石蕊试纸等 ③a-萘胺氧化法测定根系活力的测定:分光光度计,分析天平,烘箱,50m三 角烧瓶x2,量筒ⅹ4,移液管x4,容量瓶κ2,烧杯、试管多个 ④活体法测定硝酸还原酶活性:分光光度计,真空泵(或注射器),温箱,天平 真空干燥器,50m三角烧瓶x2,钻孔器,烧杯、试管多个 ⑤便携式光和测定仪法测定植物光和强度: ECA-PB04025光和测定仪 四、实验试剂: ①a-萘胺氧化法测定根系活力的测定 α-萘胺溶液1(称取10mgα-萘胺,先用2ml左右的95%乙醇溶解,然后加水到 200m1,成为50μg/ml的溶液,取150ml该溶液再加水150m1稀释成25μg/ml的 α-萘胺溶液),0.lmol/LpH7.0的磷酸缓冲液(配制储备液A:0.2mol/L磷酸ˉ 氢钠,储备液B:0.2mol几L磷酸氢二钠,A液39.0ml,B液61.0ml,稀释至200m1), 1%对氨基苯磺酸(将1g对氨基苯磺酸溶解于100ml30%醋酸溶液当中),亚硝酸钠 溶液(称10mg亚硝酸钠溶于100ml水中)。 ②活体法测定硝酸还原酶活性: α-萘胺溶液2(称取0.2gα-萘胺,先用1ml浓盐酸的蒸馏水中,然后加水到 l00m1),0.lmol/LpH7.5的磷酸缓冲液(配制储备液A:0.2mol/L磷酸二氢钠, 储备液B:0.2mol/L磷酸氢二钠,A液16.0ml,B液84.0ml,稀释至200m1),0.2mol/L 硝酸钾溶液(溶解Σ0.22g硝酸钾于100oul蒸馏水中),磺胺试剂(g磺胺加25m 浓盐酸,用蒸馏水稀释至0m1),亚硝酸钠标准溶液(lg亚硝酸钠用蒸馏水溶解 成1000ml。然后吸取5ml,再加蒸馏水稀释成1000ml,此溶液含亚硝酸钠5μg/ml 用时稀释) ③配制不同的p的培养液:各种盐类,λNaCl,KCl,碳酸氢钠,磷酸一氢钾,磷 酸二氢钾,HCl,NaOH,植物激素等 五、试验方法 ①蚕豆培养 土壤种植,快速培育,再将豆苗移栽,长成一定程度的植株,实验备用。 ②在离体培养的培养基中设置不同的酸碱梯度,PH=5、6.5、8三个梯度进行育种。 在经过一定时间后视察纪录(其中可能会有不同程度的筛选) ③用酸度计法测定pH ④用形态学方法测定植株生长状况,包括高矮,颜色等等指标; ⑤用通过测定a-萘胺的氧化能力的方法来测定根系活力 ⑥用磺胺比色法测定硝酸还原酶的活性; ⑦通过便携式光合测定仪测定光和强度。 试验进度安排: 1)10.22-115两周时间育种,长出幼苗,期间定期观察测出一些指标 2)1161.20移栽长出真叶,期间定期观察测出一些指标 3)11.21-11.30测出实验指标; 4)121-1210写出报告 七、实验步骤 1)育种蚕豆 在4x8种植盘内装入新鲜泥土,每个孔种植2枚蚕豆种子,共种植4个盘子 即一共有256枚种子。我们先用温水,也就是30度的水将种子泡了两个小时,然石蕊试纸等 ③ α-萘胺氧化法测定根系活力的测定：分光光度计，分析天平，烘箱，50ml 三 角烧瓶 x2,量筒 x4,移液管 x4，容量瓶 x2，烧杯、试管多个 ④ 活体法测定硝酸还原酶活性：分光光度计，真空泵（或注射器），温箱，天平， 真空干燥器，50ml 三角烧瓶 x2，钻孔器，烧杯、试管多个 ⑤ 便携式光和测定仪法测定植物光和强度：ECA-PB04025 光和测定仪 四、 实验试剂： ① α-萘胺氧化法测定根系活力的测定： α-萘胺溶液 1（称取 10mgα-萘胺，先用 2ml 左右的 95%乙醇溶解，然后加水到 200ml，成为 50μg/ml 的溶液，取 150ml 该溶液再加水 150ml 稀释成 25μg/ml 的 α-萘胺溶液），0.1mol/L pH7.0 的磷酸缓冲液（配制储备液 A：0.2mol/L 磷酸二 氢钠，储备液 B：0.2mol/L 磷酸氢二钠，A 液 39.0ml，B 液 61.0ml，稀释至 200ml）， 1%对氨基苯磺酸（将 1g 对氨基苯磺酸溶解于 100ml30%醋酸溶液当中），亚硝酸钠 溶液（称 10mg 亚硝酸钠溶于 100ml 水中）。 ② 活体法测定硝酸还原酶活性： α-萘胺溶液 2（称取 0.2gα-萘胺，先用 1ml 浓盐酸的蒸馏水中，然后加水到 100ml），0.1mol/L pH7.5 的磷酸缓冲液（配制储备液 A：0.2mol/L 磷酸二氢钠， 储备液 B：0.2mol/L 磷酸氢二钠，A 液 16.0ml，B 液 84.0ml，稀释至 200ml），0.2mol/L 硝酸钾溶液（溶解 20.22g 硝酸钾于 1000ml 蒸馏水中），磺胺试剂（1g 磺胺加 25ml 浓盐酸，用蒸馏水稀释至 100ml），亚硝酸钠标准溶液（1g 亚硝酸钠用蒸馏水溶解 成 1000ml。然后吸取 5ml，再加蒸馏水稀释成 1000ml，此溶液含亚硝酸钠 5μg/ml， 用时稀释） ③ 配制不同的 pH 的培养液：各种盐类，入 NaCl，KCl，碳酸氢钠，磷酸一氢钾，磷 酸二氢钾，HCl，NaOH，植物激素等 五、 试验方法： ① 蚕豆培养： 土壤种植，快速培育，再将豆苗移栽，长成一定程度的植株，实验备用。 ②在离体培养的培养基中设置不同的酸碱梯度，PH= 5 、6.5、 8 三个梯度进行育种。 在经过一定时间后视察纪录（其中可能会有不同程度的筛选） ③用酸度计法测定 pH； ④用形态学方法测定植株生长状况，包括高矮，颜色等等指标； ⑤用通过测定 a-萘胺的氧化能力的方法来测定根系活力； ⑥用磺胺比色法测定硝酸还原酶的活性； ⑦通过便携式光合测定仪测定光和强度。 六、 试验进度安排： 1）10.22-11.5 两周时间育种，长出幼苗，期间定期观察测出一些指标； 2）11.6-11.20 移栽长出真叶，期间定期观察测出一些指标； 3）11.21-11.30 测出实验指标； 4）12.1-12.10 写出报告。 七、 实验步骤： 1） 育种蚕豆： 在 4x8 种植盘内装入新鲜泥土，每个孔种植 2 枚蚕豆种子，共种植 4 个盘子， 即一共有 256 枚种子。我们先用温水，也就是 30 度的水将种子泡了两个小时，然