氨基酸经水解产生羟酸与氨，羟酸经脱羧生成一元醇。 ④分解脱氨。 编号/稀释度 1-10 T1:100 1:1000 氨基酸直接脱去氨基，生成不饱和酸与氨，即为分解脱氨基。 多不可计 168 250 (⑤)核酸的分解。 多不可计 160 15 核酸的分解代谢的第一步是水解连接核苷酸之间的磷酸二酯键，生成低级多核苷酸 多不可十 272 55 或单核苷酸：只能作用于核酸的磷酸二酯键的酶，称为核酸酶。 名不可可十 305 12 多不可计 312 9 四、论述题：（每题12.5分共25分） 1.乳糖胆盐发酵管培养法测定大肠杆菌是常用的试验方法，请叙述其原理及过程。 ①1：100和1：1000菌落数都在30-300范围内，其比值)2的平均值计菌落总数 原理：大肠杆菌能发酵乳糖，产酸，产气，需氧或兼性厌氧，是G-无芽孢杆菌， 为168×100=16800个e/ml报告为1.7×104个eml. 乳糖胆盐可以排除朵菌，利用这些特点可以对大肠杆菌进行鉴别。 ②只有1：100稀释度菌落数在30300内，菌落总数为160×100=1600个/g/m1报 过程：①样品处理：吸取25ml检样，加入到225ml灭菌生理盐水中混可制成1： 告为1.6×10个/g/ml. 10稀释液，用灭菌的吸管吸取1ml上述稀释液加入到9ml灭菌生理盐水中，混可制 ③两个稀释度菌落数都在30`300内，比值)2菌落总数为272×100=27200个/g/ml 成1：100稀释液，用同样的方法制备1：1000稀释液，每个梯度做3个样②乳糖肥 报告为2.7×10个/g/m1. 盐发酵，吸取上述梯度稀释溶液各1ml加入己制好的乳糖胆盐发酵管中，在36士1℃ ④两个稀释度都不在30300内，而1：100菌落接近30300的范围，菌落总数为 下培养24士2h观察，若都不产气，报告大肠杆菌阴性，产气做以下试验③EMB分 离培养，挑取产气发酵管菌液接种在EMB培养基上，在36士1℃下培养，24士2h 305×100=30500个/g/m1报告为3.1×10°个/g/m1. 观察菌落形态，有金属光泽，并作乳糖发酵验证和革兰氏染色④挑去可疑菌落进行 ⑤连个稀释度都不在30300内，1：100菌落数更接近，菌落数为312×100=31200 革兰氏染色，同时做乳糖发酵试验，G+菌为大肠杆菌阴性报告，既产气，又是G 个/g/m1报告为：3.1×10个/g/m1 菌为大肠杆菌阳性。③观察试验结果计数报告 2.阐述牛乳被微生物污染的整个过程（列出每个阶段不同微生物的生长特性）。 牛乳被微生物污染的整个过程：①抑制期，鲜乳中存在有乳清，溶菌酶等抗菌 抑制，抑制微生物生长。②乳链球菌期：乳中的抑菌物质减少，微生物如乳杆菌， 乳链球菌，乳酸菌等开始生长繁殖，其中乳链球菌生长繁殖速度最快，发酵乳鹅产 生乳酸，使乳ph下降③乳杆菌期：当乳的ph下降到<4.5时，耐酸的乳杆菌可以生 长繁殖，继续产酸，ph下降，此时乳中出现疑块，乳清，浙出④真菌期：乳的ph 下降到3.0-3.5时，大量的微生物不能生长，而酵母霉菌可以分解乳酸使乳的h开 始国升树收期：翻中的到碳幸经时上术过程已基本被宗全消手，牛音街白贡知苦 肪，而此时能分解利用蛋白质和脂肪的微生物分解蛋白质，使乳发生腐败变质，出 现臭味 五、计算题（每小题15分，共15分） 下表为编号/稀释度菌落总数对照表，请计算并报告每个稀释度下每个编号的菌落总 数：个/(gmL),并按规定以10的指数报告。 氨基酸经水解产生羟酸与氨，羟酸经脱羧生成一元醇。 ④分解脱氨。 氨基酸直接脱去氨基，生成不饱和酸与氨，即为分解脱氨基。 ⑸核酸的分解。 核酸的分解代谢的第一步是水解连接核苷酸之间的磷酸二酯键，生成低级多核苷酸 或单核苷酸；只能作用于核酸的磷酸二酯键的酶，称为核酸酶。 四、论述题：（每题 12.5 分 共 25 分） 1．乳糖胆盐发酵管培养法测定大肠杆菌是常用的试验方法，请叙述其原理及过程。 原理：大肠杆菌能发酵乳糖，产酸，产气，需氧或兼性厌氧，是 G-无芽孢杆菌， 乳糖胆盐可以排除朵菌，利用这些特点可以对大肠杆菌进行鉴别。 过程：①样品处理：吸取 25ml 检样，加入到 225ml 灭菌生理盐水中混可制成 1： 10 稀释液，用灭菌的吸管吸取 1ml 上述稀释液加入到 9ml 灭菌生理盐水中，混可制 成 1：100 稀释液，用同样的方法制备 1：1000 稀释液，每个梯度做 3 个样②乳糖胆 盐发酵，吸取上述梯度稀释溶液各 1ml 加入已制好的乳糖胆盐发酵管中，在 36±1℃ 下培养 24±2h 观察，若都不产气，报告大肠杆菌阴性，产气做以下试验③ EMB 分 离培养，挑取产气发酵管菌液接种在 EMB 培养基上，在 36±1℃下培养，24±2h 观察菌落形态，有金属光泽，并作乳糖发酵验证和革兰氏染色④ 挑去可疑菌落进行 革兰氏染色，同时做乳糖发酵试验，G+菌为大肠杆菌阴性报告，既产气，又是 G- 菌为大肠杆菌阳性。⑤ 观察试验结果计数报告 2．阐述牛乳被微生物污染的整个过程（列出每个阶段不同微生物的生长特性）。 牛乳被微生物污染的整个过程：①抑制期，鲜乳中存在有乳清，溶菌酶等抗菌 抑制，抑制微生物生长。②乳链球菌期：乳中的抑菌物质减少，微生物如乳杆菌， 乳链球菌，乳酸菌等开始生长繁殖，其中乳链球菌生长繁殖速度最快，发酵乳糖产 生乳酸，使乳 ph 下降③乳杆菌期：当乳的 ph 下降到＜4.5 时，耐酸的乳杆菌可以生 长繁殖，继续产酸，ph 下降，此时乳中出现疑块，乳清，淅出④真菌期：乳的 ph 下降到 3.0~3.5 时，大量的微生物不能生长，而酵母霉菌可以分解乳酸使乳的 ph 开 始回升⑤腐败期：乳中的乳糖等经过上述过程已基本被完全消耗，生育蛋白质和脂 肪，而此时能分解利用蛋白质和脂肪的微生物分解蛋白质，使乳发生腐败变质，出 现臭味. 五、计算题（每小题 15 分，共 15 分） 下表为编号/稀释度菌落总数对照表，请计算并报告每个稀释度下每个编号的菌落总 数：个/（g/mL），并按规定以 10 的指数报告。 编号/稀释度 1:10 1:100 1:1000 1 多不可计 168 250 2 多不可计 160 15 3 多不可计 272 55 4 多不可计 305 12 5 多不可计 312 9 ①1：100 和 1：1000 菌落数都在 30~300 范围内，其比值〉2 的平均值计菌落总数 为 168×100＝16800 个/g/ml 报告为 1.7×104 个/g/ml. ②只有 1：100 稀释度菌落数在 30~300 内，菌落总数为 160×100＝1600 个/g/ml 报 告为 1.6×104个/g/ml. ③两个稀释度菌落数都在 30~300 内，比值〉2 菌落总数为 272×100＝27200 个/g/ml 报告为 2.7×104 个/g/ml. ④两个稀释度都不在 30~300 内，而 1：100 菌落接近 30~300 的范围，菌落总数为 305×100＝30500 个/g/ml 报告为 3.1×104 个/g/ml. ⑤连个稀释度都不在 30~300 内，1：100 菌落数更接近，菌落数为 312×100＝31200 个/g/ml 报告为：3.1×104 个/g/ml