三．实验方法  １．挑取琼脂培养板上的单菌落至5ml LB培养液中（含AmP 50μg/ml）， ３７℃强烈摇荡过度。  ２．取1.5ml培养液至Eppendorf管中，12000g离心30秒， 弃上清，用１ml STE悬浮菌体，再离心回收菌体，并重复一 次，弃上清，取沉淀。  ３．将细菌沉淀悬浮于100μl预冷溶液Ⅰ中，振荡混匀，冰 上放置5分钟。  ４．加入200μl溶液Ⅱ，盖严管盖轻柔颠倒５次以混匀内容 物，冰上放置5分钟。  ５．加入150μl溶液Ⅲ，温和振荡数次，冰上放置５分钟。  ６．12000g 4 ℃离心５分钟，取上清移到１个新的 Eppendorf管中。三．实验方法  １．挑取琼脂培养板上的单菌落至5ml LB培养液中（含AmP 50μg/ml）， ３７℃强烈摇荡过度。  ２．取1.5ml培养液至Eppendorf管中，12000g离心30秒， 弃上清，用１ml STE悬浮菌体，再离心回收菌体，并重复一 次，弃上清，取沉淀。  ３．将细菌沉淀悬浮于100μl预冷溶液Ⅰ中，振荡混匀，冰 上放置5分钟。  ４．加入200μl溶液Ⅱ，盖严管盖轻柔颠倒５次以混匀内容 物，冰上放置5分钟。  ５．加入150μl溶液Ⅲ，温和振荡数次，冰上放置５分钟。  ６．12000g 4 ℃离心５分钟，取上清移到１个新的 Eppendorf管中