(2)上图中质粒上有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因两个标记基因，经过步 骤①②后，有些质粒上的 基因内插入了目的基因，形成重组 质粒，由于目的基因的插入使得该抗性基因失活。 (3)步骤③是 的过程，为了促进该过程，应该用 处理大肠杆菌。 (4)步骤④是将锥形瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛 选 的大肠杆菌，能在C中生长的大肠杆菌有种。 (⑤)步骤⑤：用无菌牙签挑取C上的若干单个菌落，分别接种到D(含氨苄青霉素和 四环素)和E(含四环素)两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如 上图所示。含目的基因的菌落位于■ (填D”或E)上，请在图中相应的位置 上圈出来。 答案(1)限制酶DNA连接酶 (2)氨苄青霉素抗性 (3)将重组质粒（目的基因）导入大肠杆菌（受体细胞）C2+ (4)含四环素抗性基因两 (5)E 888 888 D 含氨苄青霉 含四环素 素和四环素 24.(8分)下表是几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相 关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题。 限制酶 BamH Bcl I Sau3A I Hind IⅢ 识别序列及 GGATCC TGATCA GATC AAGCTT 切割位点 CCTAGG ACTAGT CTAG TTCGAA(2)上图中质粒上有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因两个标记基因,经过步 骤①②后,有些质粒上的 基因内插入了目的基因,形成重组 质粒,由于目的基因的插入使得该抗性基因失活。 (3)步骤③是 的过程,为了促进该过程,应该用 处理大肠杆菌。 (4)步骤④是将锥形瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基 C 上培养,目的是筛 选 的大肠杆菌,能在 C 中生长的大肠杆菌有 种。 (5)步骤⑤:用无菌牙签挑取 C 上的若干单个菌落,分别接种到 D(含氨苄青霉素和 四环素)和 E(含四环素)两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如 上图所示。含目的基因的菌落位于 (填“D”或“E”)上,请在图中相应的位置 上圈出来。 答案:(1)限制酶 DNA 连接酶 (2)氨苄青霉素抗性 (3)将重组质粒(目的基因)导入大肠杆菌(受体细胞) Ca2+ (4)含四环素抗性基因 两 (5)E 24.(8 分)下表是几种限制酶的识别序列及其切割位点,图 1、图 2 中箭头表示相 关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题。 限制酶 BamH Ⅰ Bcl Ⅰ Sau3A Ⅰ Hind Ⅲ 识别序列及 切割位点