋势。采用 叶变换红外光谱仪（美国尼高力仪器公司）：D8 L(3实验方法进行正交试验。因素水平表详见表1 ADVANCE多晶X射线粉末衍射仪（德国布鲁克仪 所示。 表1L(3正交试验因素及水平 Table 1 Factors and levels of orthogonal design 水平 因素Factor Level A戊酸a-环糊精分子摩尔比 B超声时间/min C超声温度/℃ Molecular ratio of valeric acid /a-cyclodextrin Ultrasound time Ultrasound temperature 1 1:1 30 50 2 21 45 60 3 3:1 60 70 1.2.3戊酸包合率的测定(1)标准曲线的绘制。 处理30min,使得戊酸从a-环糊精的空腔中转移到 将戊酸分散于正己烷中，配制成不同体积浓度的戊 正己烷中问。然后4200rmin离心处理10min以获 酸正己烷溶液（体积浓度分别为0.25、0.5、1.0、1.5、 得澄清的上清液，过滤膜后对上清液进行GC分析 2.0、2.5和3.0LmL),使用气相色谱(GC)分 得出相应的峰面积，使用回归方程计算出包合物中 析得出相应峰面积，以峰面积为横坐标，戊酸体积 戊酸的含量。 浓度为纵坐标绘制出标准曲线。得相应回归方程为 (4)包合率的计算。包合率(%)=包合物中 Y=0.0031X-0.0435(R2=0.9987)。 戊酸的含量(mol)/初始投入的戊酸的量(mol) (2)气相色谱条件。色谱柱为极性毛细管柱 ×100% DB-WAX毛细管柱(30m×0.32nm×0.25m):载 1.2.4包合物的表征(1)扫描电镜。对环糊精原 气为氨气，流速为10 mL.min；分流比为50：1；检 样及包合物进行扫描电镜测试。用导电双面胶将样 测器为FID:进样口温度和检测器温度分别为250 品固定在样品台上，喷镀铂金后在3kV条件下观察 ℃、275℃：柱箱温度为60℃保持1min后，以 环糊精及其包合物表面形态，放大倍率为600倍。 10℃min升至240℃。在此条件下，戊酸出峰时间 (2)红外光谱分析。分别对环糊精、戊酸及包 在12.58min,对称性良好。 合物进行红外光谱测试。固体样品采用KBr压片法 (3)包合物中戊酸的提取。称取包合物0.1g 处理，即将100 mg KBr与1mg样品在干燥状态下 分散于5mL正己烷中，密封后混匀并于60℃超声 充分研磨、混合均匀，然后压成约1mm厚的薄片42 卷 5 期 曹胜男等: α-环糊精戊酸包合物的制备及释放动力学研究 701 成分的应用提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料 试剂：α-环糊精（含量 99%，成都格雷西亚化 学技术有限公司）；戊酸（含量 99%，西格玛奥德 里奇公司）；正己烷（AR，国药集团化学试剂有限 公司）；无水乙醇（AR，国药集团化学试剂有限公 司）。 仪器：BSA224S 型电子天平（北京赛多利斯科 学仪器有限公司）；QL-901 Vortex 漩涡混合器（海 门市其林贝尔仪器制造有限公司）；KQ-250DE 型数 控超声波清洗机（昆山市超声仪器有限公司）； JW-3021HR 高速冷冻离心机（安徽嘉文仪器装备有 限公司）；DK-S26 型电热恒温水浴锅（上海精宏实 验设备有限公司）；安徽嘉文仪器装备有限公司； FD-1A-50 型冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限 公司）；7890B 气相色谱仪（美国安捷伦科技有限公 司）；S-4800 扫描电镜（日本日立公司）；iS50 傅立 叶变换红外光谱仪（美国尼高力仪器公司）；D8 ADVANCE 多晶 X 射线粉末衍射仪（德国布鲁克仪 器有限公司），400 MHz 布鲁赫核磁共振波普仪（德 国布鲁仪器有限公司）。 