酶联免疫吸附测定法 13307130142徐涣霖 、概述 1971年瑞典的 Engval1等人分别以纤维素和聚苯乙烯试管作为固相载体 吸附抗原/抗体,建立了酶联免疫吸附测定( Enzyme linked Immunosorbent Assay, 简称 ELISA),后来人们改用板式反应孔进行 ELISA,大大地提高了实验通量 ELISA实验具有极高的灵活性,实际操作中人们可以根据自己的需要以及手上已 有的材料进行灵活的组合而进行各种可样的 ELISA进行反应测定,另外 ELISA 实验中的相关试剂和耗材都已经商品化,所以 ELISA被广泛地应用于生物学的 各种研究中。 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载 体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学 活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定抗体或抗原)与固相载体表面的 抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体 中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体 上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物 后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故 可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了 免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度 、原理图解 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。使抗原或抗体结合到某种固相 载体表面,并保持其免疫活性。 使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留 其免疫活性,又保留酶的活性结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成 一定的比例。 测定时,受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应,洗涤加入酶标记抗 原或抗体,加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本酶联免疫吸附测定法 13307130142 徐涣霖 一、概述 1971 年瑞典的 Engvall 等人分别以纤维素和聚苯乙烯试管作为固相载体 吸附抗原/抗体,建立了酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosrbent Assay, 简称 ELISA),后来人们改用板式反应孔进行 ELISA,大大地提高了实验通量。 ELISA 实验具有极高的灵活性,实际操作中人们可以根据自己的需要以及手上已 有的材料进行灵活的组合而进行各种可样的 ELISA 进行反应测定,另外 ELISA 实验中的相关试剂和耗材都已经商品化,所以 ELISA 被广泛地应用于 生物学的 各种研究中。 ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载 体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学 活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定抗体或抗原)与固相载体表面的 抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体 复合物与液体 中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体 上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物 后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物 质的量直接相关,故 可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了 免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 二、原理图解 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。使抗原或抗体结合到某种固相 载体表面，并保持其免疫活性。 使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留 其免疫活性，又保留酶的活性结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成 一定的比例。 测定时，受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应，洗涤加入酶标记抗 原或抗体，加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本