蓝白斑筛选 对载体连接和转化的结果进行鉴定，筛选出载体连接有目 的基因并成功转化入宿主菌的克隆 宿主菌：DH5a,acZ△M15基因型，其编码的B-半乳糖苷酶缺失N端一个 146个氨基酸的短肽（即a肽链），不具酶活性。 T载体： 多克隆位点(multiple MCS cloning site) Ampicillin lacZa resistance gene gene 氨苄青霉素抗性基 因，用于鉴定转化 T Vector 编码β-半乳糖苷酶a肽链， 用于鉴定外源基因连接 X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-B-D-半乳糖苷)：生色底物，被B-半乳糖苷酶分 解产生蓝色物质5-溴-4-氯靛蓝。 IPTG(异丙基硫代-B-D-半乳糖苷)：β-半乳糖苷酶的活性诱导物质 LB-Amp平板：含氨苄青霉素的LB培养基平板 蓝白斑筛选 IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷):β–半乳糖苷酶的活性诱导物质 X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)： 生色底物，被β-半乳糖苷酶分 解产生蓝色物质5-溴-4-氯靛蓝。 宿主菌: DH5α, lacZ△M15基因型，其编码的β-半乳糖苷酶缺失N端一个 146个氨基酸的短肽（即α肽链），不具酶活性。 T载体： 编码β-半乳糖苷酶α肽链， 用于鉴定外源基因连接 多克隆位点（multiple cloning site） 氨苄青霉素抗性基 因，用于鉴定转化 对载体连接和转化的结果进行鉴定，筛选出载体连接有目 的基因并成功转化入宿主菌的克隆 LB-Amp平板 :含氨苄青霉素的LB培养基平板