BamHⅡ N U N Amp cos 真核基因组DNA c2RB Kan (6.8kb) repli cos SmaI Sau3A局部消化 用BamHI和 SmaI双酶切 SmaI 齐平端 BamHI BamHI 齐平端 COS repli amp amp coS SmaI 混合连接 SmaI ↓ 齐平端 齐平端cos repli amp 真核DNA片断 CoS SmaI (37-52kb) 体外包装、感染大肠杆菌 29 BamHI c2RB repli amp repli amp amp