附：苯酚一硫酸法测定食品中多糖含量原理、步骤及注意事项 一、[实验原理] 保健食品中的粗多糖用乙醇沉淀，再用碱性硫酸铜沉淀分离后， 使用硫酸进行水解为葡萄糖，然后与苯酚-硫酸溶液反应显色，于490 波长处测定吸光值，以标准葡萄糖溶液制作标准曲线，比色定量。 二、[操作步骤] 分别吸取40μgml的葡萄糖溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 1.4、1.6、1.8、2.0ml,加去离子水补足2ml。然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5ml。静止10min,摇匀，室温放置20min后于490nm下测 定吸光度。以2.0ml水按同样显色操作为空白，绘制标准曲线。并计 算样品溶液中葡萄糖的含量！ 三、[注意事项] 1注意操作条件的一致性。 2.注意控制时间的一致性。 3.所需比色皿要进行校正。 4严格进行试剂添加（顺序、时间、方式、移液管的使用等） 5.由于实验中应用到苯酚、硫酸等有毒、易腐蚀的物质，因此要注 意实验安全，严格遵守实验规定。 四、讨论总结 各组介绍各项实验结果、实验过程中出现的失误好解决方法，提出 尚存的疑惑，供大家分析讨论。 五、思考题 1.实验中对于使用的752分光光度计，我们为何进行3次调零？每 次调零的意义？2 附：苯酚-硫酸法测定食品中多糖含量原理、步骤及注意事项 一、[实验原理] 保健食品中的粗多糖用乙醇沉淀，再用碱性硫酸铜沉淀分离后， 使用硫酸进行水解为葡萄糖，然后与苯酚-硫酸溶液反应显色，于 490nm 波长处测定吸光值，以标准葡萄糖溶液制作标准曲线，比色定量。 二、[操作步骤] 分别吸取 40μg/ml 的葡萄糖溶液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、 1.4、1.6、1.8、2.0ml，加去离子水补足 2ml。然后加入 6％苯酚 1.0ml 及浓硫酸 5ml。静止 10min，摇匀，室温放置 20min 后于 490nm 下测 定吸光度。以 2.0ml 水按同样显色操作为空白，绘制标准曲线。并计 算样品溶液中葡萄糖的含量。 三、[注意事项] 1.注意操作条件的一致性。 2.注意控制时间的一致性。 3.所需比色皿要进行校正。 4.严格进行试剂添加（顺序、时间、方式、移液管的使用等） 5.由于实验中应用到苯酚、硫酸等有毒、易腐蚀的物质，因此要注 意实验安全，严格遵守实验规定。 四、讨论总结 各组介绍各项实验结果、实验过程中出现的失误好解决方法，提出 尚存的疑惑，供大家分析讨论。 五、思考题 1.实验中对于使用的 752 分光光度计，我们为何进行 3 次调零？每 次调零的意义？