GB18466-2005 将样品接种于装有乳糖胆盐培养液的试管(内有小倒管)中,44℃培养24h。样品接种体积以 及管内乳糖胆盐培养液的浓度与体积根据以下条件确定 样品为污水时,取三个接种量,每个接种量的样品分别接种于5个试管内,共需15个试管。试 管内乳糖胆盐培养液的浓度与体积应根据接种量确定。若接种量为10ml,吸取10ml样品接种于装 有5m三倍浓度乳糖胆盐培养液的试管内;若接种量为1m时,吸取Iml样品接种于装有10m普 通浓度乳糖胆盐培养液的试管内;若接种量少于1ml时,吸取1ml稀释样品接种于装有10ml普通 浓度乳糖胆盐培养液的试管内。 样品为污泥时,取三个接种量,每个接种量的稀释样品分别接种于3个试管内,共需9个试管。 9个试管中,各装有10m乳糖胆盐培养液。各个试管接种稀释样品体积均为1ml A.4.3平板分离 大肠杆菌分解乳糖产酸时培养液变色、产气时小倒管内出现气泡。经24h培养后,将产酸的试 管内培养液分别划线接种于EMB培养基上。置于37℃培养箱中,培养18~24h。 A.4.4鉴定 挑选可疑粪大肠菌群菌落,进行革兰氏染色和镜检。可疑菌落有:1)深紫黑色,具有金属光泽 的菌落;2)紫黑色,不带或略带金屑光泽的菌落;3)淡紫红色,中心色较深的菌落 上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌,则挑取上述典型菌落1-3个接种于盛有5ml 乳糖蛋白胨培养液倒管和倒管的试管内,置于44℃培养箱中培养24h。产酸产气试管为粪大肠菌群 阳性管。 A.5计数 根据证实有粪大肠菌群存在的阳性管数,查表A.1或A.2可得100m污水或1g污泥中粪大肠菌 群MPN值 由于表A.1和表A2是按一定的三个10倍浓度差接种量设计的(污水接种量为10、1和0.1ml, 污泥接种量为0.1、0.01和0.001g),当采用其他三个10倍浓度差接种量时,需要修正表内MPN值 具体方法如下: 表内所列污水(污泥)最大接种量增加10倍时表内MN值相应降低10倍;污水(污泥)最大 接种量减少10倍时表内MN值相应增加10倍。如污水接种量改为1、0.1和001ml时,表A.1内 MFN值相应增加10倍。其他的三个10倍浓度差接种量的MPN值相应类推 由于表A.1内MN值的单位为每100ml污水样品中MN值,而污水以1L为报告单位,因此 需将查表A.1得到的MN值乘上10,换算成1L污水样品中的MPN值。 表A.1污水中粪大肠菌群最可能数(MPN)检索表 (污水样品接种量为5份10ml水样,5份1m水样和5份0.1ml水样) 阳性管数 每 阳性管数 阳性管数 接种接种接种00ml接种接种接种100ml接种接种接种00ml 10n10m0.1ml水样中0mnl10m0.1ml水样中10mn10om0.nm水样中 水样水样水样MPN水样水样水样MN水样水样水样MN 5 0 000000 2