1.2 方法 1.2.1 戊酸包合物的制备 包合物制备采用经过预 实验后改进的共沉淀法[5-6]。称取 α-环糊精 0.5 g 于 磨口具塞试管中，加入 5 mL 蒸馏水，配成 10%的 环糊精溶液，于 100℃中沸水浴 40 min 使其完全溶 解。α-环糊精溶液冷却至 40℃后，将戊酸的乙醇溶 液（1:1，V/V）缓慢逐滴加入 α-环糊精溶液中，加 塞密封后充分震荡混匀，50~70℃温度下超声反应 30~60 min。反应结束后将试管置于 4℃条件下过夜， 冷冻干燥后即得到 α-环糊精戊酸包合物的白色粉 末，于 4℃环境密封保存。 1.2.2 戊酸包合物制备正交试验 根据预实验结果 选取主客比（1:2、1:1、2:1、3:1 和 4:1），包合时间 （15、 30、45、60 和 75 min），包合温度(40、50、 60、70 及 80℃)为因素进行单因素实验，结果显示 随着主客比（A），时间（B），温度(C)的增大环糊 精包合率均出现先增加后平稳或下降的趋势。采用 L9(34 )实验方法进行正交试验。因素水平表详见表 1 所示。 表 1 L9(34 )正交试验因素及水平 Table 1 Factors and levels of orthogonal design 因素 Factor 水平 Level A 戊酸/α-环糊精分子摩尔比 Molecular ratio of valeric acid /α-cyclodextrin B 超声时间/min Ultrasound time C 超声温度/℃ Ultrasound temperature 1 1:1 30 50 2 2:1 45 60 3 3:1 60 70 1.2.3 戊酸包合率的测定 （1）标准曲线的绘制。 将戊酸分散于正己烷中，配制成不同体积浓度的戊 酸正己烷溶液（体积浓度分别为 0.25、0.5、1.0、1.5、 2.0、2.5 和 3.0 μL·mL-1），使用气相色谱（GC）分 析得出相应峰面积，以峰面积为横坐标，戊酸体积 浓度为纵坐标绘制出标准曲线。得相应回归方程为 Y=0.0031 X-0.0435（R2 =0.9987）。 （2）气相色谱条件。色谱柱为极性毛细管柱 DB-WAX 毛细管柱（30 m ×0.32 nm×0.25 μm）；载 气为氮气，流速为 10 mL·min-1；分流比为 50:1；检 测器为 FID；进样口温度和检测器温度分别为 250 ℃、275℃；柱箱温度为 60℃保持 1 min 后，以 10℃·min-1 升至 240℃。在此条件下，戊酸出峰时间 在 12.58 min，对称性良好。 （3）包合物中戊酸的提取。称取包合物 0.1 g 分散于 5 mL 正己烷中，密封后混匀并于 60℃超声 处理 30 min，使得戊酸从 α-环糊精的空腔中转移到 正己烷中[5]。然后 4200 r·min-1 离心处理 10 min 以获 得澄清的上清液，过滤膜后对上清液进行 GC 分析 得出相应的峰面积，使用回归方程计算出包合物中 戊酸的含量。 （4）包合率的计算。包合率（%）=包合物中 戊酸的含量（mol）/初始投入的戊酸的量（mol） ×100% 1.2.4 包合物的表征 （1）扫描电镜。对环糊精原 样及包合物进行扫描电镜测试。用导电双面胶将样 品固定在样品台上，喷镀铂金后在 3 kV 条件下观察 环糊精及其包合物表面形态，放大倍率为 600 倍。 （2）红外光谱分析。分别对环糊精、戊酸及包 合物进行红外光谱测试。固体样品采用 KBr 压片法 处理，即将 100 mg KBr 与 1 mg 样品在干燥状态下 充分研磨、混合均匀，然后压成约 1 mm 厚的薄片