南方水产 究方面开有一条新的思路。但由于基因饺苗的发展刚细病变抑制法联定了病幸诱导前后草鱼外周血中干狱 处于起始阶段,对于基因疫苗在色体内的作用和代谢机制的活性变化,结果表明经毒诱导的草鱼血请中出现明显 还不完全清楚,其便捷实用的使用方法和适宜剂量也需要的千状素抗病毒活低,并计素话性因子进行了理化性 实验的深(研究外,对于基变苗中所用抗原基因6(:08话防是过号合 的分离技标还像不成热,抗原表达控元件的优有待成证状素来实观,类千素究入仅为千北 于步的索。但可以肯定,未来更多的效安全使素的分进化和比免变学等基分究提供资料,有重 用方便的基国疫制备和大规模生产,4将能够促进我要的用配,而且在鱼病中有广间的应用前景 国草鱼养殖的发展 特别是通过草鱼于素研究有可能月我国水产殖中的草 52菲鱼出血病的中草药防治 色出血病治开新的途径 中草药具有天然、商效幸面件用小、抗药性着、近年来,国学者采用化学合成法或基因工程法建 资源丰富以及性能多样化等优点,在防治鱼病中,了兼随机狱库,研究蛋白质之的分子识别、与底物的结合 有药性和性外,还具有提高水产动物生产性能和用料原抗体相件用,成的快有 利朋摔的功效。因此应用中草药5治鱼病越来受到人们潜力大的技术,广泛应用于分子识有关饭城,如 的关注,并特选出许多在生产应用中之有单方、抗生素,抑制,小分子药物没计,重组变苗 验方3)在分及预战草鱼出血中应用的最多的中设计及病李高亲和力的杭体信治及免疫,由于 药大太等人技术要的值0用前,1项 分草鱼出经的上,过反复,用￥日、具大潜力的病毒)路8来受到重视,冰 太黄生根、有、等十几种中单药淘成方8￥甲队魔库中单预魅 球止值款,用于草出址,查海果表,异性结合的短取子,并能有的中和病阻精 有车在9以:右08:是中草药在第这的是了技在体外简选裤 草鱼出血病中银好的应用例子。 制剂可影性,并为高效杭病毒短联制剂的及办分子抗病 中草蛋杰航方面有+定的在炼读的计打 应用中也存在许多问题,集中表现在以下几个方面:1() 朝魔不球节、产方法等不月铁效 一种中草药,共有效成分含量差异很大,有时同样的配方 l]毛乇坚,建忘,杭錡,等草鱼出血病铈原联究水 却效不同。(2)加工艺原始,日前中草药的加工大多 产学,991 用大,口性也,不利于规模化生产应眼应采取.9围1 进的生产工艺,对中单练走取着制,使其黄量中科续水性生所所单鱼编病面粉 化,系列化、专用型方发展(4)对用中草药的药、究]879:31 理方面研究不足,对其有效成分难以确认,使用的剂量4旗草呼病革的三维构衣壳蛋白特性(国 没有严格的标家准。因此应加强在这方面的研究,如强对中806:13 草药迸行提纯和治疗机理方面的研究,克分台淫开我国延王球,丽华等拿出血病的蛋白椭特的多 的中单药资源,0补在中药究上的)使中草药航09154 在防治鱼病方面发挥其应有的作用。 6】曾令兵,袁明雄草鱼出血病喜高滴度培养方法物研究 53草鱼出血病的其它防治方法研究 淡水,0,53(4:44 章怀等8用外原DN5处加,e2(1(藏建苏续将车装 文库的构建(水生特,0:11 肝脏的总DNH以精子作载体处理草鱼受精,获得了数批 8丁清泉,余芬,王学,等草鱼出病鱼壬要官的 经外DNH处理的草鱼群体,并证明该看体在自然殖条 切片观察及感染力的比较(1水产学很,9,1 件下显示出一定的抗草鱼出血病的症状。￥当人工感染时, 其31:8倍付12,,蒋新,至,等就用取型技术测草值 鱼芬续间1-24.其具体机尚待进-究 出血病的究小水产学,1901:61 素是至发观的最想的种病生物性10年,,用合反接 物质,是一种主要细胞调节因子,具有抗病抗种和色击病鱼组]89,1 免疫周节等功1日前研究较为活,邵建等采用12:-南 方 水 产 第 2卷 的研究方面开拓一条新的思路。但由于基因疫苗的发展刚 处于起始阶段，对于基因疫苗在鱼体内的作用和代谢机制 还不完全清楚，其便捷实用的使用方法和适宜剂量也需要 实验的深人研究。另外，对于基因疫苗中所用的抗原基因 的分离技术还很不成熟，抗原表达控制元件的优选也有待 于进一步的探索。但可以肯定，未来更多的高效安全、使 用方便的基因疫苗的制备和大规模生产，必将能够促进我 国草鱼养殖业的发展。 5.2 草鱼出血病的中草药防治 中草药具有天然、高效、毒副作用小、抗药性不显著、 资源丰富以及性能多样化等优点，在防治鱼病中，除了兼 有药性和营养性外，还具有提高水产动物生产性能和饲料 利用率的功效。因此应用中草药防治鱼病越来越受到人们 的关注，并总结筛选出许多在生产应用中行之有效的单方、 验方[”一’61。在治疗及预防草鱼出血病中应用的最多的中草 药有:大黄、黄柏、黄等、大蒜等。袁良萃[ 37〕在总结前人 治疗草鱼出血病经验的基础上，经过反复实践，利用当归、 大黄、板兰根、赤芍、虎仗等十几种中草药剂制成方剂 “景珠牌止血散” ，用于防治草鱼出血病，调查结果表明， 有效率在95%以上，治愈率占90%以上。是中草药在防治 草鱼出血病中很好的应用例子。 中草药虽然在防治鱼病方面有一定的功效，但在实际 应用中也存在许多问题，集中表现在以下几个方面:(1) 药材质量不稳定，由于季节、产地、炮制方法等不同，同 一种中草药，其有效成分含量差异很大，有时同样的配方 却疗效不同。(2)加工工艺原始，目前中草药的加工大多 以原药粉碎或切碎煎熬，其配方多为粗制型产品，剂量使 用偏大，适口性也差，不利于规模化生产、应用。应采取 先进的生产工艺，对中草药进行提取、精制，使其向微量 化、系列化、专用型方向发展。(4)对渔用中草药的药效、 药理方面研究不足，对其有效成分难以确认，使用的剂量 没有严格的标准。因此应加强在这方面的研究，加强对中 草药进行提纯和治疗机理方面的研究 ，充分合理开发我国 的中草药资源，以弥补在中草药研究上的空缺。使中草药 在防治鱼病方面发挥其应有的作用。 5.3 草鱼出血病的其它防治方法研究 章怀云等〔38]采用外源DNA处理方法，将鲤鱼精液、 肝脏的总 DNA以精子作载体处理草鱼受精卵，获得了数批 经外源DNA处理的草鱼群体，并证明该群体在自然养殖条 件下显示出一定的抗草鱼出血病的症状。当人工感染时， 其抗病力比普通鱼强3.98 -5.89倍。潜伏期长1-2d，死 鱼持续时间短 1-2d。其具体机制尚待进一步研究。 干扰素是至今发现的最为理想的一种抗病毒生物活性 物质，是一种主要细胞调节因子，具有抗病毒、抗肿瘤和 免疫调节等功能〔391。目前研究较为活跃，邵建忠等{[40〕采用 细胞病变抑制法测定了病毒诱导前后草鱼外周血中干扰素 的活性变化，结果表明经病毒诱导的草鱼血清中出现明显 的干扰素抗病毒活性，并对干扰素活性因子进行了理化性 质的研究。GCRV激活寄主抗病毒防御机制是通过诱导合 成和分泌干扰素来实现的，对鱼类干扰素研究不仅为干扰 素的分子进化和比较免疫学等基础研究提供资料，具有重 要的理论意义，而且在鱼病防治中有广阔的应用前景〔1410 特别是通过草鱼干扰素研究有可能为我国水产养殖中的草 鱼出血病防治开辟新的途径。 近年来，国外学者采用化学合成法或基因工程法构建 随机肤库，研究蛋白质之间的分子识别、酶与底物的结合、 抗原与抗体的相互作用，并使之成为一门新的快速有效、 潜力巨大的技术，广泛应用于与分子识别有关的领域，如: 抗生素筛选、酶抑制剂筛选、小分子药物设计、重组疫苗 设计及病毒高亲和力的抗体、肿瘤治疗及免疫治疗，由于 肤库技术具有如此重要的理论价值和应用前景，作为一项 具有极大潜力的抗病毒新策略，越来越受到重视。王冰 等〔411报道了从随机肤库中筛选出与草鱼出血病病毒颗粒特 异性结合的短肤分子，并能有效的中和病毒、阻止病毒感 染。这一新的途径提示了应用肤库技术在体外筛选抗病毒 制剂的可能性，并为高效抗病毒短肤制剂的及小分子抗病 毒药物的设计打下基础。 参考文献: [1〕毛树坚，邵建忠，杭绮，等.草鱼出血病的病原研究 [Jl.水 产学报，1989, 13 (1):1一4. [2]倪达书.我国鱼病学研究现状及其发展前景 「il.现代渔业信 息，1994, 9 (3):1一4. [3]中国科学院水生生物研究所三室病毒组.草鱼出血病病原的研 究 [il.水生生物学集刊，1978, 6 (3):321一329. [4〕方勤.草鱼呼肠孤病毒的三维结构与衣壳蛋白特性 【Jl.中国 科学，2005，35 (3):231一237. [5〕陈延，王炜，柯丽华，等.草鱼出血病病毒的糖蛋白和结构多 肤的抗原性 [il.病毒学报，1992, 3(1):57一61. [6l曾令兵，袁明雄.草鱼出血病病毒高滴度培养方法的研究 [il.淡水渔业，2000, 30 (4):40一41. [7]张义兵，石耀华，桂建芳.鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA 文库的构建[Jl·水生生物学报，200争，27 (2):113一118. [8]丁清泉，余兰芬，王学兰，等.草鱼出血病病鱼主要器官的超 薄切片观察及感染力的比较 〔Jl.水产学报，1990, 14 (1 ); 66一69. [9]邵建忠，项黎新，李亚南，等.应用Dot一ELISA技术检测草鱼 出血病病毒的研究 [1l.水产学报，1996, 20 (1); 6一11. [10〕李军，王铁辉，周立冉，等.应用逆转录聚合酶链反应直接 检测草鱼出血病病鱼组织的研究 〔Jl.水产学报，1997, 21 (2):175一179